圖 雅,鄒 勇,馮明祥,徐 雨,伍 悅,楊和俊,陳 穎
(貴州省關(guān)嶺布依族苗族自治縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,貴州 關(guān)嶺 561300)
關(guān)嶺牛是國(guó)家級(jí)重點(diǎn)保護(hù)的78個(gè)地方畜禽品種和中國(guó)“五大名?!敝唬a(chǎn)肉率高、蛋白質(zhì)含量高、繁殖率高、脂肪含量低。安格斯牛體型低矮、結(jié)實(shí),體軀寬深,四肢短而直,全身肌肉豐滿,是典型的肉用牛品種。為壯大關(guān)嶺縣基礎(chǔ)母牛群,促進(jìn)牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展,我縣2018年7月從烏拉圭引進(jìn)5 000頭安格斯能繁母牛。血液原蟲病是牛最常見的寄生蟲病之一,常見的牛血液原蟲有附紅細(xì)胞體(Eperythrozoon)、泰勒蟲(Theileria)、巴貝斯蟲(Babesia)、伊氏錐蟲(Trypanosoma)等[1,2]。大多數(shù)血液原蟲通過吸血節(jié)肢動(dòng)物傳播,寄生于牛的血漿、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及紅細(xì)胞中,導(dǎo)致牛發(fā)生間歇熱、貧血、消瘦、黃疸、血紅蛋白尿、水腫及神經(jīng)癥狀,有的能夠造成牛的急性死亡。血液原蟲感染可嚴(yán)重阻障養(yǎng)牛產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展,因此開展血液原蟲病的流行病學(xué)調(diào)查,減少牛因原蟲病帶來的經(jīng)濟(jì)損失,對(duì)保障我縣養(yǎng)牛產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展至關(guān)重要。
1.1 材料
1.1.1試劑與儀器:BA210-T生物顯微鏡(麥克迪奧實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司)、玻片、吉姆薩染色試劑(Solarbio)、無菌采血管、染色缸等。
1.1.2檢測(cè)樣本采集:按照3%的比例從關(guān)嶺縣境內(nèi)關(guān)嶺牛規(guī)模場(chǎng)和新建安格斯牛場(chǎng)采集血液樣品并現(xiàn)場(chǎng)制作成單層紅細(xì)胞血推片。其中關(guān)嶺牛采血60頭,安格斯牛采血85頭。
2.1吉姆薩染色:血推片經(jīng)自然干燥后用甲醇溶液固定5 min,用10%吉姆薩染色,12~15 h后清水洗凈,晾干待檢。
2.2鏡檢和圖片采集:采用顯微鏡在1 000倍下觀察吉姆薩染色的血推片,并隨機(jī)采集5個(gè)不同視野的高清圖片。
2.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì):計(jì)數(shù)圖片上的紅細(xì)胞數(shù)和感染的紅細(xì)胞數(shù),做好標(biāo)記。將所有的數(shù)據(jù)登記到統(tǒng)計(jì)表中,最后得到每個(gè)本地牛規(guī)模場(chǎng)和安格斯牛場(chǎng)的血液原蟲感染率和感染強(qiáng)度數(shù)據(jù)。感染率(%)=感染樣品數(shù)/采集樣品總數(shù)×100%;感染強(qiáng)度(%)=感染樣品5個(gè)視野感染紅細(xì)胞數(shù)/感染樣品5個(gè)視野紅細(xì)胞總數(shù)×100%
3.1 血推片鏡檢結(jié)果見圖1、圖2、圖3。感染的蟲種通過分子生物學(xué)方法進(jìn)行鑒定。
圖1 未受感染的健康牛紅細(xì)胞
圖2 關(guān)嶺牛血液原蟲鏡檢結(jié)果
圖3 安格斯牛血液原蟲鏡檢結(jié)果
表1 關(guān)嶺牛血液原蟲感染統(tǒng)計(jì)
3.2 關(guān)嶺牛血液原蟲感染率和感染強(qiáng)度從表1可見,每個(gè)關(guān)嶺牛規(guī)模場(chǎng)均有血液原蟲感染,感染率最低為33.33%,最高為100%,平均感染率為63.33%;感染強(qiáng)度最小為1.45%,最大為31.87%,平均感染強(qiáng)度為8.92%,不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模場(chǎng)牛血液原蟲的感染率和感染強(qiáng)度差異較大。
3.3 安格斯牛血液原蟲感染率和感染強(qiáng)度從表2可見,花江鎮(zhèn)華云繁育場(chǎng)、永寧鎮(zhèn)云峰村繁育場(chǎng)、花江鎮(zhèn)中寨村繁育場(chǎng)的感染率(15.38%~44.44%)和感染強(qiáng)度(1.62%~3.14%)相對(duì)較低,而普利鄉(xiāng)李家田繁育場(chǎng)、新鋪鎮(zhèn)江龍村繁育場(chǎng)的感染率(72.22%)和感染強(qiáng)度(8.52%~22.20%)較高,平均感染率為47.06%,平均感染強(qiáng)度為7.55%。
表2 安格斯牛血液原蟲感染統(tǒng)計(jì)
4.1調(diào)查結(jié)果顯示,每個(gè)關(guān)嶺牛規(guī)模場(chǎng)和新建安格斯牛場(chǎng)牛均有不同程度的血液原蟲感染,表明血液原蟲是我縣牛常見寄生蟲;此外在采集血液樣品的過程中發(fā)現(xiàn)多數(shù)關(guān)嶺牛寄生有微小牛蜱,微小牛蜱起到了傳播媒介的作用;由于安格斯牛引進(jìn)國(guó)內(nèi)后在天津的繁育場(chǎng)養(yǎng)殖了4個(gè)月,雖然我縣新建的安格斯牛場(chǎng)經(jīng)過嚴(yán)格的消毒,檢測(cè)樣品也是在安格斯牛引進(jìn)到我縣的1周內(nèi)采集,但是無法判定安格斯牛所感染的血液原蟲是在原場(chǎng)地感染還是在引進(jìn)到國(guó)內(nèi)之后感染。
4.2控制血液原蟲感染可以從以下幾方面努力:(1)做好消滅蜱、疥螨等體內(nèi)外寄生蟲的工作,減少傳播媒介。(2)可以從圈舍的建設(shè)和飼養(yǎng)管理等方面著手,圈舍要建設(shè)在通風(fēng)良好的較高地段,可保持圈舍干燥,此外要勤打掃、勤消毒,糞便要及時(shí)處理。(3)在牛發(fā)生血液原蟲病時(shí)及時(shí)進(jìn)行藥物治療,目前常用且作用較好的藥物是貝尼爾(又名血蟲凈),可按照6 mg/kg體重給藥。