孔一卜，孫麗平

(1. 長春中醫(yī)藥大學(xué),長春 130117； 2. 長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院兒童診療中心,長春 130021)

支氣管哮喘(Bronchial asthma)簡稱哮喘，是一種常見的氣道慢性炎癥性呼吸系統(tǒng)疾病。全球哮喘防治創(chuàng)議(global initiative for asthma，GINA)最新數(shù)據(jù)表明，目前全球哮喘患者超過3億人，并以每10年增加20%～25%的速率快速增長[1]，預(yù)計2025年全球罹患哮喘人數(shù)將增加至4億。慢性氣道炎癥和氣道重塑是哮喘重要的病理生理改變，與哮喘反復(fù)發(fā)作和病情輕重密切相關(guān)。NF-κB是一種核轉(zhuǎn)錄因子，與哮喘發(fā)病關(guān)系密切，研究表明當(dāng)其被激活后可促進(jìn)與哮喘有關(guān)的多種炎癥因子的基因轉(zhuǎn)錄，從而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生，誘發(fā)哮喘發(fā)病或是加重病情。中藥治療哮喘的臨床療效已經(jīng)受到廣泛認(rèn)可。近5年來，中藥調(diào)控NF-κB信號通路減輕哮喘氣道炎癥、抑制氣道重塑等成為研究的熱點，也有諸多的研究報道。本文通過檢索近5年相關(guān)文獻(xiàn)，就中藥調(diào)控NF-κB信號通路治療哮喘的作用靶點及機制作一綜述。

1 NF-κB及NF-κB信號通路

核因子-kB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)由5個蛋白成員組成，分別是RelA(P65)、RelB、c-Rel、P50/P105(NF-kB1)和P52/P100(NF-kB2)，各蛋白成員間可形成不同形式的同源或異源二聚體復(fù)合物[2]，其中以P65/P50異源二聚體形式最為常見，也是其活性的主要形式[3]。NF-κB抑制蛋白(inhibitory-κB，IκB)平時與二聚體的RelA(P65)、RelB或c-Rel亞基C末端結(jié)合，掩蓋NF-κB的核定位序列，使NF-κB處于失活狀態(tài)[4]。而IκB的活性又由κB激酶(κB kinase，IKK)所抑制，IKK由IKK-α、IKK-β和IKK-γ 3個亞基組成，其中IKK-α、IKK-β可被上游絲裂原活化蛋白激酶類或NF-κB激酶磷酸化，激活I(lǐng)KK。

現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)2條NF-κB信號通路，分為經(jīng)典信號傳導(dǎo)途徑和非經(jīng)典信號傳導(dǎo)途徑，其中經(jīng)典信號傳導(dǎo)途徑與哮喘的發(fā)病密切相關(guān)，也是研究的熱點。經(jīng)典途徑中細(xì)胞處于靜息狀態(tài)時，NF-κB通常與抑制蛋白IκB結(jié)合，以無活性的方式存在于胞質(zhì)中。當(dāng)細(xì)胞有外界刺激如脂多糖(LPS)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、促炎癥因子、白介素-1(IL-1)等刺激時，NF-κB的誘導(dǎo)劑通過細(xì)胞膜激活胞漿中的IKK，其中IKK-α和IKK-β在IKK-γ的協(xié)同作用下引起IκB磷酸化，并進(jìn)行泛素化降解進(jìn)而使胞漿中游離的NF-κB 被轉(zhuǎn)運至細(xì)胞核內(nèi)，DNA分子靶基因中啟動子區(qū)域的NF-κB結(jié)合位點相結(jié)合，從而啟動靶基因轉(zhuǎn)錄，生成相應(yīng)的mRNA及蛋白質(zhì)[5]。非經(jīng)典途徑主要是在調(diào)節(jié)淋巴器官和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的發(fā)展中起作用[6]。

2 NF-κB信號通路與哮喘的關(guān)系

在哮喘病的發(fā)病機制中，信號通路起重要作用。現(xiàn)有研究結(jié)果表明，慢性氣道炎癥和氣道重塑的形成與多條信號通路傳導(dǎo)有關(guān)。其中NF-κB通路是哮喘病中的關(guān)鍵信號通路，該信號通路可以通過生長因子、細(xì)胞因子、炎性介質(zhì)、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子、血管細(xì)胞黏附分子1和細(xì)胞間黏附因子1、MMP和金屬蛋白酶組織抑制劑等作用滲透于哮喘發(fā)病機制的多個環(huán)節(jié)和層面，參與哮喘的發(fā)病過程。研究表明[7-8]，參與哮喘氣道炎癥過程的細(xì)胞因子炎癥遞質(zhì)在基因轉(zhuǎn)錄水平上均受NF-κB調(diào)控。Pgaek等[9]通過研究發(fā)現(xiàn)，祛除哮喘小鼠的NF-κB基因，與哮喘發(fā)病密切相關(guān)的氣道嗜酸性粒細(xì)胞聚集、氣道高反應(yīng)性及氣道炎癥等無法產(chǎn)生。目前NF-κB活性的增強已經(jīng)在哮喘性過敏性炎癥實驗?zāi)Ｐ秃筒∪酥械玫阶C實。Barnes等[10]發(fā)現(xiàn)，在哮喘患者支氣管上皮細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及黏膜下細(xì)胞上NF-κB的活性增強，提出抑制NF-κB的活性可能是防治哮喘的一個有效途徑。NF-κB在諸多因素刺激下激活后，不僅可以促進(jìn)如細(xì)胞因子、生長因子、趨化因子等高表達(dá)而發(fā)生炎癥反應(yīng)，同時這些產(chǎn)物會反作用于NF-κB并使其活化，還可以導(dǎo)致局部炎癥發(fā)生持續(xù)擴大。

3 中藥調(diào)控NF-κB信號通路防治哮喘進(jìn)展

3.1 中藥復(fù)方

中醫(yī)理論認(rèn)為，哮喘的反復(fù)發(fā)作與“伏痰”“血瘀”“氣滯”等病理因素密切相關(guān)，其中“伏痰”是引起哮喘反復(fù)發(fā)作的病理基礎(chǔ)，伏痰日久造成的“伏痰-血瘀-氣滯”三者膠著的病理狀態(tài)，將貫穿哮喘的整個發(fā)病過程。目前中醫(yī)治療哮喘多從發(fā)作期和緩解期論治，其中發(fā)作期以止哮平喘除痰為主，佐以活血理氣之法；緩解期以補虛培元、扶正固本為主。還有學(xué)者根據(jù)中醫(yī)“肺與大腸相表里”的理論從腸論治哮喘，均取得了較好的臨床效果?；贜F-κB信號通路在哮喘發(fā)病機制中的重要作用，為進(jìn)一步明確中藥復(fù)方的作用靶點，部分學(xué)者從NF-κB信號通路方面做了相應(yīng)探究。

3.1.1 發(fā)作期 麻黃定喘湯出自《東醫(yī)壽世保元》，由麻黃、杏仁、黃芩、萊菔子、桑白皮、桔梗、麥冬、款冬花、白果等藥物組成，具有瀉肺平喘、化痰止咳的功效，可用于哮喘發(fā)作期的治療。楊今實等[11]給予哮喘小鼠模型朝醫(yī)麻黃定喘湯后發(fā)現(xiàn)，哮喘小鼠BALF中炎性細(xì)胞計數(shù)、IL-4、IL-5、IL-13水平及NF-κBp65蛋白表達(dá)水平均顯著降低(P<0.05，P<0.01)，從而推測朝醫(yī)麻黃定喘湯可能是通過阻斷NF-κB信號途徑，從而抑制氣道平滑肌和氣道上皮細(xì)胞增殖發(fā)揮治療哮喘的作用。同時研究還發(fā)現(xiàn)，麻黃定喘湯還可以通過抑制NF-κB活性、降低VEGF蛋白表達(dá)，從而抑制氣道炎癥反應(yīng)的發(fā)生[12]。

柴樸湯是中醫(yī)治療哮喘發(fā)作期的常用方劑之一，由厚樸、蘇葉、柴胡、黃芩、半夏、白參、生姜、甘草、茯苓、大棗組成，具有化痰、平喘、行氣的功效。劉鑫等[13]提取哮喘大鼠血清與大鼠氣道上皮細(xì)胞共同培養(yǎng)，模擬哮喘微環(huán)境下氣道上皮細(xì)胞的病理變化。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加入哮喘大鼠血清后，大鼠氣道上皮細(xì)胞中的TLR-4、NF-κBmRNA及蛋白表達(dá)較正常組明顯增加，而給予含柴樸湯的含藥血清與哮喘大鼠血清及大鼠氣道上皮細(xì)胞共同培養(yǎng)，TLR-4、NF-κBmRNA及蛋白表達(dá)則下調(diào)，因此推測柴樸湯可能通過抑制NF-κB通路，從而抑制支氣管上皮細(xì)胞炎癥因子的合成、分泌及其他生物學(xué)效應(yīng)，從而起到治療哮喘的作用。唐雋[14]通過研究發(fā)現(xiàn)，柴樸湯可以降低哮喘大鼠氣道壁厚度，降低TLR4、NF-κB、TGF-β1蛋白表達(dá)，升高M(jìn)AL蛋白表達(dá)，說明柴樸湯可以調(diào)節(jié)TLR4/NF-κB/MAL通路治療哮喘，其作用機制可能與其抑制NF-κB活性有關(guān)。

清熱化痰湯出自《醫(yī)學(xué)統(tǒng)旨》，是治療熱性哮喘發(fā)作期的常用方劑，由茯苓、桔梗、浙貝母、栝樓仁、知母、麥冬、桑白皮、梔子、黃芩等藥物組成，具有清瀉肺熱、化痰止咳的功效。臨床研究結(jié)果表明，本方具有較好的改善咳嗽咳痰、減少痰量及平喘的臨床效果[15]。宋洪娟等[16]在哮喘模型上就其治療氣道炎癥的作用機制進(jìn)行了相關(guān)研究，研究結(jié)果表明，清金化痰湯可以通過調(diào)控p38MAPK/NF-κB信號通路抑制炎癥細(xì)胞的浸潤，減少IL-1β、IL-8及TNF-α水平，抑制黏蛋白MUC5AC的表達(dá)，從而起到抑制氣道炎癥反應(yīng)治療哮喘的作用。

3.1.2 緩解期 中醫(yī)理論認(rèn)為，患者肺脾腎三臟功能失調(diào)導(dǎo)致的宿根伏痰是引發(fā)哮喘反復(fù)發(fā)作的重要原因，緩解期應(yīng)用補氣固本類中藥調(diào)理肺脾腎三臟功能祛除宿根伏痰，從而可有效減少哮喘的發(fā)作。袁雪晶等[17]將由炙黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、煅牡蠣、蟬蛻、陳皮、防風(fēng)、熟地黃、五味子等11味藥物組成的固本防哮飲給予哮喘緩解期小鼠模型，觀察其對小鼠氣道阻力、肺組織病理變化、肺泡灌洗液細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞分類，檢測肺組織和外周血單個核細(xì)胞中IKK-β、IκBα及NF-κBp 65蛋白表達(dá)的影響。研究結(jié)果表明，固本防哮飲可有效降低哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性，降低炎性細(xì)胞總數(shù)，減輕氣道炎癥及肺組織炎癥細(xì)胞浸潤及降低氣道壁增生增厚抑制氣道重塑。研究同時發(fā)現(xiàn)，固本防哮飲可以增加IκBα表達(dá)，抑制IKK-β、NF-κBp65表達(dá)，因此推測固本防哮飲治療哮喘的作用機制可能與其調(diào)控NF-κB信號通路有關(guān)。劉亞南等[18]研究發(fā)現(xiàn)，哮喘緩解期氣道炎癥可能與IKKβ、NF-κBp65mRNA和蛋白高表達(dá)有關(guān)，固本防哮飲在一定程度上能降低IKKβ、NF-κBp65mRNA和蛋白高表達(dá)，其治療哮喘的作用機制可能與固本防哮飲抑制IKK/NF-κB信號通路的活性，從而減輕氣道炎癥、預(yù)防哮喘發(fā)作有關(guān)。

芪味理肺湯由生黃芪、桂枝、白術(shù)、干姜、甘草、五味子等藥物組成，具有溫潤辛金培本的作用，適用于中醫(yī)哮喘緩解期肺脾腎不足之證。張研迪[19]研究發(fā)現(xiàn)，芪味理肺湯可以減輕肺組織炎癥細(xì)胞浸潤，調(diào)節(jié)炎癥因子水平，因此其可能是通過抑制IκBa的泛素化降解，從而提高細(xì)胞內(nèi)IκBa的蛋白含量，達(dá)到抑制NF-κB活性目的而發(fā)揮治療哮喘的作用。李新辰[20]給予哮喘模型芪味理肺湯后發(fā)現(xiàn)，芪味理肺湯可以下調(diào)NF-κBp65表達(dá)水平，上調(diào)IκBa水平，因此推測其抗炎作用與NF-κB信號通路抑制有關(guān)。

麥門冬湯是張仲景《金匱要略》中的經(jīng)典方劑，由麥門冬、半夏、人參、甘草、粳米、大棗等組成，具有清養(yǎng)肺胃、降逆下氣之功效，適用于哮喘緩解期肺陰虛之證。現(xiàn)代藥理研究表明，麥門冬湯具有鎮(zhèn)咳、抗呼吸道炎癥等作用。臧月生等[21]通過研究發(fā)現(xiàn)，麥門冬湯可以減輕哮喘大鼠肺組織的炎癥浸潤，降低下調(diào) IL-1β、IL-4、IL-6及IL-13含量，同時可以抑制NF-κBp65蛋白的表達(dá)，提示麥門冬湯可能通過NF-κB信號通路調(diào)控炎性細(xì)胞因子水平，從而對哮喘起到防治作用。

培土生金法又稱補脾益肺法，是中醫(yī)治療哮喘緩解期肺脾氣虛證常用的一種治法。苗蘭英等[22]自擬補脾益肺方水煎取汁后給予脾虛哮喘大鼠模型，發(fā)現(xiàn)可以增加TNF-α含量，降低IκBα表達(dá)。而服用培土生金的中藥后，TNF-α含量則減少，IκBα表達(dá)上升，說明培土生金類中藥可以通過升高IκBα的表達(dá)，抑制NF-κB活性，降低炎癥因子TNF-α的表達(dá)，對哮喘時氣道炎癥和氣道黏液高分泌起到治療作用，也提示培土生金類中藥通過補脾氣益肺氣的方法，可改善脾虛導(dǎo)致的伏痰宿根，是防治哮喘的有效藥物。

3.1.3 從腸論治 從腸論治哮喘是中醫(yī)治療肺系疾病的一種常用方法?，F(xiàn)代研究表明，過敏性哮喘與腸道菌群失調(diào)密切相關(guān)[23-24]，而相關(guān)的學(xué)者發(fā)現(xiàn)基于“肺與大腸相表里”理論的“肺腸合治”法是治療腸道菌群失調(diào)合并過敏性哮喘的有效方法。付雯[25]構(gòu)建腸道菌群失調(diào)合并過敏性哮喘模型，分別給予“桂枝加厚樸杏子湯”“增液承氣湯”和“升降散”從“治肺”“治腸”和“肺腸同治”3個方面探討腸道微生態(tài)和肺部免疫調(diào)節(jié)的關(guān)系及作用機制。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，3種治療方法對腸道菌群失調(diào)合并過敏性哮喘模型具有治療作用，其中肺腸合治組效果最好。其作用機制可能與TLRs/NF-κB信號傳導(dǎo)通路參與肺和腸的免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。劉興隆等[26]認(rèn)為，肺腸合治法可能是通過調(diào)節(jié)腸菌群增加sIgA合成，恢復(fù)肺、腸黏膜免疫功能和減弱肺組織TLR2、4/MyD88信號傳導(dǎo)，從而減少NF-κB和致炎因子的合成，最終調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡，起到防治腸道菌群失調(diào)合并過敏性哮喘的作用。

3.2 中藥單體

甘草次酸是從中藥甘草根莖中提取的一種重要的有效活性成分，具有抗炎、抗菌等作用[27]。陳偉等[28]研究發(fā)現(xiàn)，甘草次酸可以通過降低丙二醛(MDA)含量，提高超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px) 含量，以降低哮喘發(fā)作時的氧化應(yīng)激反應(yīng)。同時發(fā)現(xiàn)甘草次酸可以調(diào)節(jié)哮喘大鼠肺組織中NF-κB、IL-5及IL-6mRNA蛋白表達(dá)水平，因此推測甘草次酸可能是通過調(diào)控NF-κB信號通路拮抗大鼠哮喘時的氧化應(yīng)激反應(yīng)。

黃芪具有補氣的功效，可以調(diào)節(jié)人體的免疫功能，是一種治療哮喘的常用藥物。黃芪多糖是黃芪的提取物，具有良好的抗炎效果[29]。王金磊等[30]研究表明，黃芪多糖可改善哮喘大鼠氣道炎癥和肺I型上皮損傷，并明顯抑制NF-κB/MAPK信號通路活性,因此推測黃芪多糖治療哮喘的作用機制可能與調(diào)節(jié)相關(guān)炎癥因子水平、抑制NF-κB/MAPK信號通路活性有關(guān)。

苦豆堿研究報道其具有抗氧化、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、免疫抑制、保護心肌缺血及抗病毒等作用。李海龍等[31]將苦豆堿給予哮喘模型，觀察其對小鼠肺功能及NF-κB、TNF-α、IL-1β的影響。研究結(jié)果表明，苦豆堿可改善哮喘小鼠肺功能，減輕哮喘癥狀及炎癥反應(yīng)，其作用機制可能與調(diào)控NF-κB炎癥信號通路、降低炎癥因子TNF-α、IL-1β水平有關(guān)。

梔子苷是一種環(huán)烯醚萜類化合物，是常用藥物梔子的主要藥效成分，具有良好的抗炎活性。劉雨東等[32]研究發(fā)現(xiàn)，梔子苷可以有效減輕哮喘模型的氣道炎癥，抑制氣道平滑肌細(xì)胞增殖，其作用機制可能與梔子苷調(diào)節(jié)TLR4/NF-κB信號通路有關(guān)。

前胡是治療哮喘的常用藥物，具有降氣化痰的功效。紫花前胡苷是一種線性四氫呋喃型香豆素苷類化合物，有抗炎、抗過敏、抗氧化等多種生物活性[33-35]。熊友誼等[36]發(fā)現(xiàn)，紫花前胡苷可以降低哮喘模型中IL-4、IL-5及IL-13水平，抑制NF-κBp65水平及升高IκBα水平，說明紫花前胡苷可以減輕氣道炎癥。

苜蓿素屬于天然黃酮類化合物，廣泛存在于竹茹、竹根和淡竹葉等禾本類中草藥中?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等作用，其中以抗炎作用最明顯[37-39]。殷玉婷等[40]將苜蓿素給予哮喘模型，觀察其對氣道炎癥的影響。研究結(jié)果表明，苜蓿素可以降低NO、TNF-α、IL-1β水平，有效改善哮喘模型的氣道炎癥，下調(diào)TLR4、MyD88、NF-κBp65蛋白表達(dá)，因此推測苜蓿素治療哮喘可能與調(diào)節(jié)TLR4/MyD88/NF-κB通路有關(guān)。

兒茶素是從茶中提取出來的一類酚類活性物質(zhì)，具有一定的體外抗炎作用[41]。潘增烽等[42]為探究兒茶素哮喘炎癥的作用，將兒茶素給予哮喘小鼠模型后發(fā)現(xiàn)，兒茶素可以減輕肺組織中TSLP及Th2型IL-5、IL-13的含量，抑制NF-κBp65轉(zhuǎn)錄，說明兒茶素可以有效緩解哮喘模型的Th2型炎癥反應(yīng)，其作用可能是通過調(diào)節(jié)NF-κB通路、抑制TSLP表達(dá)實現(xiàn)的。

紅景天是藏族常用藥材，具有抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能的作用[43]。鄭明昱等[44]通過研究發(fā)現(xiàn)，紅景天可以通過抑制平滑肌增殖、氣道上皮增生和膠原的合成來抑制哮喘氣道重塑，而其作用機制可能是通過抑制NF-κB/TGF-β1通路實現(xiàn)的。

4 結(jié)語與展望

隨著哮喘發(fā)病率的逐年增加，哮喘患者也越來越多，因其反復(fù)發(fā)作難于根治，因此哮喘的防治問題也被廣泛關(guān)注。近年來，越來越多的專家學(xué)者開始探究信號傳導(dǎo)通路在治療哮喘中的作用，可以認(rèn)為信號傳導(dǎo)通路的異常既是發(fā)病的基礎(chǔ)，也是藥物治療的新靶點。NF-κB作為多條信號傳導(dǎo)通路的樞紐，其活性的增強與哮喘的發(fā)病密切相關(guān)。糖皮質(zhì)激素作為治療哮喘的一線藥物，可有效地緩解哮喘發(fā)作病情。但研究表明，糖皮質(zhì)激素不能阻斷NF-κB的持續(xù)活化[45]，因此會導(dǎo)致難治性哮喘的發(fā)病。中藥在防治哮喘方面積累了大量的經(jīng)驗，且具有較好的臨床效果[46-51]。從近5年研究結(jié)果來看，中藥治療哮喘的作用機制之一可能是通過調(diào)控相關(guān)因子的表達(dá)抑制NF-κB的活性，從而減輕氣道炎癥，抑制哮喘氣道重塑而發(fā)揮治療哮喘的作用，但其是否能阻斷NF-κB的持續(xù)活化仍有待探討。哮喘的發(fā)病機制極其復(fù)雜，有時涉及多種炎癥因子的改變導(dǎo)致多條信號傳導(dǎo)通路異常，而中藥是否可以同時調(diào)控多條信號傳導(dǎo)通路治療哮喘，探究其多靶點、多途徑治療哮喘的作用機制，仍是今后需要努力的方向。