李勝杰 姜 鵬 白俊杰, 樊佳佳 費(fèi)志平

(1. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所, 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶亞熱帶水產(chǎn)資源利用與養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510380;2. 南京帥豐飼料有限公司, 南京 201306; 3. 湖州湖旺水產(chǎn)種業(yè)有限公司, 湖州 313000)

多基因聚合育種是目前分子標(biāo)記輔助育種研究中常用的技術(shù)方法, 通過(guò)傳統(tǒng)的回交、雜交、復(fù)交等手段將多個(gè)有利的基因聚合到一起, 將分散在不同親本中的優(yōu)異基因聚合到同一基因組, 從而達(dá)到育種目標(biāo)的一種手段[1—3]。多基因聚合育種在農(nóng)作物、畜牧、家禽等中均有報(bào)道。在棉花(Gossypiumspp)纖維品質(zhì)性狀改良研究中, 聚合與纖維長(zhǎng)度相關(guān)的QTL個(gè)數(shù)越多, 單株平均纖維長(zhǎng)度值越大[4]。9個(gè)與小麥(Triticeae dumort)株高相關(guān)聯(lián)位點(diǎn)的聚合效果分析顯示, 株高與主效基因型的聚合數(shù)目多少呈正相關(guān)性[5]。將多個(gè)控制水稻(Oryza sativa)不同經(jīng)濟(jì)性狀的基因或QTL同時(shí)雜交導(dǎo)入親本受體, 實(shí)現(xiàn)多個(gè)位點(diǎn)有利等位基因的聚合, 改良了水稻多個(gè)重要的經(jīng)濟(jì)性狀[6—8]。劉軒等[9]在促卵泡素β亞基(FSHβ)、雌激素受體(ESR)和促乳素受體基因上各找出1個(gè)與藏豬(Sus scrofa)繁殖性狀相關(guān)的標(biāo)記, 這3個(gè)標(biāo)記的優(yōu)勢(shì)基因型聚合效應(yīng)高于單個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型效應(yīng)。陳克飛等[10]發(fā)現(xiàn)ESR和FSHβ基因的聚合基因型BBBB母豬比ABAA母豬總產(chǎn)仔數(shù)平均每胎多1.85—3.01頭, 產(chǎn)活仔數(shù)平均每胎多2.0—3.0頭。但是目前關(guān)于水產(chǎn)動(dòng)物多基因聚合研究的報(bào)道還比較少。孫效文等[11]對(duì)鏡鯉(Cyprinus carpio)優(yōu)勢(shì)基因型進(jìn)行聚合及培育優(yōu)良品系, 發(fā)現(xiàn)優(yōu)勢(shì)基因型平均數(shù)量為1.7的群體在生長(zhǎng)速度方面比平均數(shù)量為0.7的群體顯著提高。

大口黑鱸(Micropterus salmoides)是一種從北美洲引進(jìn)的廣溫性魚(yú)類(lèi), 在分類(lèi)學(xué)上隸屬鱸形目(Perciformes)太陽(yáng)魚(yú)科(Cehtrachidae)。因大口黑鱸肉質(zhì)鮮美, 不含肌間剌, 適合高密度養(yǎng)殖和活魚(yú)長(zhǎng)途運(yùn)輸, 深受養(yǎng)殖者和消費(fèi)者歡迎。大口黑鱸在我國(guó)大多數(shù)省份都有規(guī)?；B(yǎng)殖, 年產(chǎn)量超35×107kg[12],成為我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種之一。生長(zhǎng)性狀是決定生產(chǎn)成本和經(jīng)濟(jì)效益的重要經(jīng)濟(jì)性狀, 它是由眾多基因調(diào)控的數(shù)量性狀, 遺傳基礎(chǔ)復(fù)雜, 單個(gè)基因?qū)π誀畹挠绊懹邢轠13]。針對(duì)大口黑鱸養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中出現(xiàn)的種質(zhì)退化現(xiàn)象, 筆者所在的實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展了大口黑鱸生長(zhǎng)性狀的分子標(biāo)記輔助育種研究,利用候選基因方法從磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PCK1)[13]、熱休克因子結(jié)合蛋白(HSBP1)[13]、FOXO3b[13]、肌球蛋白重鏈基因(MYH)[14]、熱休克蛋白HSC70-1(待發(fā)表)、組織蛋白酶B(CTSB)[15]、高密度脂蛋白結(jié)合蛋白(HBP)[16]、垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子(POU1F1)[17]、垂體腺苷酸環(huán)化激酶多肽(PACAP)[18]、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1 (IGF-I)[19]、生長(zhǎng)激素促分泌素基因(ghrelin)[20]、載脂蛋白A1 (ApoproteinA1)[21]和肌肉生長(zhǎng)抑制素(MSTN)[22]基因中分別篩選到1個(gè)與生長(zhǎng)性狀相關(guān)的SNP標(biāo)記。在這些工作基礎(chǔ)之上, 本研究構(gòu)建了用于與生長(zhǎng)相關(guān)標(biāo)記聚合研究的家系, 分析了家系中與生長(zhǎng)性狀相關(guān)的優(yōu)勢(shì)基因型的聚合對(duì)表型性狀的影響效果, 以期為大口黑鱸生長(zhǎng)性狀相關(guān)分子標(biāo)記在育種中的應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 大口黑鱸親本的挑選和養(yǎng)殖

實(shí)驗(yàn)用大口黑鱸親魚(yú)來(lái)自于佛山市三水白金水產(chǎn)種苗有限公司, 從養(yǎng)殖池塘中挑選40尾大口黑鱸“優(yōu)鱸1號(hào)”體質(zhì)量大的個(gè)體(828.5±21.2) g, 其中雌魚(yú)和雄魚(yú)各20尾, 在水泥池中進(jìn)行養(yǎng)殖, 將每尾魚(yú)注射電子芯片標(biāo)記, 并剪取少量尾鰭, 用于提取DNA和基因型分析。

1.2 生長(zhǎng)性狀相關(guān)分子標(biāo)記的選擇

本實(shí)驗(yàn)室先前所獲得的13個(gè)與生長(zhǎng)性狀相關(guān)的分子標(biāo)記(Unigene33789_All-658、Unigene19479_All-121、CL1689.Contig2_All-302、C-6811T、C-821G、C-598G、G-2782T、C-18T、A-2282C、S1、A-642C、A-489C和C-1453T)分別位于PCK1[13]、HSBP1[13]、FOXO3b[13]、MYH[14]、HSC70-1、CTSB[15]、HBP[16]、POU1F1[17]、PACAP[18]、IGF-I[19]、ghrelin[20]、ApoproteinA1[21]和MSTN[22]基因上, 這些標(biāo)記均與體質(zhì)量顯著相關(guān)。上述13個(gè)分子標(biāo)記在進(jìn)行基因型檢測(cè)中所用的引物序列見(jiàn)表 1, 所有引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成, 其中S1位點(diǎn)擴(kuò)增用的引物采用熒光進(jìn)行標(biāo)記。

1.3 基因組DNA的提取

取保存的親本和子代鰭條樣品, 按照天根生化科技(北京)有限公司試劑盒中的操作方法提取組織DNA, 用0.7%瓊脂糖凝膠電泳和分光光度計(jì)檢測(cè)提取的DNA質(zhì)量和濃度, 保存于-20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4 生長(zhǎng)相關(guān)標(biāo)記的基因型檢測(cè)

Ghrelin基因上的SNP標(biāo)記采用直接測(cè)序法進(jìn)行基因型的分析, 對(duì)大口黑鱸基因組進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR擴(kuò)增反應(yīng)總體積為50 μL： 10 μL 5×TaqPCR master mix, 上下游引物各1 μL (20 μmol/L), 模板DNA 1 μL (50—80 ng), 加ddH2O至50 μL。PCR擴(kuò)增程序： 94℃預(yù)變性3min; 32個(gè)循環(huán)(94℃, 30s;55℃, 1min; 72℃, 30s); 72℃再延伸7min, 委托上海捷瑞生物工程有限公司完成測(cè)序。IGF-I基因上的片段缺失突變位點(diǎn)直接用STR基因分型技術(shù)分析基因型, PCR擴(kuò)增程序同上, 采用毛細(xì)管電泳檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物, 根據(jù)片段大小差異區(qū)分標(biāo)記的基因型, 委托上海捷瑞生物工程有限公司完成基因型分析。采用SNaPshot SNP分型方法分析其余位點(diǎn)在每尾大口黑鱸中的基因型, 委托上海捷瑞生物工程有限公司完成, 實(shí)驗(yàn)流程為： 根據(jù)SNP標(biāo)記兩端附近序列設(shè)計(jì)擴(kuò)增引物(表 1), 然后對(duì)每個(gè)樣品的DNA進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增后取3 μL PCR產(chǎn)物用ExoⅠ和FastAP純化, 主要是用ExoⅠ去除反應(yīng)產(chǎn)物中的剩余引物, 用FastAP去除反應(yīng)中剩余的DNTP, 在37℃條件下15min, 80℃高溫滅活ExoⅠ和FastAP酶15min。根據(jù)ABI公司提供的SNaPshot試劑盒, 用延伸引物進(jìn)行延伸反應(yīng), 使用ABI公司的PRISM 3730測(cè)序儀進(jìn)行基因分型。

表 1 所用大口黑鱸生長(zhǎng)性狀相關(guān)分子標(biāo)記的相關(guān)信息Tab. 1 Primers of growth-associated markers of largemouth bass

1.5 家系構(gòu)建及子代培育

首先分析每個(gè)生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)標(biāo)記在40尾大口黑鱸親本中的基因型分布情況, 然后依據(jù)家系2個(gè)親本中至少一個(gè)為雜合子基因型且子代中存在優(yōu)勢(shì)基因型, 選擇可聚合優(yōu)勢(shì)基因型最多的2對(duì)親本分別進(jìn)行繁殖及構(gòu)建全同胞家系。采用人工注射催產(chǎn)劑的方法促進(jìn)產(chǎn)卵, 收取的受精卵分別放置于室內(nèi)孵化箱孵化。孵化時(shí)水溫為23℃左右, 將孵出的魚(yú)苗都轉(zhuǎn)入到面積為12 m2的水泥池中進(jìn)行飼養(yǎng)。開(kāi)始投喂小型浮游動(dòng)物和豐年蟲(chóng), 每天投喂多次, 其后改投喂紅蟲(chóng), 等長(zhǎng)至2.5 cm左右時(shí)馴食投喂飼料,每天投喂3次。當(dāng)大口黑鱸為3月齡時(shí), 將2個(gè)家系分別采用CWT標(biāo)記, 然后放入佛山市三水白金水產(chǎn)種苗有限公司的1333.3 m2養(yǎng)殖池塘中進(jìn)行養(yǎng)殖。9月齡時(shí), 從2個(gè)家系子代中分別采集305尾和266尾實(shí)驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行體質(zhì)量、全長(zhǎng)、體高、頭長(zhǎng)和尾柄長(zhǎng)測(cè)量, 同時(shí)采集少量尾鰭, 用于提取DNA和基因型分析。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

分別對(duì)家系1中305尾子代和家系2中266尾子代中的7個(gè)標(biāo)記的基因型進(jìn)行檢測(cè), 然后統(tǒng)計(jì)家系子代個(gè)體中所含有的優(yōu)勢(shì)基因型的數(shù)量, 根據(jù)所含優(yōu)勢(shì)基因型數(shù)量的不同將大口黑鱸進(jìn)行分組, 分析不同數(shù)量的優(yōu)勢(shì)基因型組在生長(zhǎng)性狀上的差異, 不同組間生長(zhǎng)性狀均值比較采用SPSS19軟件中的One-way ANOVA進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 大口黑鱸親本基因型分析

為盡可能聚合優(yōu)勢(shì)基因型, 依據(jù)親本基因型的分布情況, 構(gòu)建了家系1和家系2用于生長(zhǎng)標(biāo)記聚合效果分析。2個(gè)家系的親本的基因型見(jiàn)表 2。對(duì)于家系1, 因?yàn)镾1、CL1689.Contig2_All-302、G-2782T、C-821G位點(diǎn)在親本中的基因型為純合子,所產(chǎn)生的子代全部為雜合基因型, Unigene33789_All-658和C-18T位點(diǎn)在家系子代中都不存在優(yōu)勢(shì)基因型, 在后續(xù)分析中僅統(tǒng)計(jì)其余7個(gè)分子標(biāo)記在305尾子代中的優(yōu)勢(shì)基因型分布情況。對(duì)于家系2,因?yàn)閁nigene19479_All-121、S1、C-6811T、C-821G位點(diǎn)在親本中的基因型為純合子, 所產(chǎn)生的子代全部為相同的基因型, C-598G和C-18T位點(diǎn)在家系子代中都不存在優(yōu)勢(shì)基因型, 在后續(xù)分析中僅統(tǒng)計(jì)其余7個(gè)分子標(biāo)記在266尾子代中的優(yōu)勢(shì)基因型分布情況。

2.2 大口黑鱸子代中優(yōu)勢(shì)基因型的頻率分布

對(duì)家系1中305尾大口黑鱸子代中的優(yōu)勢(shì)基因型進(jìn)行了統(tǒng)計(jì), 單個(gè)個(gè)體中聚合優(yōu)勢(shì)基因型的數(shù)量最多為6個(gè), 一共有11尾, 在子代中所占的比例為3.6%, 8個(gè)個(gè)體不含有優(yōu)勢(shì)基因型, 所占比例為2.6%。A-642C位點(diǎn)中優(yōu)勢(shì)基因型在子代群體中的分布頻率最高, 為55.4%, C-598G位點(diǎn)對(duì)應(yīng)的優(yōu)勢(shì)基因型的分布頻率最低, 為26.9% (表 3)。

對(duì)家系2中266尾大口黑鱸子代中的優(yōu)勢(shì)基因型進(jìn)行了統(tǒng)計(jì), 7尾大口黑鱸中含有最多的優(yōu)勢(shì)基因型, 所含數(shù)量都為6個(gè), 在子代中所占的比例為2.6%。7個(gè)個(gè)體都只含有1個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型, 所占比例為2.6%。A-2282C位點(diǎn)中優(yōu)勢(shì)基因型在子代群體中的分布頻率最高, 為76.6%, A-642C中的優(yōu)勢(shì)基因型的分布頻率最低, 為3.0% (表 3)。

表 2 13個(gè)生長(zhǎng)標(biāo)記在大口黑鱸親本中的基因型Tab. 2 Genotype of 13 growth related markers in largemouth bass parents

2.3 生長(zhǎng)性狀相關(guān)優(yōu)勢(shì)基因型聚合分析

將家系1中大口黑鱸含有的優(yōu)勢(shì)基因型數(shù)量的不同組間的生長(zhǎng)性狀進(jìn)行比較分析(表 4), 結(jié)果顯示, 沒(méi)有含優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體組的生長(zhǎng)性狀值最小,平均體質(zhì)量為185.03 g, 而含6個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體組的生長(zhǎng)性能最佳, 平均體質(zhì)量為261.27 g, 比沒(méi)有含優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體組的平均體質(zhì)量高41.2%。6個(gè)、5個(gè)、2個(gè)和0個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型組相互之間在體質(zhì)量方面均存在顯著性差異(P＜0.05), 且4個(gè)和2個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型組間在體質(zhì)量方面存在顯著性差異(P＜0.05)。家系2中所含優(yōu)勢(shì)基因型數(shù)量的不同大口黑鱸組間的生長(zhǎng)性狀的比較分析結(jié)果見(jiàn)表 5, 結(jié)果表明, 含1個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體的生長(zhǎng)性狀平均值最小, 平均體質(zhì)量為184.43 g, 而含6個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體的生長(zhǎng)性狀平均值最大, 平均體質(zhì)量為266.00 g, 且比沒(méi)有含優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體組的平均體質(zhì)量高44.2%。6個(gè)、5個(gè)、4個(gè)和3個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型組均分別與2個(gè)和1個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型組的平均體質(zhì)量差異顯著(P＜0.05)。家系1和家系2個(gè)體中生長(zhǎng)相關(guān)基因優(yōu)勢(shì)基因型聚合數(shù)量多少與其表型性狀呈正相關(guān), 反映出通過(guò)對(duì)生長(zhǎng)相關(guān)的優(yōu)勢(shì)基因型進(jìn)行聚合可以獲得具有優(yōu)良生長(zhǎng)性狀的大口黑鱸。

表 3 不同標(biāo)記中優(yōu)勢(shì)基因型的分布頻率Tab. 3 The frequency of dominant genotypes of different markers

3 討論

基因聚合是將分散在不同的個(gè)體、品種或品系中的理想基因聚合到同一個(gè)基因組中?；蚓酆鲜菍?shí)現(xiàn)分子育種的重要技術(shù)手段[23]。多基因聚合在部分動(dòng)植物上取得良好的效果, 如在魯西牛的研究中, 優(yōu)勢(shì)基因型的數(shù)量隨著生長(zhǎng)性狀改良的進(jìn)行而增加[24], 在大口黑鱸“優(yōu)鱸1號(hào)”和翹嘴鱖“華康1號(hào)”(Siniperca chuatsiBasilewsky)不同世代選育群體中, 優(yōu)勢(shì)基因型的平均含量隨選育世代的增加均呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)[25,26]。李紅霞等[27]發(fā)現(xiàn)了7個(gè)與建鯉增重相關(guān)的SNPs分子標(biāo)記, 富集4個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體平均增重顯著快于富集3個(gè)以下的個(gè)體的增重,且比不含優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體快約14%。本研究依據(jù)13個(gè)生長(zhǎng)相關(guān)分子標(biāo)記在大口黑鱸親本中的基因型分布情況, 構(gòu)建了2個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型聚合家系, 分析子代中優(yōu)勢(shì)基因型聚合與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性, 結(jié)果顯示, 個(gè)體中生長(zhǎng)相關(guān)基因優(yōu)勢(shì)基因型聚合數(shù)量越多, 其所表現(xiàn)的生長(zhǎng)性狀表型值越高。這提示了利用生長(zhǎng)性狀相關(guān)優(yōu)勢(shì)基因型的聚合可實(shí)現(xiàn)生長(zhǎng)表型性狀的改良, 優(yōu)勢(shì)基因型聚合技術(shù)在大口黑鱸育種和生產(chǎn)實(shí)踐中有著較好的應(yīng)用前景。

表 4 家系1子代中所含不同優(yōu)勢(shì)基因型數(shù)量的個(gè)體的生長(zhǎng)比較Tab. 4 Growth traits of largemouth bass with different pyramiding number of dominant genotypes in family 1

表 5 家系2子代中所含不同優(yōu)勢(shì)基因型數(shù)量的個(gè)體的生長(zhǎng)比較Tab. 5 Growth traits of largemouth bass with different pyramiding number of dominant genotypes in family 2

家系1中含有2個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體的平均體質(zhì)量為198.73 g, 稍高于含有1個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型個(gè)體的平均體質(zhì)量(196.46 g), 家系2中含有5個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體的平均體質(zhì)量稍高于含有4個(gè)優(yōu)勢(shì)基因型個(gè)體的平均體質(zhì)量。這與豬繁殖性狀相關(guān)標(biāo)記的聚合基因型的效應(yīng)分析研究結(jié)果相類(lèi)似[28,29], 表明了在多基因聚合過(guò)程中并不是各優(yōu)勢(shì)基因型的效應(yīng)簡(jiǎn)單地累加[9], 可能與相同調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中不同基因或位點(diǎn)之間會(huì)存在相互作用有關(guān), 如頡抗作用和上位效應(yīng)等。建鯉ODC1s基因上與增重相關(guān)的主效SNP位點(diǎn)之間存在著一定的頡抗作用[27]。張成鋒等[30]分析黃河鯉生長(zhǎng)相關(guān)優(yōu)勢(shì)基因型的富集效果,發(fā)現(xiàn)D-Loop253和Koi42位點(diǎn)的加性效應(yīng)間的互作達(dá)到顯著水平, 是影響生長(zhǎng)性狀的重要因素。戶(hù)國(guó)等[31]研究發(fā)現(xiàn)肉雞(Gallus gallus)高脂品系中ApoB基因T123G位點(diǎn)與UCP基因C1197A位點(diǎn)間存在上位效應(yīng), 對(duì)腹脂率產(chǎn)生顯著影響。

家系1中7個(gè)生長(zhǎng)相關(guān)分子標(biāo)記中的優(yōu)勢(shì)基因型群體平均體質(zhì)量均高于相對(duì)應(yīng)的劣勢(shì)基因型群體, Unigene19479_All-121位點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)基因型個(gè)體的平均體質(zhì)量差異最大： 優(yōu)勢(shì)基因型個(gè)體的平均體質(zhì)量為226.87 g, 劣勢(shì)基因型個(gè)體的平均體質(zhì)量為209.08 g, 而A-2282C位點(diǎn)中的優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)基因型個(gè)體的平均體質(zhì)量差異最小(11.2 g)。不同優(yōu)勢(shì)基因型對(duì)性狀的影響作用不同, 加之各優(yōu)勢(shì)基因型之間可能存在的相互作用, 提示在今后的分子標(biāo)記輔助選育過(guò)程中, 在富集多標(biāo)記優(yōu)勢(shì)基因型的同時(shí)要考慮各優(yōu)勢(shì)基因型的組合, 選擇互為協(xié)同作用的優(yōu)勢(shì)基因型前提下, 盡可能富集多的SNP標(biāo)記優(yōu)勢(shì)基因型。該研究獲得了聚合6個(gè)標(biāo)記優(yōu)勢(shì)基因型聚合的個(gè)體, 后續(xù)是否可以篩選到聚合更多的優(yōu)勢(shì)基因型的個(gè)體？今后我們將繼續(xù)進(jìn)一步探討, 該研究工作提供的聚合思路具有充分的可行性。

在本研究中所用的生長(zhǎng)相關(guān)功能基因的作用均已在水產(chǎn)動(dòng)物中得到了驗(yàn)證。從研究較為深入的經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)功能基因上去篩選功能性分子標(biāo)記, 然后利用功能性標(biāo)記開(kāi)展分子標(biāo)記輔助選擇,選擇的就是基因本身, 從而保證了選擇的準(zhǔn)確性和高效性[32]。通過(guò)人工選育出具有顯著表型性狀的群體是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程, 可將群體選育和功能性分子標(biāo)記篩選與應(yīng)用兩者結(jié)合, 相互印證。本實(shí)驗(yàn)先前的研究結(jié)果顯示, 在大口黑鱸“優(yōu)鱸1號(hào)”不同世代選育群體中, 優(yōu)勢(shì)基因型的平均含量隨選育世代的增加均呈現(xiàn)遞增趨勢(shì), 反映出人工選育在一定程度上富集了優(yōu)勢(shì)基因[25]。在選育出表型顯著的群體, 可為篩選到更多可用于分子標(biāo)記輔助育種的功能性標(biāo)記提供可靠的實(shí)驗(yàn)材料, 同時(shí), 應(yīng)用功能性分子標(biāo)記開(kāi)展類(lèi)似本實(shí)驗(yàn)的研究, 并在選育中加以應(yīng)用, 可以大大減少育種的工作量, 提高育種的效率。