陳青連 雷小平 馮雅

摘 要 目的 ： 建立以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑的費(fèi)休法測(cè)定注射用前列地爾的水分。方法：以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）混合溶液為溶劑，分別采用直接加樣法和溶解轉(zhuǎn)移法比較方法的合理性。結(jié)果：以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)得的樣品水分為1.3%，RSD為10.0%；日間精密度良好，RSD為4.8%。 結(jié)論：本法用于注射用前列地爾的水分測(cè)定具有較好的準(zhǔn)確性和精密度。

關(guān)鍵詞 注射用前列地爾 費(fèi)休法 水分測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)：R972.4； R927.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1006-1533（2019）07-0071-03

Comparison of different methods for the moisture determination in prostaglandil for injection

CHEN Qinglian*， LEI Xiaoping， FENG Ya

（ Hangzhou Ausia Biological Technology Co.， Ltd.， Hangzhou 310018， China）

ABSTRACT Objective： To establish a Fischers method for the moisture determination in alprostadil for injection with formamide-methanol （1：1） as a solvent. Methods： The rationality of the method was compared between direct sample-adding method and dissolution transfer method. Results： Moisture content in the sample was 1.3% with RSD 10% by dissolution transfer method and its inter-day precision was good with RSD 4.8%. Conclusion： This method for the moisture determination in alprostadil for injection has good accuracy and precision.

KEY WORDS alprostadil injection； Fischers method； moisture determination

前列地爾（alprostadil）是一種療效確切的高生物活性血管擴(kuò)張藥，屬于天然前列腺素（PGE1）類(lèi)[1]，主要用于老年心血管疾病的治療，對(duì)冠心病、動(dòng)脈硬化、心肌梗死等疾病有一定的治療作用[2]。

費(fèi)休法是利用碘在吡啶和甲醇溶液中氧化二氧化硫時(shí)需要定量水分參加反應(yīng)的原理測(cè)定樣品中的水分含量，適用于在費(fèi)休試液中溶解且不與費(fèi)休試液發(fā)生生成水的化學(xué)反應(yīng)的藥物及制劑的水分測(cè)定。注射用前列地爾質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已收載于《中國(guó)藥典》2015年版二部[3]，其水分測(cè)定法為第一法費(fèi)休法下的容量滴定法[3]103-105。

測(cè)定樣品中的水分時(shí)，樣品必須完全溶解在卡爾·費(fèi)休試劑中。如果樣品未完全溶解，會(huì)形成乳濁液，導(dǎo)致部分水分無(wú)法進(jìn)行滴定反應(yīng)，測(cè)得的水分含量偏低[4]。

由于注射用前列地爾凍干粉針劑中添加賦形劑右旋糖酐40，不溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮等[3]170，故選擇一定比例的甲酰胺-甲醇作為助溶劑進(jìn)行水分測(cè)定[5]。

小規(guī)格凍干針劑水分測(cè)定一直以來(lái)是檢驗(yàn)人員難以處理的問(wèn)題，主要原因在于取樣難，由于每瓶裝量?jī)H為幾毫克，傳統(tǒng)方法均需取樣數(shù)瓶至數(shù)十瓶，在取樣過(guò)程中無(wú)法防止樣品急劇吸潮。同一樣品在不同實(shí)驗(yàn)室不同人員進(jìn)行測(cè)定時(shí)數(shù)值相差很大。當(dāng)規(guī)格小加之凍干真空壓塞，取樣更難，在破真空時(shí)由于大量空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)，樣品易吸潮并黏結(jié)于瓶壁，從而需要進(jìn)一步增加取樣瓶數(shù)和取樣時(shí)間。這樣所測(cè)得的樣品水分完全失真[6]。注射用前列地爾規(guī)格為100 mg，測(cè)定時(shí)平均裝量約為20 mg，存在裝量較小，且極易吸潮，采用直接加樣法測(cè)定水分難以得到準(zhǔn)確的結(jié)果，故考慮溶解轉(zhuǎn)移法進(jìn)行測(cè)定。

本研究選擇分別以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，分別采用直接加樣法和溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定水分。該方法測(cè)定注射用前列地爾水分未見(jiàn)報(bào)道，通過(guò)分析兩種方法測(cè)定結(jié)果的分析比較，為該品種建立更準(zhǔn)確的水分測(cè)定方法提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

V30水分滴定儀（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），BS210S電子天平（賽多利斯（上海）貿(mào)易有限公司）。

1.1.2 試藥

注射用前列地爾（杭州澳亞生物技術(shù)有限公司自制，批號(hào)17012023，規(guī)格：100 mg）；費(fèi)休試液（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；無(wú)水甲醇、甲酰胺（分析純，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 直接加樣法

取注射用前列地爾5瓶，去除鋁蓋后，將其搗碎，采用減量法，精密稱(chēng)定其重量，倒入滴定杯中，分別以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）混合溶液為溶劑，用費(fèi)休試液滴定至終點(diǎn)，各重復(fù)測(cè)定10次。

1.2.2 溶解轉(zhuǎn)移法

2 結(jié)果

2.1 甲酰胺-甲醇比例選擇

取注射用前列地爾1瓶，按1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2和9∶1比例，用移液管分別加入甲酰胺、甲醇試劑，搖勻，觀(guān)察溶液是否澄清。結(jié)果表明，當(dāng)甲酰胺-甲醇的比例達(dá)到5∶5及以上時(shí)，溶液為澄清，故選擇甲酰胺-甲醇1∶1為溶劑進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

2.2 樣品水分測(cè)定

直接加樣法和溶解轉(zhuǎn)移法水分測(cè)定數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

分別對(duì)直接加樣法和溶解轉(zhuǎn)移法溶解轉(zhuǎn)移法、甲醇溶劑法和甲酰胺-甲醇（1∶1）溶劑法的水分?jǐn)?shù)據(jù)采用Minitab軟件進(jìn)行了雙樣本t值檢驗(yàn)分析[7-8]（表2）。采用直接加樣法，用甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）兩種溶劑測(cè)定的水分差值為0.365 9%，t值為-3.24，顯著性P值為0.005；采用溶解轉(zhuǎn)移法，用甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）兩種溶劑測(cè)定的水分差值為0.234 2%，t值為-4.26，顯著性P值為0.001。以甲醇為溶劑，采用直接加樣法和溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定的水分差值為0.483 1%，t值為6.47，顯著性P值為0.000；以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，采用直接加樣法和溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定的水分差值為0.614 8%，t值為6.08，顯著性P值為0.000（表2）。使用相同加樣方法、采用不同溶劑檢驗(yàn)或使用相同溶劑、采用不同加樣方法，其兩組檢測(cè)結(jié)果顯著性P值均小于0.01，說(shuō)明使用不同溶劑檢測(cè)或不同加樣方法，測(cè)定結(jié)果之間均有顯著性差異。

2.3 數(shù)據(jù)分析

通過(guò)上述數(shù)據(jù)可知，甲醇溶劑法測(cè)得注射用前列地爾的水分小于甲酰胺-甲醇溶劑法，認(rèn)為是樣品未完全溶解，導(dǎo)致水分未完全釋放至溶液中，無(wú)法進(jìn)行滴定反應(yīng)，使測(cè)得結(jié)果偏低。直接加樣法測(cè)得的水分大于溶解轉(zhuǎn)移法，判斷樣品具有引濕性，認(rèn)為是去塞后，樣品與空氣直接接觸，吸收了空氣中的水分所引起的差異，且溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定的水分差異較小。綜上所述，選擇以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑采用溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定為宜。為了進(jìn)一步證實(shí)該方法的合理性，考察該方法的日間精密度。

2.4 日間精密度實(shí)驗(yàn)

以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，按溶解轉(zhuǎn)移法，取注射用前列地爾每天5瓶測(cè)定水分，連續(xù)5 d，所測(cè)定的水分含量分別為1.338 0%、1.228 3%、1.197 3%、1.191 7%、1.228 9%，平均值為1.2%，RSD為4.8%。表明不同時(shí)間按本法測(cè)定注射用前列地爾水分含量的重復(fù)性和日間精密度良好。

3 討論

卡爾·費(fèi)休容量法最常用的滴定溶劑是甲醇，而注射用前列地爾不溶于甲醇，樣品未完全溶解，水分沒(méi)有完全參與反應(yīng)，測(cè)得的水分含量偏低，且溶液中的不溶顆粒，在攪拌過(guò)程中更易對(duì)儀器電極帶來(lái)磨損，故選擇甲酰胺為助溶劑，與甲醇按1∶1混合作為溶劑。注射用前列地爾存在裝量較小，且極易吸潮，采用直接加樣法測(cè)定水分難以得到準(zhǔn)確的結(jié)果，故考慮溶解轉(zhuǎn)移法進(jìn)行測(cè)定。為確定本法的合理性，進(jìn)行了日間精密度實(shí)驗(yàn)，結(jié)果中間精密度良好。以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定注射用前列地爾的水分具有較好的準(zhǔn)確性，且精密度良好，且更易于操作，利于水分測(cè)定。用卡爾·費(fèi)休法測(cè)定樣品中的水分時(shí)，必需注意環(huán)境的溫濕度，濕度過(guò)大對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響極大，使檢測(cè)結(jié)果偏大，一般溫度維持在25 ℃左右，相對(duì)濕度控制在50%以下比較適宜。

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