凌 真，丁蘇蘇，劉 慧，姚晶晶，朱慶麗，王 威

（揚(yáng)州市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，江蘇 揚(yáng)州 225009）

氧化型染料是目前廣泛使用的染發(fā)劑原料[1]，主要成分為苯二胺類，苯二胺類物質(zhì)在氧化乳的作用下氧化為染料中間體，該中間體在偶合劑（苯二酚類）的作用下發(fā)生偶合反應(yīng)后產(chǎn)生顏色[2]。苯二胺類物質(zhì)在化妝品中屬于嚴(yán)格禁限用物質(zhì)，長期使用染發(fā)劑或職業(yè)接觸染發(fā)劑的人群，其淋巴瘤、白血病、膀胱癌和乳腺癌的發(fā)病率增加[3-6]。鑒于染發(fā)劑存在的各種安全問題及數(shù)目龐大的接觸者和使用者，加強(qiáng)對(duì)染發(fā)劑的衛(wèi)生管理和日常監(jiān)督非常必要。

近5年，為了保障轄區(qū)內(nèi)染發(fā)劑產(chǎn)品使用安全，揚(yáng)州市食品藥品監(jiān)督管理局連續(xù)開展了4次染發(fā)劑專項(xiàng)監(jiān)督抽檢工作，揚(yáng)州市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心作為承檢單位，共檢測染發(fā)劑85批，檢驗(yàn)項(xiàng)目為氧化型染發(fā)劑中的染料。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 樣品、試劑與儀器

抽驗(yàn)樣品購買于縣市商場、理發(fā)店和美容店，均為氧化型染發(fā)劑。

7種染料對(duì)照品：對(duì)苯二胺、氫醌、間氨基苯酚、鄰苯二胺、對(duì)氨基苯酚、甲苯2，5-二胺硫酸鹽和間苯二酚，規(guī)格均為0.25 g，德國Dr.E GmbH公司；三乙醇胺，色譜純，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈，色譜純，迪馬科技；乙醇、磷酸和亞硫酸鈉，優(yōu)級(jí)純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

Agilent 1260高效液相色譜儀和Agilent G1315C DAD檢測器，美國安捷倫公司； pHS-3C精密pH計(jì)，上海雷磁； KH-400KDB型高功率數(shù)控超聲波清洗器，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及限值

抽檢樣品依據(jù)相應(yīng)的化妝品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)， 2015年10月之前生產(chǎn)的樣品參照《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007版）（以下簡稱《規(guī)范》2007版）[7]中“氧化型染發(fā)劑”的檢測方法進(jìn)行檢驗(yàn)；其后生產(chǎn)的樣品參照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）（以下簡稱《規(guī)范》2015版）[8]中“染發(fā)劑檢驗(yàn)方法”的進(jìn)行檢驗(yàn)，共檢測7種禁限用染料成分，分別為對(duì)苯二胺、氫醌、間氨基苯酚、鄰苯二胺、對(duì)氨基苯酚、甲苯2，5-二胺硫酸鹽和間苯二酚，各染料相應(yīng)限值見表1。

表1 檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中禁限用染料成分及限值Tab.1 Limits of compounds in the two cosmetic standards for hair dyes

1.2.2 色譜條件

色譜柱為Shiseido Cl8（CAPCELL PAK 250 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為乙腈-三乙醇胺的磷酸緩沖溶液（調(diào)節(jié)pH為7.7）（5∶95），檢測波長為280 nm，柱溫為25 ℃，進(jìn)樣體積為5 μL，流速為1.0 mL/min。

1.2.3 樣品溶液的制備

取樣品約0.5 g 置于已加入1.0 mL 1%亞硫酸鈉溶液的25 mL 具塞比色管中，加50%的乙醇溶液至25 mL，超聲提取15 min，離心，經(jīng)0.45 μm 濾膜過濾，濾液作為樣品溶液。

忽然，腦袋里冒出一個(gè)想法—把它帶回教室！這個(gè)想法是如此強(qiáng)烈，我不禁驚訝起來，一向“冷漠”的自己，竟然關(guān)心起一只小麻雀來。

1.2.4 樣品測定

精密稱定7種對(duì)照品，用95%的乙醇溶液溶解稀釋成混合對(duì)照品溶液（色譜圖見圖1），再逐步稀釋成系列對(duì)照工作溶液，取各對(duì)照工作溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜峰面積，繪制校準(zhǔn)曲線。

圖1中，1：對(duì)苯二胺；2：對(duì)氨基苯酚；3：氫醌；4：甲苯2，5-二胺硫酸鹽；5：間氨基苯酚；6：鄰苯二胺；7：間苯二酚。

取樣品溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜峰面積，根據(jù)其保留時(shí)間及紫外吸收光譜圖定性，峰面積代入校準(zhǔn)曲線定量。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測要點(diǎn)

2.1.1 取樣

氧化型染發(fā)劑大多包含A、B兩個(gè)劑型，通常A劑是染料，B劑是氧化劑，在樣品檢測時(shí)參照產(chǎn)品說明書對(duì)A劑進(jìn)行檢測即可，減少檢測工作量。對(duì)于舉報(bào)樣品和高風(fēng)險(xiǎn)樣品，需要同時(shí)檢測A劑和B劑，防止漏檢。

取樣時(shí)應(yīng)取未拆封樣品，打開封口后，棄去部分前段樣品后再進(jìn)行取樣稱量，動(dòng)作要迅速，稱取樣品的比色管中需提前加入抗氧化劑（亞硫酸鈉）以減緩樣品中染料的氧化。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品制備

溫度、光照和操作時(shí)間等均會(huì)影響產(chǎn)品檢測的準(zhǔn)確性。

在檢測中，需要先將染料標(biāo)準(zhǔn)品和樣品配制成溶液，染料在溶液中很快發(fā)生降解，環(huán)境溫度升高，加快降解，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品檢測的準(zhǔn)確性均會(huì)產(chǎn)生極為嚴(yán)重的影響。因此，標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液均需臨用新制，樣品超聲提取時(shí)應(yīng)在超聲儀中加入冰塊，防止樣品過熱降解，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度和實(shí)驗(yàn)時(shí)間。光照也會(huì)對(duì)染料檢測產(chǎn)生影響，應(yīng)注意避光，使用棕色容量瓶配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液。

圖1 7種染料溶液的液相色譜圖Fig.1 The HPLC chromatogram of dyes

2.1.3 成分確認(rèn)

通過高效液相色譜儀和二極管陣列檢測器檢測樣品時(shí)，需對(duì)每個(gè)染料的色譜保留時(shí)間和紫外光譜圖予以確認(rèn)。染發(fā)劑成分復(fù)雜，?；煊泄I(yè)生產(chǎn)中引入的雜質(zhì)，還有染料降解的中間產(chǎn)物及除檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中收錄的染料成分以外的苯二胺類物質(zhì)，這些物質(zhì)往往與被檢染料成分結(jié)構(gòu)相似、保留時(shí)間接近，應(yīng)通過紫外光譜確認(rèn)后予以區(qū)分，以免影響樣品中染料檢測的準(zhǔn)確性。

2.1.4 其他

從樣品的物態(tài)和顏色來看，不少樣品的顏色不均勻，部分可能因?yàn)榘b不密閉出現(xiàn)氧化的情況，還有些產(chǎn)品出現(xiàn)水油分離的情況。因?yàn)槿景l(fā)劑中的染料成分易被氧化，所以提高包裝質(zhì)量和密閉性也是提升染發(fā)劑質(zhì)量的重要手段。

2.2 實(shí)際樣品測定

共對(duì)85批樣品中的禁限用染料成分進(jìn)行檢測，檢測情況見表2。由測定結(jié)果可知， 2013-2014年度檢出1批不合格樣品，不合格項(xiàng)目為檢出“鄰苯二胺”（檢測值為0.43%，標(biāo)準(zhǔn)限值為不得檢出）。

表2 2013-2018年氧化型染發(fā)劑抽檢情況Tab.2 Results of tests of oxidative hair dyes from 2013 to 2018

3 結(jié)論

2013-2018年揚(yáng)州地區(qū)市售氧化型染發(fā)劑監(jiān)督檢驗(yàn)結(jié)果總體尚好，但鑒于染發(fā)劑使用的高風(fēng)險(xiǎn)性，加強(qiáng)對(duì)染發(fā)劑的衛(wèi)生管理和日常監(jiān)督仍很必要。