陳秀雯 董 潔 凌晨伽 李 琰 寧文吉

（上海市閔行區(qū)疾病預(yù)防控制中心理化科 上海 201110）

1 前言

熒光增白劑(FWAs)是一種復(fù)雜的有機化合物，能激發(fā)入射光線產(chǎn)生熒光，使所染物質(zhì)達到增白的效果，廣泛應(yīng)用在紡織、造紙等方面。熒光增白劑可分為二苯乙烯類、香豆素類、苯并惡唑類、萘酰亞胺類等[1]。在造紙工業(yè)中，80%以上的FWAs為雙三嗪氨基二苯乙烯型熒光增白劑(DSD-FWAs)。11種DSD-FWAs分為二磺酸型(2S)、四磺酸型(4S)和六磺酸型(6S)3 種類型，其中，C.I.85、C.I.71、C.I.113、C.I.90 和 FWA 5bm 為 2S 型，C.I.220、C.I.24、C.I.210 為4S 型，C.I.264、C.I.353、C.I.357 為 6S 型[2]。熒光增白劑一旦與體內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合，就很難通過正常代謝排出體外。同時，熒光劑會極大削弱免疫力及傷口愈合能力，一旦在人體中積蓄過量，會對肝臟等重要器官造成巨大危害，還會誘發(fā)細(xì)胞癌變[3]。

根據(jù)GB 2760—2014《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》及GB 9685—2008《食品容器、包裝材料用添加劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》等相關(guān)國家食品安全管理規(guī)定，熒光增白劑嚴(yán)禁在食品及食品相關(guān)產(chǎn)品加工中使用。我國2008年進一步規(guī)定食品包裝紙中僅允許添加DSDFWAs中的C.I.220，其最大使用量為0.30%，禁止其他熒光增白劑的添加[4]。GB/T 5009.78—2003《食品包裝用原紙衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》、GB 9685—2016《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定熒光增白劑不得檢出。

我國紙質(zhì)食品包裝材料的熒光增白劑問題近年來引起公眾關(guān)注，某些紙袋、紙碗、紙杯等先后被曝光熒光增白劑超標(biāo)，給食品包裝材料的安全使用帶來較大隱患。蔣定國[2]等從福州、廈門的市場采集食品用紙樣品，樣品中DSD-FWAs的檢出率為41.4%，檢出的 DSD-FWAs總量為 0.20～2027 mg/kg；4類樣品中紙袋和方便面紙碗的問題較大，11種DSD-FWAs均有檢出，同一份樣品存在檢出多種DSD-FWAs的現(xiàn)象。張利峰等[5]從河南各地市的市場、超市等采集紙質(zhì)食品包裝用品，結(jié)果檢出8種熒光增白劑，其中，C.I.85的檢出率和平均值最高，分別為12.9%和6.65 mg/kg；樣品檢出率為12.9%(15/116)，平均含量為13.2 mg/kg。這些研究結(jié)論都表明市場上食品包裝用紙存在違規(guī)添加使用熒光增白劑的情況，因此，本研究對上海市閔行區(qū)市售食品接觸紙包裝中11種熒光增白劑的檢測與調(diào)研十分必要。

國內(nèi)外關(guān)于熒光增白劑的檢測方法主要有紫外燈照射觀測法[6]、熒光分光光度法[7,8]、高效液相色譜法(HPLC)[9]和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)[10]。本研究擬利用上海市閔行區(qū)疾病預(yù)防控制中心現(xiàn)有的高效液相色譜儀等儀器設(shè)備，根據(jù)2016年國家食品污染和有害因素風(fēng)險監(jiān)測工作手冊中的“食品包裝材料有害物監(jiān)測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序”同時檢測11種熒光增白劑，統(tǒng)計分析閔行地區(qū)銷售的食品接觸用紙中11種熒光增白劑的超標(biāo)污染情況，為食品接觸用紙的安全質(zhì)量評價提供依據(jù)，為保障人們的飲食健康提供參考依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 材料

2.1.1 樣品采購及預(yù)處理

在上海市閔行區(qū)各鎮(zhèn)和街道的大型連鎖商場、小型超市、農(nóng)貿(mào)市場隨機抽取100份各品種樣品，包括紙杯、紙袋、紙碗等紙質(zhì)食品包裝材料。

取紙質(zhì)食品包裝材料樣品展開，先用剪刀剪成紙屑。將紙屑全部轉(zhuǎn)移至高速粉碎機中，以1000r/min轉(zhuǎn)速粉碎3次，每次約15 s，待紙屑粉碎成纖維狀后混勻。用干凈的聚乙烯塑料袋盛放纖維狀紙屑，并及時填寫好樣品編號。樣品在室溫下置于黑暗處保存，備用。

2.1.2 試劑

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) C.I.85、C.I.71、C.I.113、C.I.90 和 FWA 5bm 為 2S 型，C.I.220、C.I.24、C.I.210 為 4S 型，C.I.264、C.I.353、C.I.357 為 6S 型，濃度均為 200 μg/mL，購自福州綠川生物科技有限公司。

2.2 方法

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線配制

在實驗室避光條件下，分別準(zhǔn)確吸取50 μL 11種200 μg/mL DSD-FWAs標(biāo)準(zhǔn)溶液至10 mL棕色容量瓶中，并用40%乙腈水溶液稀釋至刻度，制得濃度約為1 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，4℃左右于黑暗處保存。用1 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和40%乙腈水溶液配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液系列：1 mL、5 mL、25 mL、50 mL、100 mL、200 mL。所有的標(biāo)準(zhǔn)溶液均現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.2.2 儀器條件

色譜柱：Symmetry C18 色譜柱（250 mm×4.6 mm,5 μm），柱溫：35℃；流動相 A：乙腈/甲醇（2∶3，V/V），流動相 B：含 25mmol TBA 的甲醇-水（5∶95，V/V ），使用三乙胺將流動相pH調(diào)整至pH=8.0，流速：1mL/min；熒光檢測器：Ex：350 nm，Em：430 nm， 分析時間：25.0 min，進樣體積：20.0 μL。

2.2.3 樣品前處理

對于紙巾等樣品，稱取0.5 g粉碎均勻的樣品至50 mL聚丙烯塑料離心管中；在照度小于20 lx的環(huán)境中進行實驗。加入25 mL 40%乙腈水，50℃水浴下超聲提取35 min。提取結(jié)束后，以5000 r/min的轉(zhuǎn)速離心5 min。轉(zhuǎn)移上清液至50 mL具塞刻度玻璃試管中，再于紙屑中分2次加入12.5 mL 40%乙腈水，同上述提取步驟提取10 min，重復(fù)2次。合并前3次的上清液，加入40%乙腈水定容至50 mL，充分漩渦混勻后，于黑暗處保存。對于紙碗、紙袋等樣品，改用pH為11.5的40%乙腈水提取。提取結(jié)束后，將提取液用鹽酸∶水=1∶1（V/V）調(diào)節(jié)至 pH 為 8.0。

2.2.4 樣品測定

分別吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和樣品溶液10 μL進樣。根據(jù)保留時間定性，外標(biāo)峰面積法定量。若樣品濃度超過標(biāo)準(zhǔn)溶液線性范圍，則應(yīng)稀釋后再進行測定，測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

3 結(jié)果與討論

3.1 方法學(xué)驗證

3.1.1 線性

分別配制濃度為 1 ng/mL、5 ng/mL、25 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL 的 11種熒光增白劑混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液并上機測定，考察熒光值(y)和標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(x)的線性相關(guān)性。結(jié)果表明，在1～200ng/mL濃度范圍內(nèi)，如圖1中7個濃度點，11種熒光增白劑的熒光值與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度均呈良好的線性關(guān)系，以C.I.220為例，線性方程為y=0.993x-0.451，相關(guān)系數(shù)r=0.99996。

圖1 熒光增白劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖（C.I.220）

3.1.2 檢出限

圖2所示為1 ng/mL的混合溶液中11中熒光增白劑同時檢出的圖譜，X軸為時間（min），Y軸為熒光強度，圖中11個檢出峰依次為C.I.220、C.I.24、C.I.210、C.I.85、C.I.113、C.I.264、FWA5bm、C.I.353、C.I.357、C.I.90、C.I.71，保留時間標(biāo)示如圖。若按此檢出濃度計算該方法同時檢出11中熒光增白劑的定量限，依據(jù)測定操作程序中定容體積為50 mL，假定稱樣量為0.5 g，可得本方法的定量限(LOQ)為0.10 mg/kg。

圖2 熒光增白劑的檢出限

3.1.3 準(zhǔn)確度和精密度

選取空白樣品進行加標(biāo)回收試驗，分別加標(biāo)0.5 mg/kg和2.5 mg/kg的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個添加濃度進行6次重復(fù)實驗，并計算方法的加標(biāo)回收率和精密度，具體結(jié)果見表1。結(jié)果顯示11種熒光增白劑回收率范圍為98.00%～104.00%，RSD范圍為4.19%～6.50%，說明該方法準(zhǔn)確度和精密度滿足測定要求GB 4806.8—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品接觸用紙和紙板材料及制品》。

表1 11種熒光增白劑的平均加標(biāo)回收率以及精密度

3.2 實際樣品分析

利用本樣品前處理方法以及高效液相方法調(diào)查了上海市閔行區(qū)100份食品接觸用紙樣品中熒光增白劑的含量，發(fā)現(xiàn)11種熒光增白劑均有檢出。由表2可看出，C.I.220和C.I.113這2種熒光增白劑的檢出率最高。我國2008年規(guī)定食品包裝紙中僅允許添加DSD-FWAs中的C.I.220，因此，一部分食品接觸用紙在制作過程中違規(guī)添加了其他熒光增白劑或使用被熒光增白劑污染的原料。由表3可得，快餐小吃的包裝紙幾乎都能檢出熒光增白劑，這些包裝紙大多從市場小店采購且大多無廠家和商標(biāo)信息。而從正規(guī)超市采購來的廚房紙巾和牛奶盒外包裝無檢出，可見生產(chǎn)信息詳細(xì)的正規(guī)渠道購買的食品接觸紙包裝值得信賴，是經(jīng)過國家相關(guān)部門檢測認(rèn)證合格的產(chǎn)品。

表2 市售食品接觸紙包裝中11種熒光增白劑的調(diào)查結(jié)果

表3 不同品種市售食品接觸紙包裝中11種熒光增白劑的調(diào)查結(jié)果

4 結(jié)論

在本研究中，調(diào)研的閔行區(qū)食品包裝用紙中存在違規(guī)添加使用熒光增白劑的情況，為減少其對人民健康的影響和危害，有關(guān)部門應(yīng)加強監(jiān)督管理。尤其是無商標(biāo)、無生產(chǎn)廠家、無產(chǎn)地等詳細(xì)生產(chǎn)信息的食品接觸包裝紙檢出率高且檢出值較高，建議閔行區(qū)居民選擇正規(guī)超市或商場購買生產(chǎn)信息詳實可查的食品接觸用紙或食品，以保障居民自身健康。