林晏廷, 徐季旗, 陳潔

(暨南大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 泌尿外科， 廣東 廣州 510632)

神經(jīng)元正五聚體蛋白(neuronal pentraxins，NPTXs)是一類與C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)和血清淀粉樣蛋白P(serum amyloid P，SAP)具有同源性的蛋白家族，家族成員包括NPTX1、NPTX2和NPTXR．NPTX1僅在神經(jīng)系統(tǒng)的大腦皮質(zhì)、小腦神經(jīng)元和海馬等表達(dá)，而神經(jīng)元正五聚體蛋白2(neuronal pentraxin-2,NPTX2)則不局限于神經(jīng)系統(tǒng)，還可以表達(dá)于睪丸、胰島、腎上腺等，且在睪丸、胰島中表達(dá)最高[1]．其對(duì)促進(jìn)興奮性突觸的形成和突觸發(fā)育過(guò)程中的可塑性發(fā)揮重要作用[2]．有研究顯示NPTX2的異常表達(dá)以及高甲基化等與帕金森病[3]、阿爾茲海默病[4-5]、神經(jīng)母細(xì)胞瘤[6-7]、結(jié)直腸癌[8]、胰腺癌[9-10]等的發(fā)生發(fā)展皆有一定相關(guān)性，并可通過(guò)脫甲基化或抑制其過(guò)表達(dá)等方式影響腫瘤的增殖及遷移，使其有望成為腫瘤早期診斷、治療及預(yù)后的生物標(biāo)記物．

腎透明細(xì)胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是來(lái)源于腎實(shí)質(zhì)小管上皮細(xì)胞的腫瘤，約占腎臟惡性腫瘤的80%～90%[11-12]．目前已有研究指出NPTX2的表達(dá)可能與ccRCC的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[13-14]，但由于研究方法、樣本例數(shù)及人群的差異，尚不能評(píng)價(jià)其結(jié)論一致性．本研究通過(guò)挖掘多個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)，以大數(shù)據(jù)分別從mRNA水平和蛋白質(zhì)水平上對(duì)NPTX2在正常腎組織和ccRCC組織中的表達(dá)情況進(jìn)行薈萃分析，并分析其表達(dá)與ccRCC患者預(yù)后的關(guān)系．

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索

1.1.1 Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)

Oncomine 數(shù)據(jù)庫(kù)是一個(gè)癌癥基因芯片數(shù)據(jù)庫(kù)和整合數(shù)據(jù)挖掘平臺(tái)，可以對(duì)所選擇的基因表達(dá)譜做可視化分析[15]．本研究設(shè)置檢索條件如下：①Gene：NPTX2；②Analysis Type：Cancer vs. Normal Analysis；③Cancer Type：Kidney Cancer；④Cancer Type：Clear Cell Renal Cell Carcinoma；⑤Data Type：mRNA；⑥Threshold By：P-value<1E-4；Fold Change>2；Gene Rank：Top 10%．

1.1.2 GEPIA 數(shù)據(jù)庫(kù)

GEPIA 數(shù)據(jù)庫(kù)基于TCGA和GTEx數(shù)據(jù)庫(kù)的 8 587個(gè)正常組織樣本，9 736個(gè)腫瘤組織樣本的RNA測(cè)序表達(dá)數(shù)據(jù)，包含33種惡性腫瘤[16]，可做特定基因在正常組織和腫瘤組織中的差異表達(dá)分析．本研究選擇使用TCGA數(shù)據(jù)驗(yàn)證Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)的分析結(jié)果，并且進(jìn)一步分析NPTX2與ccRCC病理分期及預(yù)后的相關(guān)性．

1.1.3 人類蛋白質(zhì)表達(dá)圖譜

人類蛋白質(zhì)表達(dá)圖譜(human protein atlas，HPA)是一個(gè)基于免疫組化分析和RNA測(cè)序分析的大型轉(zhuǎn)錄組和蛋白組數(shù)據(jù)庫(kù),HPA數(shù)據(jù)庫(kù)中的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)覆蓋了所有人類蛋白質(zhì)編碼基因的86%，可對(duì)腫瘤和正常組織進(jìn)行蛋白的差異表達(dá)分析[17]．本研究引用數(shù)據(jù)庫(kù)中NPTX2組化抗體(HPA049799、CAB020801)對(duì)正常腎組織和ccRCC組織進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，提取 3例正常腎組織和3例典型ccRCC組織，分析NPTX2蛋白的表達(dá)及抗體染色程度．

1.1.4 MethHC 數(shù)據(jù)庫(kù)

MethHC是一個(gè)關(guān)于腫瘤基因表達(dá)和DNA甲基化的綜合數(shù)據(jù)庫(kù)，整理了TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中腫瘤和正常組織的DNA甲基化和mRNA /miRNA表達(dá)譜[18]．本研究使用MethHC分析NPTX2在ccRCC組織中的甲基化水平，設(shè)置檢索條件如下：①Search by：gene；②Cancers：KIRC；③Gene region：Promoter；④Select a methylation lever evalution method：Average；⑤Gene search：NPTX2．

1.1.5 String-DB

String-DB是一個(gè)分析生物學(xué)基因或蛋白相互作用的數(shù)據(jù)庫(kù)，整合了已知和可預(yù)測(cè)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的生物數(shù)據(jù)[19-20]．該數(shù)據(jù)庫(kù)可為本研究提供NPTX2與上下游蛋白的相互作用分析．設(shè)置檢索條件如下：①Protein Name：NPTX2；②Organism：Homo sapiens；③Minimum required interaction score：medium confidence(0.400)；④Max number of Interactors：no more than 20 interactors．

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 13.0軟件處理數(shù)據(jù).分析NPTX2在正常腎組織和ccRCC組織中的表達(dá)差異情況時(shí)，用t檢驗(yàn)或Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行非配對(duì)樣本的組間比較；用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行配對(duì)樣本的組間比較；用one-way ANOVA分析NPTX2mRNA表達(dá)與ccRCC臨床病理分期間的關(guān)系；用Kaplan-Meier法對(duì)ccRCC患者進(jìn)行生存分析；用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析NPTX2mRNA表達(dá)與ccRCC患者預(yù)后的關(guān)系.P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.

2 結(jié)果

2.1 NPTX2 mRNA在其他腫瘤組織和ccRCC組織中的表達(dá)

通過(guò)Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)分析NPTX2在20項(xiàng)腫瘤中的表達(dá)水平，與其他腫瘤組織相比，NPTX2mRNA在腎癌中表達(dá)增高(圖1)．按照前述條件，得出子數(shù)據(jù)庫(kù)Beroukhim Renal[21]、Jones Renal[22]、Gumz Renal[23]和Lenburg Ranal[24]的5項(xiàng)研究(圖2)．

圖1 Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)中NPTX2mRNA在所有腫瘤研究中的表達(dá)

Fig.1 The expression ofNPTX2mRNA in all oncological studies of Oncomine database

Beroukhim Renal數(shù)據(jù)庫(kù)中有70個(gè)樣本、12 624個(gè)被檢基因，在遺傳性ccRCC中，NPTX2在過(guò)表達(dá)基因中排第397位(前4%)，差異倍數(shù)=7.961，P=7.62×10-10；在非遺傳性ccRCC中，NPTX2在過(guò)表達(dá)基因中位于第127位(前2%)，差異倍數(shù)=23.543，P=7.53×10-11．Jones Renal數(shù)據(jù)庫(kù)中有92個(gè)樣本、12 624個(gè)被檢基因，NPTX2在過(guò)表達(dá)基因中位于第779位(前7%)，差異倍數(shù)=18.745，P=1.29×10-10．Gumz Renal數(shù)據(jù)庫(kù)中有20個(gè)樣本、12 624個(gè)被檢基因，NPTX2在過(guò)表達(dá)基因中排第424位(前4%)，差異倍數(shù)=54.781，P=2.00×10-6．Lenburg Ranal數(shù)據(jù)庫(kù)中有18個(gè)樣本、17 779個(gè)被檢基因，NPTX2在過(guò)表達(dá)基因中排第769位(前5%)，差異倍數(shù)=9.920，P=6.38×10-4．在5項(xiàng)研究中，NPTX2mRNA在ccRCC中的表達(dá)皆高于正常組織(表1)．而對(duì)5項(xiàng)研究結(jié)果薈萃分析得出，與正常組織組相比，NPTX2mRNA在ccRCC中高表達(dá)(P=2.00×10-6)．

A:Beroukhim Renal(遺傳性ccRCC);B:Beroukhim Renal(非遺傳性ccRCC);C:Jones Renal;D:Lenburg Renal;E:Gumz Renal.

研究項(xiàng)目ccRCC組織樣本量正常腎組織樣本量差異倍數(shù)PtBeroukhim Renal(遺傳性ccRCC)32117.9617.62E-107.931Beroukhim Renal(非遺傳性ccRCC)271123.5437.53E-119.541Jones Renal232318.7451.29E-1010.626Lenburg Ranal999.9206.38E-044.728Gumz Renal101054.7812.00E-068.617

使用GEPIA分析595個(gè)TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)來(lái)源的樣本，其中正常腎組織72例，ccRCC組織523 例，可見(jiàn)與正常腎組織相比，NPTX2mRNA在ccRCC中高表達(dá)(P<0.05)，與Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)果相符(圖3)．

2.2 NPTX2 mRNA表達(dá)與ccRCC臨床病理分期的關(guān)系

在GEPIA使用TCGA數(shù)據(jù)分析NPTX2mRNA表達(dá)與ccRCC臨床病理分期的關(guān)系，使用one-way ANOVA，以病理分期為變量計(jì)算差異表達(dá)，根據(jù)患者病理主要階段生成小提琴圖，結(jié)果顯示：NPTX2mRNA表達(dá)水平與ccRCC臨床病理分期呈正相關(guān)，高級(jí)別分期與低級(jí)別分期相比，NPTX2mRNA高表達(dá)核心密度帶寬更高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=2.61×10-3)(圖4)．

圖3 GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)中NPTX2 mRNA在ccRCC組織中的表達(dá)

Fig.3 Expression ofNPTX2mRNA in ccRCC tissues of GEPIA database

圖4 GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)中NPTX2mRNA表達(dá)與ccRCC病理分期的關(guān)系

Fig.4 Relationship betweenNPTX2mRNA expression and pathological stage of ccRCC in GEPIA database

2.3 NPTX2 mRNA表達(dá)與ccRCC患者預(yù)后的關(guān)系

通過(guò)GEPIA使用TCGA 數(shù)據(jù)分析NPTX2mRNA表達(dá)與ccRCC患者預(yù)后的關(guān)系，得出NPTX2mRNA高表達(dá)患者129例與低表達(dá)患者128例的總體生存率以及無(wú)病生存率曲線．結(jié)果顯示：NPTX2mRNA高表達(dá)患者其總體生存率明顯低于低表達(dá)患者(LogrankP=6.6×10-3，HR=1.8，P(HR)=7.2×10-3)(圖5)；此外，NPTX2mRNA高表達(dá)患者的無(wú)病生存率亦低于低表達(dá)患者(LogrankP=4×10-4，HR=2.6，P(HR)=6.6×10-4)(圖6)．NPTX2高表達(dá)可能是ccRCC患者生存率降低的風(fēng)險(xiǎn)因素．

圖5 GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)中NPTX2mRNA不同表達(dá)的ccRCC患者總體生存率

Fig.5 Overall survival rate of ccRCC patients with differentNPTX2mRNA expression of GEPIA database

圖6 GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)中NPTX2mRNA不同表達(dá)的ccRCC患者無(wú)病生存率

Fig.6 Disease free survival rate of ccRCC patients with differentNPTX2mRNA expression of GEPIA database

2.4 NPTX2蛋白在正常腎組織和ccRCC組織中的表達(dá)情況

在HPA數(shù)據(jù)庫(kù)中，采用NPTX2組化抗體(HPA049799、CAB020801)分析正常腎組織和ccRCC組織的免疫組化結(jié)果，在3例正常腎組織中腎小管細(xì)胞中抗體染色均為“低”水準(zhǔn)，腎小球細(xì)胞中分布極少，未檢測(cè)出；在3例ccRCC患者腫瘤細(xì)胞中均呈“高”水準(zhǔn)(圖7)．由此進(jìn)一步證實(shí)NPTX2蛋白在ccRCC中較正常腎組織高表達(dá)．

圖7 NPTX2蛋白在ccRCC組織與正常腎組織中的表達(dá)(免疫組化染色)

2.5 ccRCC中NPTX2的DNA甲基化水平

在MethHC數(shù)據(jù)庫(kù)中得出NPTX2的甲基化轉(zhuǎn)錄模板NM_002523；在ccRCC與正常腎組織的甲基化水準(zhǔn)差異分析中，其在ccRCC中的甲基化水平較正常組織高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.005)(圖8)；并且在ccRCC中NPTX2啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平較正常組織甲基化水平明顯升高(圖9)．

2.6 NPTX2與上下游蛋白的相互作用

使用String-DB分析NPTX2與上下游蛋白的相互作用，按照前述條件得出NPTX2蛋白交互作用網(wǎng)絡(luò)圖(圖10)，PPI富集P值 (protein-protein interaction enrichment p-value)=6.68×10-4，相互作用的節(jié)點(diǎn)數(shù)為21個(gè)，其中在 PPI網(wǎng)絡(luò)中與NPTX2相互作用(score>0.400)的有AVP、MT-ATP6、MT-ATP8、MT-ND4、NPAS4、CBLN1、BDNF、TYMP等，主要參與了氧化磷酸化、ATP代謝過(guò)程、細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞、興奮性突觸后電位等生物過(guò)程．

圖8 正常腎組織和ccRCC組織NPTX2甲基化水平比較

Fig.8 Comparison of NPTX2 methylation level in normal kidney tissues and ccRCC tissues

圖9 正常腎組織和ccRCC組織NPTX2啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平比較

圖10 NPTX2蛋白交互作用網(wǎng)絡(luò)圖

3 討論

腎臟惡性腫瘤占所有腫瘤的3.8%，是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，近年來(lái)發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，在過(guò)去20年，全球發(fā)病率增加了2%．ccRCC是其中最常見(jiàn)的類型，男性與女性的發(fā)病比例為1.5∶1，60～70歲發(fā)病率最高．ccRCC的預(yù)后較其他RCC更差，28%的ccRCC患者在確診時(shí)已經(jīng)是晚期疾病，主要采用外科手術(shù)治療，其他治療方案如化療和放療等的效果并不明顯，仍存在復(fù)發(fā)率高和預(yù)后差的問(wèn)題[11-12]．現(xiàn)普遍依據(jù)2016版WHO/ISUP對(duì)ccRCC進(jìn)行分級(jí)、治療指導(dǎo)及預(yù)后評(píng)估，但仍沒(méi)有適合常規(guī)使用的預(yù)測(cè)性分子生物標(biāo)志物[25]．多項(xiàng)研究顯示ccRCC的相關(guān)分子標(biāo)記物如CAIX，PTEN和CXCR4中沒(méi)有一個(gè)明顯改善了當(dāng)前預(yù)后系統(tǒng)的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性[12]，因此，進(jìn)一步探索其生物學(xué)標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)等對(duì)ccRCC患者有重要的臨床意義．

1995年，Hsu等[1]在分離NPTX1的人同源物時(shí)，首次報(bào)道了NPTX2，長(zhǎng)度為11 kb，包含了4個(gè)內(nèi)含子，并定位于染色體7q21.3-q22.1．NPTX2是NPTX家族中的成員, 成員包括NPTX1、NPTX2和NPTXR．NPTX家族與CRP和SAP等急性反應(yīng)蛋白同源，并且與興奮性突觸的形成和突觸發(fā)育過(guò)程相關(guān)[2]．NPTX2具有Ca2+依賴的凝集素結(jié)合活性，其特性有助于其黏附于細(xì)胞膜上，調(diào)節(jié)突觸前物質(zhì)的攝取，在突觸形成和重塑過(guò)程中可以調(diào)節(jié)突觸中降解物質(zhì)的攝取[26]．此外，NPTX2還可與NPTXR形成多聚體混合物，作用于細(xì)胞膜表面，與AMPA選擇性谷氨酸受體亞基結(jié)合，以促進(jìn)興奮性突觸的形成和發(fā)育，或調(diào)節(jié)突觸前物質(zhì)的攝取，是一種細(xì)胞外AMPA受體聚集因子[4]．Ishiuchi等[27-28]的研究中提到，由AMPA介導(dǎo)的Ca2+信號(hào)通過(guò)激活受體Akt可以調(diào)節(jié)神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的增殖和遷移．Ca2+滲透性AMPA受體的激活在神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的生長(zhǎng)中有重要作用．在ccRCC中NPTX2的作用可能亦與此相關(guān)．

Von Roemeling等[13]的研究發(fā)現(xiàn)NPTX2的活性介導(dǎo)了ccRCC腫瘤細(xì)胞的存活和侵襲，機(jī)制與AMPA選擇性谷氨酸受體4(GluR4)有關(guān)，在正常的生理環(huán)境中，GluR4的表達(dá)主要定位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中特定的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，介導(dǎo)快速突觸神經(jīng)傳遞，NPTX2在GluR4的突觸募集中發(fā)揮重要作用[26]．NPTX2可與ccRCC細(xì)胞膜上的GluR4相連形成復(fù)合物AMPAR, AMPAR通過(guò)介導(dǎo)增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+的流入，導(dǎo)致肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的重組，并促進(jìn)細(xì)胞的增殖與遷移．Von Roemeling等[13]還發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)使用變構(gòu)AMPA受體拮抗劑CFM-2來(lái)減少NPTX2的過(guò)表達(dá)，從而抑制ccRCC腫瘤細(xì)胞的增殖．由此可見(jiàn)，抑制NPTX2與GluR4結(jié)合形成AMPAR，可能對(duì)轉(zhuǎn)移性ccRCC有一定意義，NPTX2有望成為ccRCC的診斷標(biāo)志物以及治療靶點(diǎn)．

本研究分別分析了Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)中Beroukhim Renal等4個(gè)子數(shù)據(jù)庫(kù)的5項(xiàng)研究，并進(jìn)行薈萃分析，得出與正常組織組相比，NPTX2mRNA在ccRCC中存在顯著高表達(dá)．并以GEPIA對(duì)TCGA數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，驗(yàn)證結(jié)果與 Oncomine 數(shù)據(jù)庫(kù)一致，即NPTX2mRNA在ccRCC中高表達(dá)．

目前普遍采用世界衛(wèi)生組織(WHO)與國(guó)際泌尿外科病理學(xué)會(huì)(ISUP)于2012年提出的ccRCC病理分期系統(tǒng)作為ccRCC的預(yù)后指標(biāo)，該系統(tǒng)基于腫瘤的核仁評(píng)估分期：G1期：400倍光鏡下腫瘤細(xì)胞無(wú)核仁或核仁不明顯；G2期：400倍光鏡下腫瘤細(xì)胞可見(jiàn)清晰核仁，但在100倍光鏡下核仁不明顯或不清晰；G3期：100倍光鏡下可見(jiàn)清晰的核仁；G4期：可見(jiàn)明顯多形性的核仁、腫瘤巨細(xì)胞和/或肉瘤樣形態(tài)或橫紋肌樣分化[29-30]．在GEPIA的分析結(jié)果中得出，高級(jí)別分期與低級(jí)別分期相比，NPTX2mRNA高表達(dá)核心密度帶寬更高，即NPTX2mRNA表達(dá)水平與ccRCC臨床病理分期呈正相關(guān)．

此外，NPTX2高表達(dá)的ccRCC患者總體生存率以及無(wú)病生存率皆明顯低于低表達(dá)患者，NPTX2的高表達(dá)可能是ccRCC患者生存率降低的風(fēng)險(xiǎn)因素．而HPA數(shù)據(jù)庫(kù)的免疫組化分析結(jié)果亦證實(shí)，NPTX2蛋白在ccRCC中也較正常腎組織高表達(dá)，并且在MethHC數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行的甲基化水準(zhǔn)差異分析得出，ccRCC中NPTX2啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平明顯增高．

使用String-DB分析發(fā)現(xiàn)，NPTX2與AVP、MT-ATP6、MT-ATP8、MT-ND4、NPAS4、CBLN1、BDNF、TYMP等蛋白存在相互作用，主要參與氧化磷酸化、ATP代謝過(guò)程、細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞、興奮性突觸后電位等生物過(guò)程．其中，NPTX2與MT-ATP6、MT-ATP8、MT-ND4協(xié)同參與了氧化磷酸化(GO：0006119)、ATP代謝過(guò)程(GO：0046034)．通過(guò)呼吸鏈的操作，伴隨代謝物氧化的ADP磷酸化為ATP．氧化化合物會(huì)在細(xì)胞膜上建立質(zhì)子梯度，從而為ATP合成提供能量.另外，NPTX2與AVP、CBLN1、BDNF、NPAS4等蛋白協(xié)同參與了細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)(GO：0007267)，過(guò)程包括接收細(xì)胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)、一定條件下配體的釋放，以及促進(jìn)其轉(zhuǎn)運(yùn)和呈遞至接收細(xì)胞的過(guò)程．例如通過(guò)可溶性配體，通過(guò)細(xì)胞粘附分子和通過(guò)間隙連接的信號(hào)傳導(dǎo)等．而NPTX2與AVP、TYMP可協(xié)同參與調(diào)節(jié)神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞(GO：0051969)，通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)沖動(dòng)的頻率、速率或程度，響應(yīng)在神經(jīng)元膜上刺激傳播的順序及電化學(xué)極化和去極化的過(guò)程．NPTX2與NPAS4、GRIA2、GRIA4協(xié)同參與興奮性突觸后電位(GO：0060079)，即帶正電離子流入突觸后細(xì)胞而導(dǎo)致突觸后電位暫時(shí)增加的過(guò)程，通過(guò)引發(fā)興奮性突觸后電位的離子流，引發(fā)興奮性突觸后電流，可使神經(jīng)元更容易激發(fā)動(dòng)作電位．

綜上所述，本研究結(jié)果顯示NPTX2在ccRCC組織中呈高表達(dá)，且其表達(dá)與患者預(yù)后相關(guān)．將有可能成為ccRCC的診斷標(biāo)志物以及治療靶點(diǎn)，有必要對(duì)NPTX2與ccRCC的治療靶點(diǎn)及轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)進(jìn)行更深入的探究，本研究為后續(xù)的研究提供了線索和理論依據(jù)．本研究不足之處，NPTX2與ccRCC的相關(guān)分析是從各個(gè)公開(kāi)資料庫(kù)進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘綜合分析而得出，其數(shù)據(jù)樣本來(lái)源大多非中國(guó)人，實(shí)為一種探索型研究，需要更多實(shí)驗(yàn)研究以及我國(guó)臨床樣本加以驗(yàn)證．