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不同地區(qū)海芋與混淆品尖尾芋的生藥鑒定與顯微定量分析研究

2020-01-18 02:14
關(guān)鍵詞:維管束草酸鈣根莖

浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 杭州 310053

海芋為天南星科海芋屬植物海芋(Alocasia macrorrhiza(L.)Schott)的干燥根莖,又名野芋、狼毒、獨(dú)角蓮、野芋頭、坡扣等,載于《本草綱目》,主要分布于我國華南、西南及福建、臺灣等地[1]。海芋味辛,性寒,有毒,具有清熱解毒、行氣止痛、散結(jié)消腫等功效,可用于治療高熱流感、風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、疔瘡腫毒等疾病,同時(shí)也是浙江、上海地區(qū)地方抗癌用藥蛇六谷的來源之一[2-3]?,F(xiàn)代研究表明,海芋具有抗腫瘤[4]、抗肝癌[5]、抗炎鎮(zhèn)痛[6-7]、抗真菌[8-9]、抗氧化[10]等生物活性。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),海芋石油醚部位對肝癌H22荷瘤小鼠腫瘤具有明顯的抑制作用[11]。

目前國內(nèi)外對海芋的研究主要集中于化學(xué)成分與藥理研究,其藥材鑒定學(xué)資料相對較少,僅有韋松基等[12]和郭微等[13-14]學(xué)者的報(bào)道,亦未見針對海芋藥材的顯微定量研究。而且不同地區(qū)的海芋由于生長環(huán)境的不同,可能在性狀、顯微及理化方面存在差異。由于海芋屬植物種類多樣,與海芋親緣關(guān)系相近的植物還有尖尾芋(Alocasia cucullata(Lour.)Schott)、箭葉海芋(Alocasia longiloba(Lour.)Schott)和南海芋(Alocasia hainanica(Lour.)Schott)等[15]。海芋屬植物外形相似,極易造成藥材品種混淆,誤采誤食還易造成中毒事件的發(fā)生,如神經(jīng)系統(tǒng)毒性作用[16-18]。尤其同為天南星科海芋屬的尖尾芋,在性狀、顯微及理化特征及藥理活性方面與海芋存在諸多相似的特點(diǎn),如尖尾芋也有抗腫瘤[19]、抗胃癌[20]、抗惡性黑色素瘤[21]等作用。因海芋與尖尾芋均有毒,為保證臨床用藥的安全性與來源可溯性,有必要對不同地區(qū)的海芋和混淆品尖尾芋進(jìn)行對比分析。本文采用傳統(tǒng)的鑒別方法結(jié)合顯微定量分析法對不同地區(qū)的海芋和混淆品尖尾芋藥材進(jìn)行研究,旨在為該藥的臨床應(yīng)用及質(zhì)量控制提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料 實(shí)驗(yàn)用海芋原植物分別采自重慶、廣東、廣西、四川、江蘇,混淆品尖尾芋采自貴州。樣品批號分別為重慶海芋(20150630)、廣東海芋(20190308)、廣西海芋(20190310)、四川海芋(20190318)、江蘇海芋(20190309)、尖尾芋(20190320)。所采植物均為野生,經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源研究所黃真教授鑒定,海芋為天南星科(Araceae)海芋屬(Alocasia)植物海芋(Alocasia macrorrhiza(L.)Schott)的葉及根莖,尖尾芋為天南星科(Araceae)海芋屬(Alocasia)植物尖尾芋Alocasia cucullata(Lour.)Schott的葉及根莖。甲醛-醋酸-乙醇(formalin-acetic acid-alcohol,F(xiàn)AA)固定液由10%甲醛5mL,冰醋酸5mL,70%乙醇90mL配制而成。

1.2 儀器 KD-BM生物組織包埋機(jī)及KD-BL包埋機(jī)冷凍臺(浙江金華市科迪儀器設(shè)備有限公司),HM430滑動切片機(jī)(賽默飛世爾科技有限公司),BX51正置顯微鏡及DP72顯微鏡攝影儀(奧林巴斯有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 基原鑒定 觀察植物形態(tài),結(jié)合文獻(xiàn),仔細(xì)鑒定不同地區(qū)的海芋和尖尾芋根、莖、葉、花、果實(shí)等器官,并描述其特征。

1.3.2 性狀鑒定 通過眼觀、手摸、鼻聞、口嘗等方法,對不同地區(qū)的海芋和尖尾芋飲片的形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、折斷面特征及氣、味等進(jìn)行鑒定。

1.3.3 顯微鑒定

1.3.3.1 石蠟永久切片 對海芋和尖尾芋葉片、根莖進(jìn)行石蠟永久切片制作[22],顯微鏡下觀察,結(jié)合數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)記錄觀察結(jié)果。

1.3.3.2 藥材粉末制片 取干燥藥材粉碎,過60目篩,混合均勻。取少量藥材粉末滴加水合氯醛溶液透化,后滴加少許稀甘油,蓋上蓋玻片后用吸水紙吸去多余液體,顯微鏡下觀察。

1.3.3.3 顯微定量分析 顯微觀測樣品制片:將樣品粉碎,過100目篩。準(zhǔn)確稱取25mg樣品,加1mL水合氯醛溶液,充分混勻,取混懸液150μL透化,再滴加100μL甘油,用22mm×22mm蓋玻片封片。每份樣品平行制作3張裝片[23-24]。

1.3.3.4 顯微特征常數(shù)測定 將每張樣品制片平分為9個(gè)區(qū)域,置于10×10倍鏡下觀察,分別統(tǒng)計(jì)9個(gè)觀測視野中的草酸鈣針晶數(shù),合并數(shù)據(jù),計(jì)算草酸鈣針晶數(shù)量,并使用顯微成像系統(tǒng)測量每張裝片中草酸鈣針晶的長度。

其中:m為每片中草酸鈣針晶的數(shù)量(個(gè)),v為混懸液總體積(1mL),V 為裝片中混懸液體積(150μL),W 為取樣量(25mg)。

1.3.4 理化鑒定 取海芋藥材粗粉10g,置于圓底燒瓶中,加入75%乙醇100mL,水浴加熱回流1h,放冷后過濾。將醇提液分為若干份,分別檢查以下項(xiàng)目,觀察顏色反應(yīng)并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。見表1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料若符合正態(tài)分布且滿足方差齊性,以±s表示,各組間差異采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用顯著差異法(LSD-t);不滿足方差齊性的計(jì)量資料,組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 理化鑒定檢查項(xiàng)目Tab.1 Examination items of physical and chemical identification

2 結(jié)果

2.1 基原鑒定 海芋為多年生大型草本植物,高0.5~1.5m,具匍匐、直立地上莖,莖呈圓柱形,直徑10~30cm。葉柄長60~90cm,基部擴(kuò)大成鞘,抱莖;葉片呈闊卵形,先端短尖,亞革質(zhì),黃綠色,長50~90cm,寬 40~90cm,邊緣波狀;側(cè)脈 9~12對,下部較粗,向上漸狹?;ㄐ虮蕡A柱形,長12~60cm,2~3枚叢生。佛焰苞管部常卵形或短橢圓形;檐部舟狀,先端喙?fàn)?,長10~30cm。肉穗花序長10~17cm,短于佛焰苞,花序下部為雌花,中部為中性花,上部為雄花;附屬器圓錐狀,長3~5.5cm,粗1~2cm,嵌以不規(guī)則槽紋。漿果紅色,卵狀,長 8~10mm,粗 5~8mm,種子 1~2 枚。

尖尾芋為直立草本。高15~60cm,地上莖直徑 3~6cm,周圍具環(huán)形葉痕,葉柄基部擴(kuò)大成鞘。葉片寬卵狀心形,先端驟狹具凸尖,膜質(zhì)至亞革質(zhì),深綠色,長10~40cm,寬 7~28cm,邊緣全緣;側(cè)脈 5~8 對,葉片下部2對側(cè)脈由中側(cè)基部出發(fā),往下彎曲再往上弧度延伸?;ㄐ虮蕡A柱狀,長20~30cm,常單生。佛焰苞近肉質(zhì),管部長圓狀卵形;檐部狹舟狀,邊緣內(nèi)卷,先端具狹長的凸尖,長5~10cm,肉穗花序短于佛焰苞,長約10cm,花序下部為雌花,中部為中性花,上部為雄花;附屬器狹圓錐形,長約3.5cm,下部粗6mm。漿果近球形,直徑6~8mm,種子1枚。

2.2 性狀鑒定 不同地區(qū)的海芋根莖呈橢圓形、長橢圓形或圓柱形,大小不等,長者可達(dá)40cm,直徑2~8cm。表面棕色或棕褐色,具明顯環(huán)狀節(jié)與圓形根痕。質(zhì)堅(jiān)實(shí),斷面白色粉質(zhì),內(nèi)皮層環(huán)清晰,維管束呈淡黃色點(diǎn)狀散在。氣微,味淡,嚼之麻舌。商品呈類圓形或長橢圓形片狀,厚2~3mm,常卷曲成各種形態(tài),邊緣皺縮。見圖1A。

尖尾芋根莖呈類圓柱形,大小不等,長10~20cm,直徑2.5~4.5cm。表面棕色或棕褐色,具環(huán)狀節(jié)或圓形根痕。質(zhì)堅(jiān)硬,斷面灰白色粉質(zhì)樣,內(nèi)皮層環(huán)較為明顯,維管束呈淡黃色點(diǎn)狀散在。氣微,味淡,嚼之麻舌。商品呈類圓形片狀,厚約3mm,木栓層常向內(nèi)皺縮,飲片微有卷曲。見圖1B。

2.3 顯微鑒定

2.3.1 不同地區(qū)海芋和混淆品尖尾芋葉片顯微鑒定

2.3.1.1 葉片橫切面 海芋葉為兩面葉。上表皮細(xì)胞類長方形、稍大,下表皮細(xì)胞類長方形或類圓形,稍?。簧舷卤砥ぞ獗唤廾珷罱琴|(zhì)層,且上表皮角質(zhì)層較密集,下表皮角質(zhì)層較稀疏;柵欄組織1~2列,呈短柱狀,長45~65μm,約占葉肉組織1/2,上柵欄組織通過主脈,下柵欄組織于中脈處中斷;海綿組織位于柵欄組織下方,薄壁細(xì)胞形狀不規(guī)則,排列疏松;主脈呈半圓形,向下顯著突起,上面微微突起;維管束外韌型,木質(zhì)部可見1~2個(gè)成對大型導(dǎo)管,以單個(gè)大型導(dǎo)管存在居多;主脈薄壁細(xì)胞與葉肉細(xì)胞中可見草酸鈣簇晶和針晶,多分布于靠近氣腔邊緣及內(nèi)側(cè)處。不同地區(qū)的海芋葉片橫切面具有相似的結(jié)構(gòu)特征。見圖 2A、圖 2B、圖 2F。

圖1 海芋和尖尾芋藥材飲片F(xiàn)ig.1 Medicinal pieces of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott and Alocasia cucullata(Lour.)Schott

尖尾芋為兩面葉。上表皮細(xì)胞類方形、略大,下表皮細(xì)胞較圓、略方,且形狀微小于上表皮細(xì)胞;上下表皮均具較薄的角質(zhì)層,上表皮角質(zhì)層較平坦,下表皮角質(zhì)層較粗糙,凸起較多;柵欄組織1~2列,呈短柱狀,長50~100μm,約占葉肉組織1/3,上柵欄組織通過主脈,下柵欄組織于中脈處中斷;海綿組織位于柵欄組織下方,薄壁細(xì)胞排列寬廣,細(xì)胞之間較為疏松;主脈呈半圓形,向下顯著突起,上面微微隆起;維管束外韌型,散生,木質(zhì)部可見1~2個(gè)大型導(dǎo)管,以成對導(dǎo)管存在居多;主脈薄壁細(xì)胞與葉肉細(xì)胞中可見草酸鈣簇晶和針晶,分布于氣腔周圍。見圖2C、圖2D。

2.3.1.2 葉下表皮撕片 不同地區(qū)的海芋下表皮細(xì)胞垂周壁較彎曲,排列緊密,氣孔較多;氣孔平軸式;副衛(wèi)細(xì)胞 2個(gè),長 30~42μm,寬 12~32μm。尖尾芋下表皮細(xì)胞垂周壁較彎曲,氣孔較多,平軸式;副衛(wèi)細(xì)胞 2個(gè),長 26~35μm,寬 5~10μm。從顯微結(jié)果觀察,可見海芋與尖尾芋的氣孔存在細(xì)微差別,表現(xiàn)為海芋的氣孔副衛(wèi)細(xì)胞寬度較大,而尖尾芋的副衛(wèi)細(xì)胞寬度較窄。見圖2E、圖3。

2.3.1.3 葉片粉末 不同地區(qū)海芋粉末大多墨綠色,存在大量螺紋導(dǎo)管;草酸鈣簇晶多見,多集中分布于薄壁細(xì)胞中,直徑13~30μm;草酸鈣針晶成束或散在,長 30~68μm。

尖尾芋粉末墨綠偏深,存在較多螺紋導(dǎo)管;草酸鈣簇晶散在分布于薄壁細(xì)胞,直徑15~27μm;草酸鈣針晶散在,長 25~62μm。

2.3.2 不同地區(qū)海芋和混淆品尖尾芋根莖顯微鑒定

2.3.2.1 根莖橫切面 海芋表皮細(xì)胞1列,切向延長,常脫落。木栓層較厚,由7~12列細(xì)胞組成,類長方形,切向長 34~104μm,徑向長 17~35μm,排列不甚規(guī)則。皮層細(xì)胞類圓形,排列疏松,散有外韌型根跡維管束,近木栓層處的細(xì)胞受擠壓呈類長方形。中柱維管束散在,多周木型,少外韌型,存在維管束走向不規(guī)則者;導(dǎo)管多數(shù)。薄壁組織中散有黏液細(xì)胞,內(nèi)含草酸鈣針晶及簇晶;薄壁細(xì)胞中含淀粉粒。不同地區(qū)海芋結(jié)構(gòu)相似,其中廣東、廣西、江蘇產(chǎn)海芋根莖中草酸鈣針晶與簇晶極為明顯,四川產(chǎn)海芋根莖中可見較多棕色塊,多分布于導(dǎo)管附近薄壁組織。見圖4。

尖尾芋表皮細(xì)胞一列,切向延長,常脫落。木栓層較厚,由5~6列扁平類長方形細(xì)胞組成。排列不甚規(guī)則。皮層細(xì)胞類圓形,排列較為疏松,散在外韌型根跡維管束。中柱維管束較多周木型,亦有外韌型維管束散在;導(dǎo)管多數(shù),薄壁細(xì)胞中含黏液細(xì)胞,內(nèi)含草酸鈣簇晶與草酸鈣針晶。數(shù)量相對于海芋根莖較少。見圖4F。

2.3.2.2 根莖粉末 海芋粉末黃白色。淀粉粒較多,常為單粒,呈長卵形、腎形或類圓形,直徑3~17μm,臍點(diǎn)及層紋均不明顯。草酸鈣針晶單個(gè)散在或成束存在于黏液細(xì)胞中,長29~90μm。草酸鈣簇晶較多,直徑26~65μm,棱角較尖銳。導(dǎo)管為環(huán)紋導(dǎo)管和螺紋導(dǎo)管,直徑24~95μm。木栓細(xì)胞黃棕色,類方形。棕色塊黃棕色或紅棕色,類圓形或橢圓形,散在。見圖5。尖尾芋粉末黃白色。淀粉粒眾多,常以單粒存在,類圓形居多,直徑4~25μm,臍點(diǎn)及層紋均不明顯。草酸鈣針晶較少,單個(gè)散在或成束分布,長30~88μm。草酸鈣簇晶直徑21~55μm,棱角較尖銳。環(huán)紋導(dǎo)管居多,直徑20~80μm。木栓細(xì)胞黃棕色,類方形或長方形。棕色塊黃棕至深紅棕色,較不規(guī)則,散在。

圖2 海芋與尖尾芋葉顯微鑒定Fig.2 Microscopic images of the leaves of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott and Alocasia cucullata(Lour.)Schott

2.3.3 顯微定量分析 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,重慶海芋草酸鈣針晶數(shù)量為86.28~125.11個(gè)/mg,廣東海芋128.27~140.53 個(gè)/mg,廣西海芋為 116.80~137.07 個(gè)/mg,四川海芋為104.27~122.40個(gè)/mg,江蘇海芋為114.93~137.07 個(gè)/mg,貴州海芋為 76.00~101.33 個(gè)/mg,6 組數(shù)據(jù)均滿足方差齊性,且與尖尾芋相比,廣東、廣西、四川、江蘇四個(gè)地區(qū)的海芋根莖中草酸鈣針晶數(shù)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重慶海芋草酸鈣針晶平均長度為 44.72~46.40μm,廣東海芋為 63.05~66.77μm,廣西海芋為 57.62~62.27μm,四川海芋為 48.47~51.04μm,江蘇海芋為58.75~62.88μm,尖尾芋草酸鈣針晶平均長度為56.89~64.19μm,6組數(shù)據(jù)均滿足方差齊性,且重慶,廣東與四川海芋針晶長度與尖尾芋相比有顯著性差異(P<0.05)。見表 2。

圖3 不同地區(qū)的海芋與混淆品尖尾芋葉下表皮撕片氣孔(400×)Fig.3 Stomata of tear surface of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott lower epidermis in different regions and adulterant Alocasia cucullata(Lour.)Schott lower epidermis(400×)

表2 不同地區(qū)的海芋與混淆品尖尾芋根莖草酸鈣針晶的顯微數(shù)量統(tǒng)計(jì)(±s,n=3)Tab.2 The microscopic quantitative statistics of needle-like calcium oxalate crystal in the rhizome of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott in different regions and adulterant Alocasia cucullata(Lour.)Schott(±s,n=3)

表2 不同地區(qū)的海芋與混淆品尖尾芋根莖草酸鈣針晶的顯微數(shù)量統(tǒng)計(jì)(±s,n=3)Tab.2 The microscopic quantitative statistics of needle-like calcium oxalate crystal in the rhizome of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott in different regions and adulterant Alocasia cucullata(Lour.)Schott(±s,n=3)

注:不同地區(qū)的海芋與尖尾芋針晶數(shù)量與長度比較,*P<0.05Note:The comparisom of the number and length of needle crystals between Alocassia macrorrhiza(L)Scott and Alocassia cullata(Lour.)Scott in different regions,*P<0.05

樣品 草酸鈣針晶數(shù)量(個(gè)/mg) 草酸鈣針晶長度(μm)重慶海芋廣東海芋廣西海芋四川海芋江蘇海芋尖尾芋107.31±19.61 134.22±6.14*125.33±10.50*112.44±9.20*126.67±11.13*87.11±12.95 45.73±0.88*65.31±1.99*60.68±2.65 50.02±1.36*60.31±2.24 60.61±3.65

2.4 理化鑒定 不同地區(qū)海芋根莖醇提液含鞣質(zhì)(加三氯化鐵顯墨綠色,加氯化鈉明膠產(chǎn)生白色沉淀),其中江蘇產(chǎn)海芋醇提液三氯化鐵顏色反應(yīng)最為明顯;尖尾芋根莖醇提液含較少鞣質(zhì)(加三氯化鐵顯淺綠色,加氯化鈉明膠產(chǎn)生白色渾濁)。不同地區(qū)海芋均含有皂苷(泡沫實(shí)驗(yàn)泡沫不消失);尖尾芋不含或含少量皂苷(泡沫實(shí)驗(yàn)為負(fù)性結(jié)果)。不同地區(qū)海芋和尖尾芋均含有機(jī)酸(pH 5~6)。不同地區(qū)海芋均含黃酮(加鹽酸-鎂粉顯橙紅色;氨熏試驗(yàn)呈黃色,紫外下顯黃色熒光;熒光試驗(yàn)有強(qiáng)烈熒光),其中江蘇與廣東結(jié)果較為明顯;尖尾芋不含或含較少黃酮(鹽酸-鎂粉反應(yīng),氨熏試驗(yàn),紫外觀察及熒光試驗(yàn)均為負(fù)性結(jié)果)。不同地區(qū)海芋均含甾醇、三萜類(Salkowski氯仿-濃硫酸反應(yīng),硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色,氯仿層有綠色熒光出現(xiàn));尖尾芋含甾醇、三萜類(Salkowski氯仿-濃硫酸反應(yīng),硫酸層呈現(xiàn)藍(lán)色,氯仿層無綠色熒光出現(xiàn))。不同地區(qū)海芋和尖尾芋均含生物堿(加碘化鉍鉀產(chǎn)生橘紅色無定形沉淀;加硅鎢酸產(chǎn)生淡黃色沉淀)。初步證明海芋根莖中含有鞣質(zhì)、皂苷、有機(jī)酸、黃酮、甾醇、三萜類、生物堿等化學(xué)成分,而尖尾芋中鞣質(zhì)、皂苷及黃酮含量較少或無。

圖4 不同地區(qū)的海芋和混淆品尖尾芋根莖顯微鑒定(40×)Fig.4 Microscopic images of the rhizome of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott in different regions and adulterant Alocasia cucullata(Lour.)Schott(40×)

3 討論

3.1 不同地區(qū)海芋對比分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,不同地區(qū)的海芋原植物特征,葉片和根莖的性狀特征及顯微特征均十分相似。具環(huán)狀節(jié)與圓形根痕,斷面具內(nèi)皮層環(huán)與點(diǎn)狀維管束,嚼之麻舌;顯微鏡下可見根莖中柱維管束多周木型,少外韌型,黏液細(xì)胞中含草酸鈣針晶和簇晶;理化鑒定可初步證明海芋根莖中含有鞣質(zhì)、皂苷、有機(jī)酸、黃酮、甾醇、三萜類和生物堿等化學(xué)成分。由于不同地區(qū)海芋的生長環(huán)境不同,海芋之間的細(xì)胞內(nèi)含物可能略有差異。表現(xiàn)為根莖橫切面中,廣東、廣西及江蘇海芋的草酸鈣針晶及簇晶數(shù)量較多,且廣東海芋針晶的平均長度較長,四川海芋根莖的導(dǎo)管周圍棕色塊較多;在理化檢驗(yàn)中江蘇的鞣質(zhì)反應(yīng)較明顯,廣東與江蘇的黃酮顏色反應(yīng)較明顯,其他方面幾無差異。以上實(shí)驗(yàn)表明不同地區(qū)海芋的性狀特征基本一致,可作為海芋的鑒別特征。

圖5 海芋根莖粉末顯微鑒定(400×)Fig.5 Microscopic images of the rhizome powder of Alocasia macrorrhiza(L.)Schott(400×)

3.2 海芋與尖尾芋的對比分析

3.2.1 海芋與尖尾芋的基原鑒別 筆者對不同地區(qū)的海芋與混淆品尖尾芋的鑒別研究發(fā)現(xiàn),作為海芋的親近緣種,尖尾芋與海芋存在較大的相似之處。首先二者均為直立草本,具環(huán)形葉痕,葉柄基部擴(kuò)大成鞘,花序柄圓柱形,檐部舟狀,具佛焰苞,肉穗花絮?;ㄐ蛳虏繛榇苹?,中部為中性花,上部為雄花,果實(shí)類型為漿果等。但海芋個(gè)體較大,葉片先端短尖,邊緣波狀,側(cè)脈數(shù)較多,花序柄2~3枚叢生,種子1~2枚;尖尾芋個(gè)體較小,葉片尖端驟狹具凸尖,邊緣全緣,側(cè)脈數(shù)較少,花序柄常單生,種子1枚等。

3.2.2 海芋與尖尾芋葉的鑒別 海芋與尖尾芋的葉片均為兩面葉,上表皮細(xì)胞較大于下表皮細(xì)胞;均有上下兩層?xùn)艡诮M織,且上柵欄組織通過主脈,維管束外韌型具1~2個(gè)導(dǎo)管;薄壁細(xì)胞中均含草酸鈣針晶與簇晶。海芋上表皮具睫毛狀角質(zhì)層,柵欄組織約占葉肉組織1/2,以單個(gè)大型導(dǎo)管為主;尖尾芋上表皮角質(zhì)層較平坦,柵欄組織約占葉肉組織1/3,以成對導(dǎo)管為主。且葉片顯微中觀察到在下表皮細(xì)胞中,尖尾芋的氣孔副衛(wèi)細(xì)胞寬度較窄,而海芋副衛(wèi)細(xì)胞較寬。

3.2.3 海芋與尖尾芋根莖的鑒別 在藥材飲片的觀察中,不同地區(qū)的海芋與尖尾芋均呈圓柱形,表面棕色或棕褐色,具明顯的環(huán)狀節(jié)與圓形根痕。質(zhì)堅(jiān)實(shí),斷面粉質(zhì),內(nèi)皮層環(huán)明顯,維管束淡黃色點(diǎn)狀散在。海芋卷曲程度較大,邊緣皺縮,尖尾芋卷曲程度較小,形狀較為規(guī)則。根莖顯微中海芋和尖尾芋的結(jié)構(gòu)特征相似,均由木栓層、皮層、根跡維管束、中柱維管束等組成,且薄壁細(xì)胞中均含草酸鈣針晶及簇晶。但海芋木栓層較厚,尖尾芋木栓層較薄。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中觀察到海芋根莖的草酸鈣針晶和簇晶數(shù)量也明顯多于尖尾芋。理化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)海芋和尖尾芋均含鞣質(zhì)、有機(jī)酸、甾醇、三萜類、生物堿等化合物,但尖尾芋顏色反應(yīng)不及海芋明顯。提示可能尖尾芋根莖中上述含量較少,且尖尾芋中皂苷及黃酮含量不易檢出。

目前關(guān)于海芋屬植物的鑒別分析資料較少,海芋與尖尾芋的鑒別特征也只有郭微與張宏偉等人[13-14]關(guān)于海芋與尖尾芋地上部分尤其是葉的比較分析,未有對海芋與尖尾芋根莖進(jìn)行鑒定研究。本文運(yùn)用傳統(tǒng)的中藥鑒定方法與顯微定量分析法對不同地區(qū)的海芋及尖尾芋進(jìn)行研究,所得海芋的特征描述具有代表性,結(jié)果不但完善了海芋藥材的鑒定學(xué)資料,還為海芋屬近緣植物的鑒別提供參考。尤其在藥材區(qū)分中,根莖橫切面草酸鈣結(jié)晶的類型與分布可作為海芋的主要顯微鑒別特征。

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