郭浚 曹玉剛

[摘要]目的 探討血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）在原發(fā)性肝癌中的診斷價值。方法 選取我院收治的原發(fā)性肝癌病人72例，以肝硬化病人70例和健康志愿者70例作為對照，檢測各組血清GPC3水平。結(jié)果 原發(fā)性肝癌組血清GPC3水平明顯高于肝硬化組和健康對照組，肝硬化組血清GPC3水平明顯高于對照組（F=105.647，P<0.05）;腫瘤長徑>5 cm病人血清GPC3水平明顯高于腫瘤≤5 cm者（t=-2.771，P<0.05）;中低分化病人血清GPC3水平明顯高于高分化者（t=-2.276，P<0.05）。血清GPC3水平診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.882，截斷值為200 ng/L時，其原發(fā)性肝癌診斷靈敏度和特異度分別為81.40%和86.43%。結(jié)論 血清GPC3可用于原發(fā)性肝癌的診斷。

[關(guān)鍵詞]磷脂酰肌醇蛋白聚糖類;肝腫瘤;血清;診斷

[中圖分類號]R735.7

[文獻標志碼]A

[文章編號] 2096-5532（2019）05-0611-03

doi：10.11712/jms201905026

[開放科學（資源服務(wù)）標識碼（OSID）]

流行病學研究顯示，原發(fā)性肝癌的發(fā)病率和病死率均顯著上升[1-2]。疾病的早期診斷對于改善肝癌病人的臨床結(jié)局尤為重要。血清標志物檢測在惡性腫瘤早期篩查中的價值已獲共識。近年研究顯示，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）能夠影響癌細胞間連接蛋白的合成，降低癌細胞間的黏附能力，為癌細胞的轉(zhuǎn)移提供前提[3-4]，在促進癌細胞的增殖等方面發(fā)揮作用[5-6]。有研究認為，高表達的GPC3是促進肝癌病情進展的重要因素，但尚未見其對肝癌診斷學價值的分析。本研究通過對原發(fā)性肝癌病人血清GPC3水進行檢測，探討其與肝癌臨床病理特征的關(guān)系及其在原發(fā)性肝癌診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性研究方法，選取2016年2月—2017年5月在我院治療的原發(fā)性肝癌（C組）病人72例，納入標準：①均經(jīng)病理組織學診斷;②研究前未進行放療、化療等治療;③臨床資料保存完整。排除標準：①臨床資料不完整;②合并有其他原發(fā)性惡性腫瘤者。同時選取肝硬化（B組）病人70例、健康志愿者（A組）70例作為對照。3組受試者性別、年齡等

一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

1.2 血清GPC3檢測方法

采集各組受試者肘部靜脈血3 mL，加入抗凝劑2 mL，1 000 r/min離心5 min，采用生物酶聯(lián)免疫吸附試驗方法檢測血清GPC3水平。GPC3檢測試劑盒購自羅氏生物檢測應(yīng)用公司，配套試劑及儀器購自南京伯斯金生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學分析。計量資料結(jié)果采用[AKx-D]±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗;兩組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料比較使用χ2檢驗;診斷價值采用ROC曲線進行分析。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清GPC3水平比較

原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、對照組血清GPC3水平分別為（189.06±48.22）、（70.41±20.03）、（5.01±1.03）ng/L，原發(fā)性肝癌組明顯高于肝硬化組和對照組，肝硬化組明顯高于對照組，差異有顯著性（F=105.647，P<0.05）。

2.2 血清GPC3水平與原發(fā)性肝癌臨床病理特征關(guān)系

血清GPC3水平與原發(fā)性肝癌腫瘤大小、分化程度有關(guān)（t=-2.771、-2.276，P<0.05），與病人年齡、性別、TNM分期、HBsAg陽性、包膜、微血管侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05）。見表2。

2.3 血清GPC3水平診斷原發(fā)性肝癌的價值

血清GPC3水平診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.882，截斷值為200 ng/L時，其診斷靈敏度和特異度分別為81.40%和86.43%。見圖1。

3 討論

原發(fā)性肝癌容易早期發(fā)生淋巴結(jié)或者血行轉(zhuǎn)移，病情進展較為隱匿。長期臨床隨訪研究發(fā)現(xiàn)，中晚期肝癌占到了肝癌發(fā)病人群的25%以上，多數(shù)原發(fā)性肝癌臨床確診時已處于疾病的中晚期，失去了手術(shù)機會[7]?，F(xiàn)階段臨床上肝癌的總體診斷水平仍然較低，一項匯集了115例病人的臨床回顧性分析的結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌的早期診斷靈敏度不足35%，診斷的一致性較差，漏診率較高[8]，導致高危人群的篩查效果明顯下降。人甲胎蛋白（AFP）為肝癌診斷的主要特異性參考指標，其在肝癌的篩查過程中具有重要的參考價值，但AFP在肝硬化或者重度肝炎等疾病也存在一定程度的異常表達，其診斷原發(fā)性肝癌的特異度較低，檢查的穩(wěn)定程度較低。

GPC3主要影響細胞間的蛋白連接，其表達水平的改變能夠干預錨合蛋白、成纖維蛋白等細胞間質(zhì)成分的表達，加劇癌細胞間黏附能力的下降，促進癌細胞的轉(zhuǎn)移[9-10]。GPC3結(jié)構(gòu)上包含了多個磷酸基團結(jié)構(gòu)，其能夠在結(jié)合肝癌上皮細胞膜糖蛋白配體的基礎(chǔ)上，促進細胞內(nèi)信號通路或者第二信使等因子的改變，增加細胞信號轉(zhuǎn)導的異常，增加癌細胞DNA異常擴增的風險，促進癌細胞對靜脈血竇內(nèi)皮細胞的黏附，增加癌細胞通過血行轉(zhuǎn)移的風險[11]。同時，GPC3能夠影響癌細胞的生物學特征，增加癌細胞的凋亡抑制，增加癌細胞對于鄰近正常組織的浸潤，導致臨床分期的進展[12]。

本文研究結(jié)果顯示，肝癌病人血清中GPC3濃度較健康對照組明顯上升，提示GPC3可能參與到了原發(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中，GPC3的高表達能夠通過影響肝癌細胞內(nèi)的NOTCH信號通路或者AKT信號通路的激活，促進癌細胞DNA基因的高轉(zhuǎn)錄，最終促進腫瘤浸潤病灶范圍的增大。同時，過度表達的GPC3能夠增強局部癌細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)，維持腫瘤干細胞的活性。已有研究結(jié)果顯示，肝癌病人血清及病灶組織中的GPC3濃度平均上升25%～55%，并且病人的臨床分期進展越快，癌細胞的分化程度越低，其GPC3蛋白的異常表達越為明顯[13-14]。但本文研究并未發(fā)現(xiàn)GPC3的異常表達與肝癌病人臨床分期有關(guān)，考慮可能與檢測方法、肝癌病人并發(fā)癥及GPC3表達的個體化差異等有關(guān)。本文研究結(jié)果顯示，病灶組織的范圍越大、癌細胞的分化程度越差，血清中GPC3的水平越高，提示GPC3能夠影響肝癌病人臨床病理特征的進展。本次研究并未發(fā)現(xiàn)GPC3表達與微血管侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示GPC3并不會增加肝癌病人癌細胞對于血管內(nèi)皮或者淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞的黏附能力。本文研究結(jié)果還顯示，血清GPC3水平>200 ng/L時，其診斷肝癌的靈敏度和特異度均超過80%，提示通過隨訪病人血清GPC3水平可能為臨床上肝癌病情的判斷提供參考。

綜上所述，血清GPC3可能用于原發(fā)性肝癌的診斷。

[參考文獻]

[1]GERAMIZADEH B， SEIRFAR N. Diagnostic value of arginase-1 and glypican-3 in differential diagnosis of hepatocellular carcinoma， cholangiocarcinoma and metastatic carcinoma of liver[J]. Hepatitis Monthly， 2015，15（7）：30336-30342.

[2]ZHOU S M， PARHAM D M， YUNG E， et al. Quantification of glypican 3， β-catenin and claudin-1 protein expression in hepatoblastoma and paediatric hepatocellular carcinoma by co-lour deconvolution[J]. Histopathology， 2015，67（6）：905-913.

[3]李海榮，黃蘭姍，陳罡，等. GPC3與肝癌細胞增殖的相關(guān)性[J]. 世界華人消化雜志， 2014，22（15）：2108-2115.

[4]韓春耀，蘇繼榮. 磷脂酰肌醇蛋白3與原發(fā)性肝癌關(guān)系研究進展[J]. 中國臨床實用醫(yī)學， 2014，4（2）：78-80.

[5]王延峰，李南陽，任雅玲，等. GPC3和 AFP 聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價值[J]. 中國實驗診斷學， 2015，19（3）：366-368.

[6]朱波，肖亞雄，彭宇生，等. GPC3和AFP聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌診斷中的價值[J]. 中國肝臟病雜志（電子版）， 2016，8（2）：110-112.

[7]GAO Huiping， LI Kesang， TU Hong， et al. Development of T cells redirected to glypican-3 for the treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Clinical Cancer Research： an Official Journal of the American Association for Cancer Research， 2014，20（24）：6418-6428.

[8]LEE H J， YEON J E， SUH S J， et al. Clinical utility of plasma glypican-3 and osteopontin as biomarkers of hepatocellular carcinoma[J]. Gut and Liver， 2014，8（2）：177-185.

[9]念瑩，宋桂先，王琳琳，等. 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和磷脂酰肌醇蛋白多糖-5在人肝癌組織中的表達及意義[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志（電子版）， 2015，9（11）：2071-2074.

[10]王慧利，趙金滿. 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在肝癌中的表達及在治療中的作用研究進展[J]. 胃腸病學和肝病學雜志， 2015，24（9）：1035-1038.

[11]喻超，黃早早，楊盛力，等. 磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3聯(lián)合甲胎蛋白檢測對原發(fā)性肝癌診斷價值的Meta分析[J]. 中華肝膽外科雜志， 2014，20（8）：566-571.

[12]尚合江. 血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3聯(lián)合AFP-L3%診斷原發(fā)性肝癌價值[J]. 中華實用診斷與治療雜志， 2014，28（9）：908-909.

[13]楊柳青，吳元凱，元云飛，等. 血清 GPC3、GS 和 HSP70檢測在乙肝相關(guān)肝癌診斷中的應(yīng)用[J]. 廣東醫(yī)學， 2015，36（6）：912-915.

[14]馮軍花，劉志權(quán)，魏媛媛，等. 血清 GPC3與 TGF-β1聯(lián)合檢測對 AFP 陰性原發(fā)性肝癌的診斷價值[J]？ ?國際檢驗醫(yī)學雜志， 2015，36（19）：2787-2788.

（本文編輯 黃建鄉(xiāng)）