李 清,楊明清,秦 燕,蘭鄒然,陸 峰,黨安坤

(1.山東省臨沂市畜牧獸醫(yī)檢測中心,山東 臨沂 276000;2.山東省沂水縣畜牧局,山東 沂水 276400;3.山東省動物疫病預防與控制中心,山東 濟南 250022)

布魯菌病(以下簡稱布病)是由布魯菌感染動物和人,造成生殖系統損害為主、可能伴隨骨胳和多器官損壞的一種人獸共患傳染病。該病可以動物中以牛羊感染常見,豬、犬等多種動物均可感染,以羊種布魯菌對人造成的感染最為嚴重[1],布病的流行不僅會對養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失,而且具有非常重要的公共衛(wèi)生意義。沂水縣位于山東省中東部,山東半島泰沂山脈與膠濰平原交界處,地勢南高北低,自南而東為起伏較大的山嶺地帶,間有若干谷狀盆地,西部、中部及北部,系大片波狀平原,屬膠萊沖積平原南部的濰河平原,其邊緣有低緩山丘分布,氣候適宜,是山東省傳統的畜牧業(yè)養(yǎng)殖、加工大縣,畜禽養(yǎng)殖主要以生豬、肉雞、蛋雞和特種動物為主。近幾年來,隨著市場經濟的發(fā)展,羊的養(yǎng)殖量較往年有擴大的趨勢,但是以小規(guī)模養(yǎng)羊戶(年出欄500只以下)占比較大,據統計,縣里存欄300只以下的小規(guī)模養(yǎng)羊戶占比約90%。山東省雖然被農業(yè)部家畜布病防治區(qū)域化管理劃為一類地區(qū),但沂水縣位于膠東半島口蹄疫免疫無疫區(qū)和高致病性禽流感免疫無疫區(qū)中,動物疫病防控政府相對比較重視,防疫基礎扎實,對布病防控也投入了大量人力物力和財力,動物布病沒有出現大范圍流行,呈穩(wěn)定控制狀態(tài)。但2010年以來,本縣人間布病病例數也有逐年增多趨勢,為了解該縣羊群布病的流行狀況,開展了針對羊布病的基線調查工作。

1 材料與方法

1.1 病例定義 參照李煥明的病例定義[2],調整后定義如下：

陽性羊：虎紅平板凝集試驗初篩陽性,經試管凝集試驗復核仍為陽性的血清樣品對應的羊只。

陽性群：至少有1只檢測為布病陽性羊的養(yǎng)羊場戶。

陽性鎮(zhèn)(街)：至少檢測出1個布病陽性群的鎮(zhèn)(街)。

1.2 研究群和抽樣單元 研究群：2017年8～9月份,根據山東省《2017年布魯菌病流行狀況基線調查》要求,對全縣18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的1 126個羊養(yǎng)殖場戶(一個自然村的所有小規(guī)模養(yǎng)羊戶存欄為一個場群)開展了羊布病基線調查。

抽樣單元：場戶層面,抽樣單元為每個養(yǎng)羊場戶;場戶內個體層面,抽樣單元為所有6月齡以上的羊只。

1.3 抽樣方案設計 參照徐秀榮等[3]的方法進行調整后開展本次羊場布病基線調查,根據沂水縣各鎮(zhèn)(街)羊的存欄情況采用兩階段抽樣方法。其中有3個奶山羊場全部作為抽樣場,且場內所有羊全部采樣普查。

第一階段：在全縣1 126個養(yǎng)羊場戶內隨機抽取需調查的羊場群。

第一步,計算全縣需抽樣的養(yǎng)羊場戶數。用估計流行率的方法[4]抽取,全縣有1 126個場群,按95%置信水平,50%的預期流行率,7%的可接受誤差,計算公式為計算出抽樣場群為166個。

第二步,計算每個鎮(zhèn)街的抽樣場數,按配額方法進行,即根據每個鎮(zhèn)街場群數占全縣場群數的比例(各鎮(zhèn)街場數占比=場數/1126),分配這166個場群,“配額場數=166×各鎮(zhèn)街場數占比”。

第三步配額取整。

第四步從每個鎮(zhèn)街中選取要抽樣的場。根據每個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的養(yǎng)羊場戶列表,用系統隨機抽樣方法選取每個鄉(xiāng)鎮(zhèn)要抽樣的養(yǎng)羊場戶。

第二階段：對第一階段選定的18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的166個養(yǎng)羊場戶進行樣本量計算和隨機抽取。

第一步,選定場群后,如果發(fā)現有些場群羊只已經出售,或者不符合抽樣要求,可以適當進行場的調整,采用就近選擇類似的場群即可。同樣采用估計流行率的方法抽取,按照95%的置信水平、50%的預期流行率、10%的可接受絕對誤差計算選定的18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)166個場戶中每個場戶的抽樣羊數。

第二步,場內隨機選羊,按系統隨機方法抽樣。

1.4 檢測方法 對采集血液,凝固完全后離心分離血清,用虎紅平板凝集試驗進行初篩,初篩陽性的樣品再用試管凝集試驗進行復核,復核為陽性的判定為布病抗體陽性。本次調查虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗的敏感性和特異性參照文獻[2]定為虎紅平板凝集試驗的敏感性、特異性分別為95%、80%,試管凝集試驗的敏感性、特異性分別為85%、90%,垂直聯合試驗的敏感性、特異性分別為81%和98%。

1.5 數據分析 血清流行率的計算：根據實驗室檢測結果,獲知該地區(qū)羊布病的個體表觀流行率和場群表觀流行率,利用公式TP=(AP+Sp-1)/(Se+Sp-1)計算出真實流行率?？梢酝ㄟ^以下公式計算真實流行率的95%置信區(qū)間(CI)：

其中p為真實流行率,Z標準正態(tài)分布中概率0.05對應的統計量,n為抽樣數量。

2 結果

2.1 3 養(yǎng)羊場基本情況 根據調查統計結果,該縣目前有養(yǎng)羊場戶1 126戶,存欄羊163 083只,100～299只的養(yǎng)羊場戶最多,總共有446個,存欄羊78 388只,總體而言,該縣羊養(yǎng)殖以小規(guī)模散養(yǎng)為主,小規(guī)模養(yǎng)羊戶仍然以傳統的半放牧為主,集約化養(yǎng)殖比例較低,存欄數500以上的規(guī)模養(yǎng)殖場只有35個,占比3.11%(見表1)。

表1 沂水縣不同規(guī)模養(yǎng)羊場戶數及存欄數

2.2 3個奶山羊普查結果 3個奶山羊場有1個檢出布病陽性,場表觀流行率達到33.3%(1/3)(95%CI：0.5% ～2.0%),檢測到的陽性場B場,個體表觀流行率為 0.43%(2/460)(95%CI：0.5% ～2.0%)(見表2)。

表2 2017年沂水縣羊3個奶山羊場布病血清學調查結果統計

2.3 羊群布病個體流行率 對全縣18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)1 126個羊場群中的166個養(yǎng)羊場戶(包含3個奶山羊場)抽取樣本8 988份血樣(包括3個奶山羊場1 290份血樣)。經實驗室檢測,共檢出6份布病血清學陽性,個體表觀流行率為0.7%(6/8 988)(95%CI：0.0% ～0.1%),計算得到的真實流行率為0.06(95%CI：0.0% ～0.1%)。 檢測到的3個陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn),編號為13的鄉(xiāng)鎮(zhèn)表觀陽性率最高,為0.94(3/320)(95%CI：0.2% ～2.7%)(見表3)。

2.4 羊群布病群體流行率 這18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)1 126個羊場群中的166個養(yǎng)羊場戶(包含3個奶山羊場)檢出5個養(yǎng)羊場戶(包括1個陽性奶山羊場),養(yǎng)羊場戶表觀群體陽性率為3.01%(5/166)(95%CI：1.0%～6.9%),計算得到的真實流行率為3.79%(95%CI：0.0% ～6.2%);編號為1、2 和 13 的陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn)布病表觀群體流行率分別為33.33%(1/3)(95%CI：0.8% ～ 90.6%)、9.09%(1/11)(95%CI：0.2% ～ 41.3%) 和 27.27%(3/11)(95%CI：6.0%～61.0%),計算得到的真實流行率分別為42.17%(95%CI：0.0% ～ 100%)、11.48%(95%CI：0.0% ～ 49.8%)和 34.50%(95%CI：5.1% ～74.7%)(見表4)。

3 討論與結論

3.1 調查結論 本調查首次對沂水縣羊群布病開展基線調查,從調查結果來看,從116個抽取的養(yǎng)羊場戶中檢出5個陽性場戶,布病群體表觀流行率為3.01%(5/166)(95%CI：1.0% ～6.9%),雖然不算很高,但也需引起管理層的關注,應認真分析造成養(yǎng)羊場戶布病陽性的原因,以防布病進一步在羊群中流行和暴發(fā),進一步加強對職業(yè)人群關于布病 危害和個人防護方面知識和技能的宣傳和教育,防止職業(yè)人群感染布病,與此同時,應加強布病陽性動物的及時處置和陽性羊場戶的監(jiān)督管理,有效防止布病擴散傳播,并防止動物布病感染人類。鑒于目前該縣羊群布病流行率較低,建議該縣羊群不采取布病免疫的方式控制該病,可采用直接開展監(jiān)測凈化的方式控制布病,該縣獸醫(yī)主管部門可盡早出臺羊布病凈化的日程表,在全縣開展羊布病凈化,同時做好檢疫監(jiān)督工作,嚴防外來的布病陽性動物進入。

表3 2017年沂水縣羊場群布病血清學調查結果統計 (包括表1的3個奶山羊場)

表4 沂水縣羊布病群流行率統計

3.2 引導養(yǎng)羊朝集約化養(yǎng)殖轉變 從調查統計情況看,該縣養(yǎng)羊業(yè)仍以傳統散養(yǎng)為主,養(yǎng)殖方式落后,養(yǎng)殖水平總體較低,規(guī)?；B(yǎng)羊場占比不到10%,這種養(yǎng)羊方式對于羊病的預防和控制都帶來了一定難度,尤其做為接觸傳播的傳染病,如果存在大量的放養(yǎng)羊只,那么共同牧場一旦污染布魯菌,由于布魯菌外界環(huán)境中抵抗力強,在衣服、皮、毛上可存活達5個月,在牧草中可存活2～3個月[5],就很容易引起放牧羊只感染,造成布病疫情擴散。因此,政府部門應積極引入羊養(yǎng)殖方式的轉變,朝著規(guī)?；图s化方向努力。

3.3 布病陽性原因分析 本次調查的布病陽性中有1個場為奶山羊場,該場羊全部從山西省購入,山西省為動物布病一類地區(qū),在購入羊群的同時,引入布病的風險也比較大,而老百姓在購入羊只時并沒有開展布病檢測,因此,該場羊布病檢出陽性與購入動物存在一定邏輯關系,山東省今年羊布病調查中也有類似的結論[2,6]。除了這個奶山羊場布病檢測陽性以外,還有4個小養(yǎng)羊戶檢出布病陽性,其中有3個小養(yǎng)羊戶都屬一個自然村,這幾個養(yǎng)羊戶布病陽性的原因根據調查結果無法確定,當地動物疫控部門懷疑為配種和放牧過程中的感染,但是對配種的公羊進行了布病跟蹤檢測,未檢出布病陽性。

3.4 奶山羊的布病應更加關注 近年來由于羊奶價格較高,奶山羊養(yǎng)殖受到一定程度的追捧,出現了不少新投入的奶山羊場,有些奶山羊場還是重點扶貧項目。本次調查對該縣所有3個奶山羊場開展了普查,在其中1個場檢出了2例布病陽性,從場群流行率來看似乎不低,表觀場群流行率達到了33.33%(1/3)(95%CI：0.8% ～90.6%),由于樣本量少,還不能據此將奶山羊場的流行率定性為高流行率,但是由于奶山羊是對社會提供羊奶的,如果奶山羊攜帶布魯菌,那么這種羊提供的羊奶無疑會給布病傳播帶來可怕的后果,如果因喝羊奶造成大量人群感染布病,那么甚至會引起社會恐慌。因此,對于有奶山羊的縣區(qū)在做了牛羊布病防控的同時,應更關注奶山羊場的布病檢測,一旦奶山羊檢出布病陽性,對陽性動物和羊奶應及時處置,有效防止布病擴散傳播或感染人類。