何 艷 鄒梅娟 卓秋琪 羅 舟

艾司奧美拉唑鈉是奧美拉唑的S-旋光異構(gòu)體，是阿斯利康公司研發(fā)的全球第一個(gè)旋光異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑（proton pump inhibitor，PPI），其主要用于治療胃食管反流病、幽門螺桿菌（Hp）陽性的消化性潰瘍及與胃酸有關(guān)的消化系統(tǒng)紊亂性疾病。艾司奧美拉唑于2000年在瑞士首次上市，目前已在全球80 多個(gè)國家和地區(qū)上市[1-2]。

艾司奧美拉唑鈉上市后迅速成為重磅炸彈產(chǎn)品，其化合物專利過期后成為國內(nèi)藥企的爭(zhēng)相仿制對(duì)象，但仿制藥開發(fā)中存在若干難點(diǎn)，艾司奧美拉唑鈉的水分控制是主要難點(diǎn)之一。依據(jù)藥物引濕性試驗(yàn)指導(dǎo)原則（中國藥典2015年版四部通則9103）對(duì)艾司奧美拉唑鈉原料藥進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)原料引濕24 h 后，吸濕形成液體，說明本品引濕性極強(qiáng)[3]。因此，本產(chǎn)品除了凍干工藝控制的起始水分，長(zhǎng)期貯存過程的水分控制也成為本產(chǎn)品的 質(zhì)量控制重點(diǎn)。

凍干膠塞用于凍干粉針制劑的密封保存，起到隔絕微生物和水分的作用。凍干膠塞一般需要經(jīng)過膠塞進(jìn)行清洗、濕熱滅菌、干燥等工藝處理，干燥后的膠塞會(huì)殘留一部分水分。膠塞的殘留水分可能在凍干粉針劑的長(zhǎng)期保存過程中發(fā)生水分遷移，導(dǎo)致引濕性強(qiáng)的藥物水分增加，膠塞的殘留水分近年來已成為凍干制劑水分控制研究的熱點(diǎn)之一[4-5]。因此，本實(shí)驗(yàn)對(duì)凍干膠塞干燥工藝及其殘留水分進(jìn)行研究，探討膠塞中殘留水分對(duì)艾司奧美拉唑鈉凍干制劑質(zhì)量的影響，并建立水分控制策略。

1 材料與儀器

1.1 材料

艾司奧美拉唑鈉原料（深圳萬樂藥業(yè)有限公司，171001），枸櫞酸（臺(tái)山市新寧制藥有限公司，161201），中硼硅管制西林瓶（肖特新康藥品包裝有限公司），覆膜溴化丁基膠塞（西氏醫(yī)藥服務(wù)有限公司），溴化丁基膠塞（Aptar Stelmi SAS），氯化丁基膠塞（江蘇華蘭藥用新材料股份有限公司），鋁塑組合蓋（江門市新興業(yè)包裝材料有限公司），無水甲醇（廣東廣華科技股份有限公司），卡式液（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）。

1.2 儀器

卡氏干燥爐-卡爾費(fèi)休測(cè)定儀（瑞士萬通，870+860 型），電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司，Mettle Teledo XP205），酸度計(jì)（梅特勒-托利多儀器有限公司，Mettle Teledo S220），脈動(dòng)真空滅菌器（山東新華醫(yī)療器械有限公司，XG1.GWE-0.6B），真空冷凍干燥機(jī)（上海東富龍科技股份有限公司，LYO-5），藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（重慶市永生實(shí)驗(yàn)儀器廠，SHH-500SD-2）。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備工藝

用70%處方量的注射用水溶解艾司奧美拉唑鈉原料和枸櫞酸，攪拌使完全溶解，然后用1.0 mol/L的NaOH 溶液調(diào)節(jié)藥液pH 至11.0±1.0，最后補(bǔ)加注射用水至處方總量，攪拌均勻。藥液經(jīng)0.22 μm 過濾器除菌過濾，分裝，半壓塞，采用真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行凍干除水。凍干結(jié)束后壓膠塞，出箱，軋鋁蓋密封。

2.2 膠塞殘留水分測(cè)定

國內(nèi)尚未有關(guān)于凍干粉針膠塞水分測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)ISO_ 8362-5：1995 附錄D 膠塞殘留水分測(cè)定方法[6]及近年的膠塞殘留水分測(cè)定方法研究[7-10]，本研究采用操作簡(jiǎn)便且準(zhǔn)確度高的卡氏干燥爐-卡爾費(fèi)休法測(cè)定法進(jìn)行膠塞殘留水分的測(cè)定。

2.2.1 儀器參數(shù)瑞士萬通870 水分儀器電極電流為400 mA，終點(diǎn)電位50.0 mV，終點(diǎn)相對(duì)停止漂移值為5 μg/min，開始漂移值為20 μg/min。860 卡式加熱爐溫度為250 ℃，載氣為氮?dú)?，流?50 ml/min。

2.2.2 測(cè)定方法取至少10 只膠塞，每個(gè)膠塞沿頂面的垂直方向切取冠部部分一塊，切塊的長(zhǎng)度約為7 mm；稱重，將樣品放入卡式爐的樣品瓶中并密封，設(shè)定卡式爐將樣品蒸發(fā)出來的水分導(dǎo)引至卡爾費(fèi)休滴定池內(nèi)，測(cè)定其水分。當(dāng)卡爾費(fèi)休滴定速度小于0.1 μg/s 時(shí)，即判定滴定結(jié)束。重復(fù)測(cè)定3 次，取其平均值。

2.3 檢測(cè)項(xiàng)目

2.3.1 膠塞干燥工藝及殘留水分取3 種不同配方的膠塞，按照艾司奧美拉唑鈉凍干粉針工藝規(guī)程，進(jìn)行膠塞清洗，清洗后的膠塞采用脈動(dòng)真空滅菌器121 ℃濕熱滅菌30 min，然后121 ℃分別干燥1 h、3 h、5 h、6 h。分別取濕熱滅菌前、濕熱滅菌后、干燥1 h、3 h、5 h、6 h 各30 個(gè)膠塞，按照2.2.1 項(xiàng)下進(jìn)行膠塞殘留水分的測(cè)定，結(jié)果見表1。

不同配方膠塞在濕熱滅菌前水分含量均較低，在121 ℃濕熱滅菌30 min 后，膠塞殘留水分含量明顯增加；干燥后殘留水分含量隨干燥時(shí)間延長(zhǎng)而下降，但干燥3 h 后膠塞的殘留水分趨于穩(wěn)定，水分含量下降至未進(jìn)行濕熱滅菌前。此外，不同廠家生產(chǎn)的膠塞的水分含量略有差異，覆膜溴化丁基膠塞的水分較低，氯化丁基膠塞的水分含量略高。

表1 不同配方膠塞經(jīng)滅菌干燥后水分含量(%)

2.3.2 不同干燥方式的膠塞對(duì)產(chǎn)品水分的影響按照2.1 項(xiàng)下艾司奧美拉唑鈉的制備工藝制備樣品，分別取上述不同干燥處理的膠塞各10 個(gè)對(duì)分裝后的藥液半壓塞、凍干，凍干后全壓塞、軋鋁蓋。測(cè)定凍干產(chǎn)品的起始水分含量，然后將凍干產(chǎn)品置于高溫60 ℃恒溫恒濕箱留樣30 d，測(cè)定凍干產(chǎn)品的水分含量，并計(jì)算水分增加值。見表2。

表2 艾司奧美拉唑鈉凍干粉針高溫留樣水分含量(%)

對(duì)使用不同配方膠塞的凍干產(chǎn)品的高溫影響因素水分變化及膠塞殘留水分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，方差分析結(jié)果見表3，線性擬合圖見圖1。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，方差分析回歸曲線P值幾乎為0，回歸曲線相關(guān)系數(shù)=0.967，說明回歸曲線效果顯著，膠塞殘留水分含量與產(chǎn)品水分含量有顯著相關(guān)性。

表3 凍干產(chǎn)品水分變化與膠塞殘留水分相關(guān)性的 方差分析

圖1 凍干產(chǎn)品水分變化與膠塞水分相關(guān)性曲線

3 討論

凍干粉針制劑的水分含量控制是重要的質(zhì)量控制要求，凍干粉針制劑在貯存過程中水分增加主要有兩種途徑，一是膠塞殘留水分的遷移，二是外界水分通過膠塞滲透至西林瓶?jī)?nèi)。后者受不同膠塞配方的通透性及產(chǎn)品貯存條件影響。本研究主要針對(duì)前者開展。

膠塞作為凍干制劑的主要內(nèi)包材料，在產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)時(shí)，一般均應(yīng)按照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》管理要求，對(duì)膠塞進(jìn)行清洗、濕熱滅菌、干燥等工藝處理。上述處理工序均會(huì)對(duì)膠塞殘留水分含量產(chǎn)生較大影響，從而影響產(chǎn)品水分含量及產(chǎn)品質(zhì)量[7-8]。

卡氏干燥爐-卡爾費(fèi)休法測(cè)定法測(cè)定膠塞殘留水分的準(zhǔn)確性更高[8-10]，與《國家藥包材標(biāo)準(zhǔn)》注射用無菌粉末用鹵化丁基橡膠塞（YBB00052005-2015）[11]和《中華人民共和國國家藥典》2015年版[12]規(guī)定的干燥失重法比較靈敏度更高。因此，本研究采用卡氏干燥爐-卡爾費(fèi)休法測(cè)定3 種不同膠塞濕熱滅菌前、濕熱滅菌后以及121 ℃干燥1 h、3 h、5 h、6 h后的膠塞水分含量。結(jié)果表明，膠塞濕熱滅菌前的起始水分含量較低，經(jīng)濕熱滅菌后熱蒸汽進(jìn)入膠塞內(nèi)，使得膠塞水分含量增加1～2 倍；膠塞在121 ℃干燥后水分含量隨干燥時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，干燥3 h以上才恢復(fù)到濕熱滅菌前的膠塞起始水分含量，干燥5 h 和6 h 后的膠塞殘留水分含量已無明顯下降趨勢(shì)，說明膠塞在濕熱滅菌后至少需要干燥3 h 以上才可能將膠塞殘留水分含量控制至原有水平。本研究表明凍干粉針制劑水分含量與與膠塞濕熱滅菌干燥后的殘留水分成顯著相關(guān)性[13]。此外，對(duì)不同配方的膠塞研究結(jié)果表明，采用121 ℃干燥3 h 以上的覆膜溴化丁基膠塞和溴化丁基膠塞的凍干產(chǎn)品水分差異不大，采用氯化丁基膠塞的凍干產(chǎn)品水分略高。說明除膠塞中殘留水的遷移，不同配方的膠塞通透性不同也會(huì)對(duì)產(chǎn)品的水分產(chǎn)生影響。本研究結(jié)果表明，由于艾司奧美拉唑鈉極具引濕性，膠塞殘留水在穩(wěn)定性留樣過程中遷移到凍干粉中，導(dǎo)致產(chǎn)品水分迅速增加，從而影響產(chǎn)品質(zhì)量。

綜上所述，通過優(yōu)化膠塞的干燥時(shí)間可降低膠塞殘留水分，減少殘留水分對(duì)艾司奧美拉唑鈉質(zhì)量的影響，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量。同時(shí)，由于膠塞配方的不同，建議針對(duì)不同產(chǎn)品進(jìn)行膠塞殘留水分研究，選擇出合適的膠塞供應(yīng)商，以提高產(chǎn)品質(zhì)量。此外，值得注意的是，在進(jìn)行膠塞殘留水分控制工藝優(yōu)化研究時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步探討膠塞經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間干燥后的物理性能變化及其揮發(fā)性成分的變化是否對(duì)凍干產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生不良影響。