劉賀娟 焦禹順 任福森 郭志偉 陳昊放 孫 強
(河南省新鄉(xiāng)市農業(yè)科學院,新鄉(xiāng)市大蔥工程技術研究中心,河南新鄉(xiāng) 453000)
大蔥(Allium fistulosumL.var.giganteamMakino)屬于百合科(Liliaceae)蔥屬(Allium),是以葉鞘組成的肥大假莖和嫩葉為產品的一個栽培種(周長久,1995)。大蔥營養(yǎng)豐富,所含的植物菌素能提高食欲,增強消化功能,還具有殺菌消炎作用(韓春然,2007)。我國是大蔥的起源中心,具有悠久的栽培歷史、廣闊的地理栽培分布和豐富的種質資源。根據在歐洲數據庫采集的數據,我國54 份大蔥種質資源保存在Gatersleben(德國)基因庫中,53 份保存在國際園藝研究中心(UK)的蔬菜基因庫中(Hanelt &Hammer,1991)。目前國家種質資源庫保存的大蔥資源有233 份,分蔥36 份(戚春章等,1997)。但大蔥種質資源龐大的規(guī)模不利于資源的管理和高效利用,正確評價大蔥種質資源有助于保證遺傳資源的有效利用,為大蔥新品種選育奠定基礎。
聚類分析是根據研究對象的特征,將性質相近的事物進行分類的方法。Anderberym(1973)最早將聚類分析應用于育種研究中,目前聚類分析已經成為育種工作中的常用方法(陳運起 等,2006;董玉深 等,2006;劉玉愛 等,2006)。高莉敏(2005)對我國23 份大蔥種質資源的數量性狀進行了測定和研究,依據形態(tài)性狀指標進行Q 型聚類分析,主要依據大蔥株高和蔥白粗度,將大蔥品種分為“高粗”“矮粗”“高細”和“矮細”4 個類型。梁艷榮等(2006)對44 份大蔥材料的12 個農藝性狀進行聚類分析,將供試材料分為五大組群,大部分日本材料分為一組,有3 組為國內材料,還有一組為混合型,每個地區(qū)栽培的材料都有各自的形態(tài)特征,即具有一定的地域性。利容千等(1986)對4 個大蔥品種進行了核型分析,認為漢川大蔥、北方大蔥、汕頭蔥親緣關系較近,而惠州紅蔥親緣關系較遠。孟祥棟等(1998)利用隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)技術分析了中國栽培的幾個主要蔥屬品種,10 個品種共擴增出102 條條帶,其中68 條具多態(tài)性。苗錦山等(2010)基于大蔥數量性狀的數據資料將搜集到的國內外116 份大蔥種質劃分為5個組群,聚類結果較好地區(qū)分了大蔥主要栽培區(qū)種質資源形態(tài)相似性和差異,從形態(tài)學角度初步明確了不同生態(tài)區(qū)域資源之間的親緣關系遠近。本試驗以新鄉(xiāng)市農業(yè)科學院現代農業(yè)研究所近年來收集的大蔥種質作為原始種質庫,對大蔥的16 個表型性狀進行調查,計算各性狀的多樣性指數并進行聚類分析,根據聚類結果對種質資源進行初步分類,以期能夠提高大蔥種質資源的利用效率,加快大蔥育種進程。
試驗材料為新鄉(xiāng)市農業(yè)科學院現代農業(yè)研究所近年來收集的98 份大蔥種質,各種質的基本信息見表1。試驗于2017~2018 年在新鄉(xiāng)市農業(yè)科學院研發(fā)中心基地進行。2017 年和2018 年分別于3月15 日和3 月16 日播種育苗,6 月下旬露地種植,11 月下旬收獲。定植株距為8 cm,行距為70 cm。在大蔥收獲時,選取具有材料典型特征的代表性植株10 株進行調查。
按照《農作物種質資源標準和規(guī)范》(http://www.cgrchina.cn/?page_id=12112)對大蔥種質的7個質量性狀和9 個數量性狀進行調查記錄。7 個質量性狀分別是假莖形狀、假莖緊實性、葉節(jié)緊密度、葉片伸展角度、葉色、葉姿、葉片蠟粉,9 個數量性狀分別是單株質量、株高、開展度、假莖長、假莖底徑、假莖中徑、葉片長、葉橫徑,單株葉數。
用SPSS 22.0 軟件對數據進行分析。按照焦禹順等(2018)的方法將數量性狀分為10 個等級,各質量性狀按照《蔥種質資源描述規(guī)范和數據標準》進行賦值,并按照公式計算多樣性指數(Shannonwiener index),式中Pk為第k等級中種質數占總種質數的比例。使用R 軟件繪制聚類分析圖,樣本間距離采用歐氏距離,類間距選擇離差平方和法。
表1 供試大蔥種質編號、名稱及來源
續(xù)表
按照《蔥種質資源描述規(guī)范和數據標準》對大蔥種質的質量性狀進行賦值,并統(tǒng)計7 個質量性狀的頻率分布,計算各性狀的多樣性指數。從表2 可以看出,葉節(jié)緊密度的多樣性指數最高,為1.040,其次是葉色,為1.038,其他質量性狀的多樣性指數均小于1。葉節(jié)緊密度有疏(19.39%)、中(46.94%)、密(33.67%)3 種類型;葉色以深綠為主,占全部種質的50.00%,其次為綠(39.80%);假莖形狀有直筒(80.61%)、圓錐(10.20%)、近紡錘(2.04%)、雞腿狀(7.41%)4 種類型;假莖緊實性以緊實(83.67%)為主;葉姿主要為直(83.67%);葉面蠟粉以中(68.37%)為主,多(28.57%)次之;葉片伸展角度<30° 和30°~60°的種質分別占58.16%和41.84%。
表2 大蔥種質資源質量性狀頻率分布及多樣性
對大蔥種質的9 個數量性狀進行田間調查和統(tǒng)計分析,從表3 可以看出,各數量性狀的多樣性指數普遍高于質量性狀,變化范圍為1.367~2.043,其中株高的多樣性指數最高(2.043),葉片長(2.036)和開展度(2.000)次之。變異系數最大的性狀是單株質量,達37.02%,開展度的變異系數也達到20%以上,其他數量性狀的變異系數在14%~20%之間。
表3 大蔥種質資源數量性狀變異統(tǒng)計
使用SPSS 22.0 軟件對大蔥種質資源的16 個表型性狀進行系統(tǒng)聚類,可以將大蔥種質分為4 個類群(圖1)。各類群的主要表型性狀如表4 所示。
類群Ⅰ包含35 份種質,假莖形狀主要是直筒類型,還有一部分是圓錐狀。與其他類群的種質資源相比,類群Ⅰ種質的單株質量、開展度、假莖底徑、假莖中徑、葉片長、葉橫徑都是最小的,葉色以深綠為主,總體上 看屬于直筒型大蔥中的“矮細”類型,以五葉齊、新科冬蔥等為代表。
圖1 基于表型性狀的大蔥種質聚類分析結果
表4 大蔥種質各類群表型性狀特征
類群Ⅱ包含8 份種質,以雞腿蔥為主。單株質量中等,株高較小但是開展度最大,假莖長最短但是假莖底徑最大,葉片長較小但是葉橫徑最大,以新蔥5 號等具有新研80 大蔥血緣的雞腿蔥為代表。
類群Ⅲ包含29 份種質,直筒類型占大多數。單株質量、株高、開展度均為中等,假莖長較長但是假莖底徑較小,葉片長較長但是葉橫徑較小,假莖疏松和葉節(jié)緊密度為疏的種質比其他類群多,葉色以綠色為主,屬于直筒類型大蔥中的“高細”類型,以農研巨蔥王、菏蔥2 號等為代表。
類群Ⅳ包含26 份種質,絕大多數是直筒類型。單株質量、株高、假莖長、假莖中徑和葉片長都是最大,單株葉數最多,葉色以深綠為主,葉面蠟粉以多為主,屬于直筒類型大蔥中的“高粗”類型,代表種質為新蔥6 號、遼蔥2 號等。
目前我國在大蔥育種方面的研究還比較薄弱,研究人員少、水平低。普通大蔥及其野生近緣種中存在很多有利的基因資源,有待進一步開發(fā)利用。隨著農業(yè)基礎性長期性工作—作物種質資源數據填報工作和“第三次全國農作物種質資源普查與收集行動”的開展,必將有更多的大蔥種質資源被發(fā)現、收集,對這些資源進行觀測和精準鑒定,將會對種質資源的有效保護和高效利用起到積極作用。
本試驗通過對收集的98 份大蔥種質資源的16個表型性狀進行多樣性分析和聚類分析,以期挖掘出一些核心材料,為大蔥新品種選育提供種質基礎。多樣性分析結果表明,大蔥種質的遺傳多樣性豐富,質量性狀中多樣性指數最高的2 個性狀是葉節(jié)緊密度和葉色,數量性狀中多樣性最豐富的3 個性狀是株高、葉片長和開展度;變異系數最大的是單株質量,其次是開展度、假莖底徑和假莖長。根據聚類分析結果可將大蔥種質分為4 個類群,類群Ⅰ的種質多為“矮細”類型的直筒狀蔥。類群Ⅱ的種質表現為假莖短的雞腿狀蔥。類群Ⅲ的種質主要為植株“高細”、假莖較疏松、出葉孔間距大的直筒狀蔥。類群Ⅳ的種質主要為“高粗”類型、蠟粉多、葉數多的直筒狀蔥。長蔥白類型、短蔥白類型和雞腿型大蔥均占有一定的市場。一般認為,短蔥白類型比長蔥白類型更適宜密植。如果將長蔥白類型進一步細分為“高細”和“高粗”類型,并且加大“高細”類型的種植密度,則有可能獲得更高的單位面積產量。假莖緊實性對大蔥的商品性狀具有重要影響,葉節(jié)緊密度和葉片伸展角度則決定了大蔥的株型,蠟粉對病蟲害的預防有一定的作用,葉數會影響光合作用的強弱。根據本試驗的分類結果,類群Ⅳ中存在假莖“高粗”、緊實、株型緊湊、蠟粉多、葉數多的種質資源,可以重點考慮加以利用。
苗錦山等(2010)在測量雞腿蔥假莖直徑時,使用“底部粗莖和中部細莖和的1/2”即整個假莖直徑的平均值作為測量指標,結果將雞腿蔥和短蔥白類型均劃分為“矮粗”型大蔥,而本試驗使用“假莖底徑”和“假莖中徑”兩個測量項目作為大蔥莖粗的評價指標,最終將雞腿蔥和類似的“近紡錘”型蔥單獨聚為一類,從結果上看,使用“假莖底徑”和“假莖中徑”兩個指標來評價大蔥莖粗似乎更加科學。同時,“假莖底徑”與“假莖中徑”的比值(或兩者的差值與“假莖中徑”的比值)與假莖形狀存在某種相關關系,但是由于假莖形狀依賴于人為劃分,這種相關關系是否真實存在還需要進一步研究。
本試驗使用表型數據快速獲得了大蔥種質資源的表型信息,并根據表型數據對大蔥種質資源進行初步分類,但是由于環(huán)境因素的影響,有時表型信息并不能代表真實的遺傳信息。賈俊香和陶承光(2008)、賈俊香等(2018)分別使用RAPD和ISSR 分子標記對大蔥種質資源的親緣關系進行了研究,為深入理解大蔥種質的遺傳信息提供了參考。根據這一研究思路,可以將相關的分子標記運用在本試驗的大蔥種質資源鑒定中,對本試驗結果進行進一步確認,以便更加有目的地選擇育種親本,加快大蔥品種選育的進程。