曾恒 綜述,馮丹 審校

200433 上海， 海軍軍醫(yī)大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院5隊(曾恒)；200433 上海， 海軍軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院 腫瘤科(馮丹)

我國胃癌(gastric cancer,GC)的發(fā)病率、病死率均僅次于肺癌，位居腫瘤排行第2位，嚴(yán)重威脅著國人的健康，在未來很長的一段時間內(nèi)，GC的診治工作都將會是我國最重大的衛(wèi)生問題之一。由于早期缺乏特異性的體征和癥狀，我國GC早期檢出率僅僅約10%[1]，極容易導(dǎo)致延誤診斷和誤診。盡管我國GC個性化治療效果已經(jīng)取得很大進(jìn)展，但晚期GC患者的無進(jìn)展生存期和總生存期仍處于較低水平，5年生存率不到30%，據(jù)最新研究顯示，晚期GC患者約50%發(fā)生術(shù)后復(fù)發(fā)或者轉(zhuǎn)移[2]，因而監(jiān)測GC患者的疾病進(jìn)展對提高生存率至關(guān)重要。在臨床診治過程中，GC的早期診斷、療效監(jiān)測、疾病復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移預(yù)警等方面仍存在困境，因此尋找更敏感、無創(chuàng)、經(jīng)濟(jì)的生物標(biāo)志物是臨床及科研工作者不懈努力的方向?！耙簯B(tài)活檢”以其操作簡便、可重復(fù)性好、非侵入性等優(yōu)勢，在胃癌早期診斷、療效監(jiān)測以及疾病復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移預(yù)警等方面取得了一定進(jìn)展，具有良好的應(yīng)用前景。

1 循環(huán)腫瘤細(xì)胞在GC診治中的研究進(jìn)展

循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells,CTC)定義為由腫瘤原發(fā)、轉(zhuǎn)移灶自發(fā)脫落或因診療操作而落入外周血液循環(huán)的腫瘤細(xì)胞[3]。1869年，Ashworth教授[4]首次在1例腫瘤轉(zhuǎn)移患者的外周血液發(fā)現(xiàn)了與原發(fā)灶組織細(xì)胞生物學(xué)特性極其相似的細(xì)胞，研究表明這些細(xì)胞源于腫瘤灶。CTC從腫瘤組織脫落入外周血液后由于細(xì)胞微環(huán)境改變、機體免疫殺傷以及血液剪應(yīng)力等原因，絕大部分生存期很短，患者外周血中殘留的腫瘤細(xì)胞極少，平均5×109個紅細(xì)胞和5×106～10×106個白細(xì)胞中才能檢測到一個[5]，但存留的細(xì)胞具有很強的生存力，往往能發(fā)展為微小的癌栓甚至轉(zhuǎn)移灶。

目前認(rèn)為轉(zhuǎn)移是GC患者死亡的最重要原因，而CTC在腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移上起著關(guān)鍵作用。為了躲避免疫殺傷以及抵抗凋亡，轉(zhuǎn)移過程中的CTC會產(chǎn)生不同的表型變化，這其中上皮細(xì)胞-間充質(zhì)型轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)起著最重要的作用，轉(zhuǎn)化過程表現(xiàn)為細(xì)胞各類上皮標(biāo)志物(如CK、E-鈣粘蛋白)表達(dá)降低而間質(zhì)細(xì)胞來源的蛋白(如波形蛋白)表達(dá)增加，從而促進(jìn)腫瘤灶細(xì)胞間黏附以及緊密連接發(fā)生改變，Liu等[6]發(fā)現(xiàn)EMT對促進(jìn)CTC向血管滲透以及維持CTC在血管內(nèi)生存發(fā)揮一定的作用，這可能導(dǎo)致侵襲性較強的腫瘤細(xì)胞脫離連接緊密的細(xì)胞層而遷移至血管，從而形成微小轉(zhuǎn)移灶。

有研究報道只有具有干細(xì)胞樣特性的CTC才能形成轉(zhuǎn)移灶，Zhang等[7]研究發(fā)現(xiàn)循環(huán)腫瘤干細(xì)胞具有極高的侵襲性、轉(zhuǎn)移性以及自我更新、增殖能力，凋亡率很低且能誘導(dǎo)腫瘤形成，李熳等[8]應(yīng)用密度梯度離心法和雙重免疫熒光法(細(xì)胞角蛋白19/CD44)檢測CK 19和CD44(GC腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物)陽性的 CTC。研究共納入45例GC患者，其中27例患者檢測到CTC陽性，在CTC陽性患者中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者16例，其中14例為CD44陽性;13例患者出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，其中12例為CD44陽性;14例患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)，其中13例為CD44陽性，研究結(jié)果指出，CD44陽性CTC與GC患者發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及術(shù)后復(fù)發(fā)顯著相關(guān)(P<0.05)，該研究為腫瘤干細(xì)胞形成新的轉(zhuǎn)移灶的觀點提供了有力的支持，認(rèn)為檢測表達(dá)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物的CTC可能更有臨床意義，Watanabe等[9]為評估CD44陽性CTC的臨床意義，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測了26名GC患者和12名健康志愿者外周血中CD44+和CD44-CTC的數(shù)量，研究發(fā)現(xiàn)通過檢測CD44+CTC對GC患者的鑒定敏感性和特異性分別為92.3%和100%，更重要的是，該研究還發(fā)現(xiàn)CD44+CTC的數(shù)量與較高的TMN分期、腫瘤深度以及靜脈侵犯呈顯著正相關(guān)關(guān)系(P<0.005)，可以為GC患者診斷和治療提供新的標(biāo)志物。Inoue等[10]對兩例晚期GC患者化療過程中的CTC進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)在第1次、第2次化療后CTC計數(shù)均有降低，而當(dāng)患者產(chǎn)生化療耐藥時，CTC計數(shù)開始增加，由此認(rèn)為CTC計數(shù)與疾病的進(jìn)展顯著相關(guān)，Ito等[11]研究顯示術(shù)后7.5mL外周血中CTC計數(shù)低于5個的患者復(fù)發(fā)率顯著低于5個及以上患者，研究表明患者術(shù)后CTC檢出水平與癌癥復(fù)發(fā)率呈顯著負(fù)相關(guān)，Lee等[12]研究發(fā)現(xiàn)100例化療患者中，7.5mL外周血中檢測到CTC計數(shù)大于或者等于5個的患者總生存期顯著短于未檢測到CTC和計數(shù)小于5個的患者，在CTC陽性組與陰性組化療效果的對比中，CTC陽性組患者對細(xì)胞毒性化療療效明顯較差，研究證實CTC計數(shù)與療效呈顯著正相關(guān)關(guān)系，Li等[13]對晚期GC患者的CTC水平進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療期間高水平CTC與預(yù)后不良相關(guān)，治療后CTC水平有助于評估治療反應(yīng)，Zou等[14]對近年來Pubmed等各數(shù)據(jù)庫所報道的文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，經(jīng)嚴(yán)格篩選后16項研究被納入，其結(jié)果表明外周血中CTC的高水平表達(dá)與患者的總體生存率、無進(jìn)展生存期顯著相關(guān)，患者外周血中檢測到高水平CTC預(yù)示著較短的無進(jìn)展生存期，研究證實了胃GC患者CTC具有顯著的預(yù)后價值。

目前臨床上絕大部分的臨床研究都支持GC患者體內(nèi)CTC的含量顯著高于正常人，并且隨著疾病的進(jìn)展、腫瘤灶尺寸的增大或者轉(zhuǎn)移，腫瘤組織的惡性度增加，CTC的含量也隨之增加，CTC在GC的早期診斷、監(jiān)測疾病進(jìn)展、復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移預(yù)警、判斷預(yù)后以及檢測療效等方面的應(yīng)用價值逐漸得到認(rèn)可。最新研究表明，CTC中存在相當(dāng)大的異質(zhì)性，CTC在分析腫瘤的異質(zhì)性以及來源上也顯示出巨大的臨床價值[15]，這也為GC的個體化治療提供了新的策略。

2 循環(huán)腫瘤DNA在GC診治中的研究進(jìn)展

循環(huán)腫瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)是指由腫瘤細(xì)胞釋放入外周血的基因組片段，可由單鏈、雙鏈DNA或單雙鏈DNA片段混合組成，與腫瘤組織的生物學(xué)特性密切相關(guān)。ctDNA發(fā)展史最早可追溯到1948年科學(xué)家Mandel[16]首次發(fā)現(xiàn)游離DNA(cell free DNA, cfDNA)的存在。隨后的研究發(fā)現(xiàn)在炎癥、創(chuàng)傷等狀態(tài)下cfDNA明顯增高，但當(dāng)時人們對DNA的認(rèn)識不夠，所以并未引起重視，1977年，Leon等[17]研究發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移患者cfDNA水平高于健康人，且晚期患者水平更高。由于技術(shù)受限，當(dāng)時并不清楚cfDNA來源及與腫瘤組織的關(guān)系。直到1994年人們才發(fā)現(xiàn)這些DNA來源于原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶及循環(huán)血液中活的、凋亡或者死亡的腫瘤細(xì)胞，且具有腫瘤標(biāo)志性突變，并稱之為ctDNA[18]，研究表明ctDNA在診斷、判斷預(yù)后以及監(jiān)測腫瘤的進(jìn)展上具有重要應(yīng)用價值。

ctDNA的研究關(guān)鍵在于檢測技術(shù)，近年來數(shù)字PCR以及二代測序極大地提高了富集能力和檢測的靈敏度，ctDNA的許多臨床價值得以證實，Park等[19]研究發(fā)現(xiàn)GC患者外周血中ctDNA濃度是健康對照組的2.4倍，提示血漿ctDNA可作為GC早期診斷的腫瘤標(biāo)志物。Kim等[20]對30例GC患者和34例健康者進(jìn)行病例對照研究，發(fā)現(xiàn)早期GC cfDNA水平顯著低于晚期GC患者且均高于健康者，患者術(shù)后24小時內(nèi)cfDNA顯著下降，研究認(rèn)為cfDNA可以作為早期發(fā)現(xiàn)GC和預(yù)測腫瘤負(fù)荷的生物指標(biāo)，Hamakawa等[21]對臨床過程中TP53-ctDNA的定量值與腫瘤的狀態(tài)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)GC患者的ctDNA表達(dá)可作為監(jiān)測GC進(jìn)展的有用生物標(biāo)志物， Gao等[22]對近年來所報道的16項關(guān)于ctDNA在GC中的表達(dá)及其臨床意義的研究，共計1 193例GC患者ctDNA的表達(dá)進(jìn)行Meta分析，發(fā)現(xiàn)ctDNA的存在與GC惡性程度有顯著的正相關(guān)關(guān)系，研究證實了ctDNA的存在預(yù)示著GC患者較差的無進(jìn)展生存期和總生存期(P<0.001)。Pu等[23]發(fā)現(xiàn)GC患者ctDNA的濃度隨著TNM分期增加而顯著升高(P<0.05),而在健康對照組中未檢測到ctDNA,該研究認(rèn)為ctDNA濃度有望作為評估GC進(jìn)展的分子標(biāo)志物。Gao等[24]對70例GC患者腫瘤灶和ctDNA的基因突變進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)ctDNA與原發(fā)腫瘤組織的HER2擴(kuò)增具有高度一致性，研究認(rèn)為基于ctDNA的評估可以部分克服腫瘤的異質(zhì)性，成為GC個體化治療新的指標(biāo)，有研究發(fā)現(xiàn)大多數(shù)癌癥患者ctDNA中有基因突變且突變頻率與治療效果也具有相關(guān)性，根據(jù)突變制定個性化治療方案前景可觀[25]。

甲基化在GC的整個演變過程中起著重要作用，評估特定位點的基因甲基化已經(jīng)成癌癥的診斷途徑之一，Pimson等[26]對PCDH10和RASSF1A基因甲基化進(jìn)行研究，結(jié)果顯示兩個基因在晚期GC患者中甲基化程度更高并且甲基化患者比例隨著TNM分期增加而增高，甲基化陽性患者生存時間明顯短于陰性患者，血液樣本中的PCDH10和RASSF1A甲基化(截定值取低于6%時敏感性分別為94.06%和83.17%，)可以作為GC患者非侵入性診斷指標(biāo)。Tahara等[27]在207例GC患者中使用亞硫酸氫鹽焦磷酸測序定量白細(xì)胞DNA中IGF2DMR和LINE1的甲基化狀態(tài)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IGF2DMR和LINE1的高甲基化與GC的進(jìn)展顯著相關(guān)，如淋巴道轉(zhuǎn)移、腹膜侵襲以及肝轉(zhuǎn)移。Hu等[28]為評估血液DNA甲基化標(biāo)記物檢測GC患者的準(zhǔn)確性，對近年來報道的32項研究4 172例患者進(jìn)行Meta分析，研究證實基于血液中DNA甲基化的檢驗具有高特異性，評估多個甲基化基因可以顯著提高診斷靈敏度。

與傳統(tǒng)活檢相比較，ctDNA的優(yōu)勢在于不僅能早期診斷、發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、全方位監(jiān)測疾病進(jìn)展以及化療的敏感性，更重要的是檢測技術(shù)微創(chuàng)、無風(fēng)險、不同時段采集以動態(tài)監(jiān)測以及更準(zhǔn)確地反映腫瘤組織的異質(zhì)性，可以更好地制定個性化治療方案。此外ctDNA攜帶的基因遺傳信息與相應(yīng)的腫瘤組織具有很好的一致性，這為開發(fā)GC靶向治療提供了新的途徑。

3 外泌體在GC診治中的研究進(jìn)展

外泌體是一類直徑約為30～150nm廣泛存在于細(xì)胞外液中的亞細(xì)胞囊泡結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)域經(jīng)內(nèi)吞作用形成囊泡，囊泡選擇性包裹基質(zhì)內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)后形成多泡體，一部分多泡體被溶酶體水解，而另外一部分則與以鈣離子依賴方式與細(xì)胞膜融合后將囊泡排除，即形成外泌體[29]。外泌體中含有豐富的蛋白組學(xué)和遺傳信息，可作為信息分子參與細(xì)胞間信息傳遞。外泌體廣泛存在于人體液中，包括唾液、尿液、精液、母乳、血清以及腦脊液[30]。

腫瘤干細(xì)胞被認(rèn)為是GC患者復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的根源，腫瘤干細(xì)胞與其他細(xì)胞之間的物質(zhì)交流與信號通訊對維持以及形成新腫瘤灶至關(guān)重要，外泌體的釋放和攝取則是其中一個重要方式。研究表明外泌體在維持腫瘤干細(xì)胞表型中起著重要作用[31]，如食管癌細(xì)胞通過外泌體內(nèi)容物miR-21作用于其他癌細(xì)胞PDCD4途徑從而促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲[32]。Ko等[33]采用盲法研究，將3組不同疾病狀態(tài)的小鼠隨機打亂后通過多通道納米流體系統(tǒng)分離外泌體以及qPCR檢測外泌體內(nèi)mRNA再次分組小鼠,成功將患癌癥組小鼠、癌前病變小鼠和健康組小鼠區(qū)分，從而揭示了外泌體與腫瘤之間的關(guān)系，Arita等[34]通過超速離心從細(xì)胞條件培養(yǎng)基中提取外泌體，研究了腫瘤來源的外泌體對GC進(jìn)展的影響，認(rèn)為外泌體可能誘導(dǎo)間皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)因而在GC腹膜轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用，Wang等[35]通過比較來源于癌組織和癌組織周圍其他組織的間充質(zhì)干細(xì)胞所表達(dá)miRNA的差異，發(fā)現(xiàn)GC組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞通過外泌體將miRNA轉(zhuǎn)移至GC細(xì)胞從而促進(jìn)其增殖和轉(zhuǎn)移，研究證實癌細(xì)胞衍生的外泌體通過調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境促進(jìn)癌癥進(jìn)展，Wu等[36]證明GC細(xì)胞來源外泌體激活巨噬細(xì)胞表達(dá)增加的促炎因子水平，反過來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和遷移。Zheng等[37]研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)腫瘤相關(guān)性巨噬細(xì)胞分泌的功能性ApoE蛋白向腫瘤組織轉(zhuǎn)移從而促進(jìn)了癌癥的轉(zhuǎn)移。

ZFAS1是一種新發(fā)現(xiàn)的長鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs,lncRNA)，可促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，Pan等[38]采用RT-PCR檢測腫瘤組織、血清標(biāo)本、GC患者血清外泌體以及正常細(xì)胞系中ZFAS1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)GC細(xì)胞、腫瘤組織、血清以及血清外泌體中ZFAS1過表達(dá)，研究認(rèn)為ZFAS1可以通過外泌體遞送以促進(jìn)GC進(jìn)展，ZFAS1可以作為GC的潛在診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物。Zhao等[39]通過RT-qPCR技術(shù)檢測了126名GC患者和120名健康者血清外泌體內(nèi)lncRNA HOTTIP，結(jié)果發(fā)現(xiàn)GC患者血清外泌體HOTTIP的表達(dá)顯著高于健康者，并且其表達(dá)水平與癌組織浸潤深度和TNM分期(P<0.001)顯著相關(guān)，研究認(rèn)為外泌體HOTTIP相較于CEA、CA19-9和CA724具有更高的診斷能力。Yang等[40]采用小鼠異種移植模型評估外來體衍生的miR-130a與體內(nèi)腫瘤生長之間的相關(guān)性。研究證明了外泌體通過在體內(nèi)和體外靶向c-MYB將miR-130a從GC細(xì)胞遞送到血管細(xì)胞中以促進(jìn)血管生成和腫瘤生長。研究表明肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)具有對癌細(xì)胞生長和血管生成的抑制作用，Zhang等[41]通過表征HGF使其靶向GC細(xì)胞，而后將HGF包埋于外泌體中并轉(zhuǎn)運至癌細(xì)胞內(nèi)，從而成功實現(xiàn)GC靶向治療。

外泌體作為腫瘤細(xì)胞間信息傳遞和物質(zhì)轉(zhuǎn)運的媒介和載體，其對腫瘤組織的發(fā)展有著重要影響，相關(guān)研究表明外泌體具有抑制機體免疫功能并介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸、誘導(dǎo)腫瘤新生血管從而促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，但也有不少報道稱外泌體具有抗腫瘤作用，如直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡?；罴?xì)胞分泌的外泌體內(nèi)具有多種生物活性物質(zhì)，包括多種蛋白、miRNA以及脂類等，近幾年的多項臨床研究已揭示，這其中多種miRNA在GC的早期診斷中具有重要價值。利用外泌體的轉(zhuǎn)運功能以及生物學(xué)特性治療腫瘤，這將為靶向治療開拓一片廣闊領(lǐng)域。

4 微小RNA在GC診治中的研究進(jìn)展

研究表明，人類基因約75%被轉(zhuǎn)錄，然而僅僅約1.2%的RNA會被翻譯成蛋白質(zhì)，學(xué)術(shù)上將不被翻譯的RNA稱為非編碼RNA，包括lncRNA、內(nèi)源性短干擾RNA、微小RNA等[42]。其中微小RNA(microRNA，miRNA)是一類長度約為22個核苷酸的小分子單鏈RNA。近年來的研究表明， miRNA參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化以及凋亡，在GC的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移以及產(chǎn)生化療耐藥性等方面均起著重要作用。隨著對miRNA的深入研究，已證實部分異常表達(dá)的miRNA通過調(diào)控癌基因或抑癌基因的表達(dá)從而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，Hu等[43]對miR-103a-3p與GC 發(fā)生之間的關(guān)系進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與鄰近的非腫瘤組織相比，miR-103a-3在GC組織內(nèi)表達(dá)水平顯著增加并且改變了GC細(xì)胞的增殖，研究還證實基因ATF7是miR-103a-3p的直接作用靶標(biāo)，沉默ATF7與過表達(dá)的miR-103a-3均顯示出相似的細(xì)胞和分子效應(yīng)，即促進(jìn)GC細(xì)胞的增殖。Xu等[44]發(fā)現(xiàn)miR-543在GC患者中表達(dá)上調(diào)，研究揭示了斑點型POZ蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)的表達(dá)與miR-543表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，SPOP為miR-543的直接靶標(biāo)，miR-543通過靶向作用于SPOP而在GC患者腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲中發(fā)揮強大的腫瘤促進(jìn)作用。此外，多項研究已經(jīng)證實miRNA在GC、肝癌、乳腺癌、肺癌等多種腫瘤干細(xì)胞中異常表達(dá)，在調(diào)控腫瘤干細(xì)胞的自我更新能力、多向分化能力以及介導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和耐藥上均起著重要作用[45]。Shao等[46]對miRNA-19b/20a/92a在GC干細(xì)胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)的體外和體內(nèi)的作用及相關(guān)機制進(jìn)行分析，探索miRNA-19b/20a/92a與GCSCs增殖之間的關(guān)系，研究發(fā)現(xiàn)miRNA-19b/20a/92a通過在轉(zhuǎn)錄后水平上靶向E2F1和HIPK1并激活β-連環(huán)蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來促進(jìn)GCSC的自我更新。 miRNA-92a在GC樣本中的表達(dá)與患者的預(yù)后呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，研究者認(rèn)為miRNA-92a是預(yù)測GC預(yù)后的獨立因子和指標(biāo)。Wang等[47]對常見的47種異常表達(dá)的miRNA在GC診療中的臨床意義進(jìn)行系統(tǒng)分析，證實部分miRNA可以作為GC早期診斷和預(yù)測預(yù)后或評價治療反應(yīng)的生物標(biāo)志物。

miRNA在GC發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制一直是臨床研究的熱門領(lǐng)域，Zhang等[48]發(fā)現(xiàn)組蛋白去甲基化酶JMJD2B在GC發(fā)生中起著致癌作用，而microRNA通過與mRNA的3′UTR結(jié)合來抑制基因表達(dá)從而起著基因調(diào)節(jié)劑的作用。研究發(fā)現(xiàn)miR-491-5p通過直接靶向GC中的JMJD2B3′UTR來抑制細(xì)胞增殖、侵襲和遷移。與鄰近正常組織相比，GC組織中miR-491-5p表達(dá)降低，與健康個體相比，GC患者血清中miR-491-5p表達(dá)較低(P<0.0001)，研究表明miR-491-5p可以作為GC腫瘤抑制劑。Zhou等[49]發(fā)現(xiàn)GC表達(dá)上調(diào)的基因POLR2L、POLR2C、APRT和LMAN2與miR-604相互作用，致使miR-604在耐藥GC中具有低表達(dá)，研究認(rèn)為miR-604可能成為GC耐藥診斷的新指標(biāo)。近兩年來臨床上報道了許多miRNA在GC發(fā)展中的作用及其靶標(biāo)，部分列舉如下見表1。

表1 miRNA在GC中的作用及機制

Table 1. The Roles and Mechanism of miRNA in Gastric Cancer

miRNAExpression in GCTargetsRoles in GCmiR-545[50]downEMS1Inhibit the growth of GC cellsmiR-543[44]downSpeckle-type POZ proteinInhibit GC cells migration and invasionmiRNA-19b/20a/92a[46]upE2F1和HIPK1Facilitate the self-renewal of GCSCsmiRNA-21[51]upPTEN/Akt signal passagePromote the growth of GC cellsmiRNA-885-3p[52]upCDK4Promote GC cells migration and metastasismiR-584-3p[53]upMMP-14 promoterInhibit the progression of GCmiR-27a[54]upSFRP1Promote GC cells proliferation, migration and invasionmiR-1269a[55]upZNF70Promote apoptosis of GC cells

miRNA在基因功能調(diào)節(jié)上發(fā)揮著重要作用，它幾乎全程參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲以及轉(zhuǎn)移，也在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞及腫瘤干細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及轉(zhuǎn)移上起著重要作用，研究表明部分miRNA的異常表達(dá)與腫瘤組織的狀態(tài)密切相關(guān)，部分miRNA可以作為GC早期診斷的生物標(biāo)志物，具有較高的診斷準(zhǔn)確性。此外miRNA通過作用于相應(yīng)的靶標(biāo)而調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長、增殖，近幾年不少miRNA以及相應(yīng)的靶標(biāo)被研究者們發(fā)現(xiàn)，利用這一特性而實現(xiàn)靶向治療前景廣闊。

5 總 結(jié)

隨著精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，液態(tài)活檢在GC診療中的應(yīng)用越來越受到重視，CTC、ctDNA、miRNA以及外泌體均來源于腫瘤灶，與腫瘤組織的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。液態(tài)活檢在實現(xiàn)GC的早期診斷、療效監(jiān)測、預(yù)后評估以及靶向治療上均顯示出獨特的應(yīng)用價值。與傳統(tǒng)組織穿刺活檢相比較，液態(tài)活檢不僅僅是微創(chuàng)、無風(fēng)險，更重要的是，液態(tài)活檢能在不同的時段檢測而實現(xiàn)動態(tài)監(jiān)測、能克服腫瘤異質(zhì)性，從而實現(xiàn)真正意義上的個體化治療。此外利用外泌體的形成、轉(zhuǎn)移機制以及miRNA的生物學(xué)特性，將藥物包埋于外泌體內(nèi)轉(zhuǎn)運至腫瘤細(xì)胞從而實現(xiàn)靶向治療的前景亦很可觀。

作者聲明：本文第一作者對于研究和撰寫的論文出現(xiàn)的不端行為承擔(dān)相應(yīng)責(zé)任；

利益沖突：本文全部作者均認(rèn)同文章無相關(guān)利益沖突；

學(xué)術(shù)不端：本文在初審、返修及出版前均通過中國知網(wǎng)(CNKI)科技期刊學(xué)術(shù)不端文獻(xiàn)檢測系統(tǒng)學(xué)術(shù)不端檢測；

同行評議：經(jīng)同行專家雙盲外審，達(dá)到刊發(fā)要求。