賈雨晴 夏杰 張文軒 聞剛 馮波 連旭 薛文杰 吳松

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所，活性物質(zhì)發(fā)現(xiàn)與適藥化研究北京市重點(diǎn)實驗室，北京 100050)

細(xì)菌脂蛋白是一種脂質(zhì)修飾的膜蛋白，是革蘭陰性菌外膜和革蘭陽性菌細(xì)胞被膜的重要組成成分[1]。脂蛋白在細(xì)菌的重要生理過程中如細(xì)胞膜的合成，營養(yǎng)攝取，細(xì)胞壁代謝，細(xì)胞分裂，跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，孢子形成，抗生素耐藥性，物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)(如ABC轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng))以及蛋白質(zhì)的胞質(zhì)外折疊[2]發(fā)揮關(guān)鍵作用，對細(xì)菌的生存至關(guān)重要。對于病原菌來說，脂蛋白既是細(xì)菌在復(fù)雜環(huán)境中生存的基礎(chǔ)，也常常是其致病不可或缺的毒力因子，直接參與病原菌的多種致病機(jī)制，如細(xì)菌定殖、入侵、逃避宿主防御和影響宿主免疫系統(tǒng)等[3-5]。脂蛋白基因普遍分布在細(xì)菌中，占細(xì)菌總基因組的1%～3%[6]。盡管細(xì)菌脂蛋白具有不同的來源、結(jié)構(gòu)和功能，但均具有Leu-(Ala/Ser)-(Gly/Ala)-Cys組成的稱為“l(fā)ipobox”的共識序列[7]。脂蛋白以前體形式在細(xì)胞質(zhì)中合成，通過Sec或Tat分泌系統(tǒng)首先被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)膜的外表面上，然后進(jìn)行脂蛋白的生物合成[8-9]。脂蛋白的經(jīng)典生物合成途徑包括以下步驟(圖1)：首先，二酰甘油基轉(zhuǎn)移酶(Lgt)識別原前脂蛋白保守序列中的半胱氨酸Cys，將磷脂酰甘油醇(PG)的二酰甘油基轉(zhuǎn)移至半胱氨酸的巰基上，形成二酰甘油基修飾的前脂蛋白。然后，脂蛋白信號肽酶Ⅱ(LspA)切除二酰甘油基-前脂蛋白的信號肽形成脂蛋白。最后，脂蛋白N-酰基轉(zhuǎn)移酶(Lnt)催化磷脂酰乙醇胺(PE)的?；溵D(zhuǎn)移到半胱氨酸的N末端，產(chǎn)生一個成熟的三酰化脂蛋白[10]。其中Lgt和LspA存在于所有革蘭陰性和革蘭陽性細(xì)菌中，而Lnt僅存在于革蘭陰性菌和高GC(鳥嘌呤、胞嘧啶)含量的革蘭陽性菌中。在低GC含量的革蘭陽性菌中，脂蛋白多以二酰甘油基脂蛋白的形式存在，但仍有一些細(xì)菌中存在非經(jīng)典生物合成途徑，如枯草桿菌和金黃色葡萄球菌中，脂蛋白以三?；鞍仔问酱嬖赱11-12]。正確的脂蛋白修飾以及該過程中所涉及到的酶對革蘭陰性菌和一些高GC含量的革蘭陽性菌的活力至關(guān)重要。了解這些酶的催化機(jī)制，結(jié)構(gòu)和功能有助于發(fā)現(xiàn)針對這一重要途徑的新型抗生素。因此，本文中主要介紹了這3種酶的生物學(xué)功能和晶體結(jié)構(gòu)。

1 前脂蛋白二酰甘油基轉(zhuǎn)移酶Lgt

Lgt催化脂蛋白產(chǎn)生路徑的第一步反應(yīng)，能夠識別前脂蛋白“l(fā)ipobox”的共識序列[LVI]-3[ASTVI][GAS]C+1，從而將來自磷脂酰甘油醇(PG)的二酰甘油基轉(zhuǎn)移至lipobox序列中半胱氨酸殘基的巰基上[13]，形成二酰甘油基修飾的前脂蛋白。Lgt位于細(xì)胞內(nèi)膜中，是由lgt基因編碼形成的含有291個氨基酸(33kDa)的膜蛋白[14]，其最適反應(yīng)溫度為37℃，最適反應(yīng)pH為7.8[15]。大多數(shù)細(xì)菌含有一個單一的lgt基因，只有少數(shù)細(xì)菌有兩個或兩個以上的lgt同源基因[16]。Lgt對底物的識別具有特異性[17]，帶負(fù)電荷的磷脂酰甘油醇(PG)是最有效的二酰甘油基供體；另外兩種帶負(fù)電荷的磷脂酸(PA)和磷脂酰絲氨酸(PS)可作為低效的供體；中性磷脂，磷脂酰乙醇胺(PE)，磷脂酰膽堿(PC)和二酰甘油基(DAG不能作為Lgt的底物)。最近對保守氨基酸殘基的分析，表明了Lgt特征序列的存在，并且該序列中的兩個氨基酸殘基(Asn146和Gly154)對于Lgt的功能是必不可少的[18]。另外，氨基酸殘基His103-Gly108以及Tyr26和Tyr235對于Lgt的功能也很重要[19]。Lgt功能的缺失，會導(dǎo)致革蘭陰性菌死亡，可能是由外膜脂蛋白的基本特性決定的[20]，如Yfio外膜蛋白是大腸埃希菌存活的必要組分。Lgt對于所有革蘭陽性細(xì)菌的體外生長是非必要的，可能是某些前體脂蛋白具有與必需脂蛋白相同的功能[21-22]，例如PrsA脂蛋白是枯草芽孢桿菌中的必需蛋白質(zhì)，但該生物體的lgt突變體仍然能夠存活。但是Lgt功能的缺失會導(dǎo)致革蘭陽性菌活力和致病能力的下降，例如枯草芽孢桿菌lgt突變體在細(xì)胞色素caa3活性[23]，蛋白質(zhì)分泌[22]，孢子形成[24]中表現(xiàn)出可與特定脂蛋白功能受損相關(guān)的缺陷。因此，Lgt是研發(fā)新一代廣譜型抗生素的潛在靶標(biāo)。2016年，Zhang課題組[10]解析出大腸埃希菌Lgt的蛋白結(jié)構(gòu)(圖2)，并確定了具有催化作用的氨基酸殘基。Lgt由7個跨膜螺旋(TM)組成，其N末端朝向細(xì)胞周質(zhì)，C末端朝向細(xì)胞質(zhì)，構(gòu)成了蛋白結(jié)構(gòu)的主體，此外，還有6個β-片層和4個α短螺旋。在跨膜螺旋TM4和TM5之間，4個扭曲的β片層(β1、β2、β4和β6)和2個α短螺旋(α3和α4)形成1個具有球形形狀的周質(zhì)頭部結(jié)構(gòu)域。此外，Lgt有兩條兩親性臂，一條是由跨膜螺旋TM1的N-末端β片層(β2和β3)形成的“臂-1”，一條位于TM2和TM3之間，由α1和η2(20個氨基酸殘基組成的短鏈)形成的“臂2”。跨膜螺旋TM2、TM3和“臂2”形成了一個小的跨膜結(jié)構(gòu)域，其余的跨膜螺旋則形成了主要的跨膜結(jié)構(gòu)域。對于Lgt功能很重要的氨基酸殘基His103-Gly108位于跨膜螺旋TM3的N-末端。在兩個跨膜結(jié)構(gòu)域之間有一個中心腔，該腔內(nèi)有兩個底物結(jié)合位點(diǎn)，第一個結(jié)合位點(diǎn)是Glu151，第二個結(jié)合位點(diǎn)是Arg143，該腔的底部(細(xì)胞質(zhì)側(cè))是完全疏水的，而上部(細(xì)胞周質(zhì)側(cè))由更多極性氨基酸殘基組成，與底物PG的分布取向一致。此外該中心腔有兩個(正面和側(cè)面)裂隙作為底物PG的潛在入口和釋放離去基團(tuán)的周質(zhì)出口。具有催化活性的氨基酸殘基Arg143和Arg239也位于該中心腔中，其對二酰甘油基的轉(zhuǎn)移至關(guān)重要。前脂蛋白的巰基可能對磷脂酰甘油醇的羰基進(jìn)行親核進(jìn)攻，其中Lgt提供催化殘基Arg143以支持二酰甘油基轉(zhuǎn)移到前體蛋白上，并將兩個底物靠近在一起，而Arg239通過與二酰甘油基(DAG)形成氫鍵，協(xié)同Arg143發(fā)揮作用。

圖1 脂蛋白產(chǎn)生途徑[10]Fig. 1 The canonical biosynthetic pathway of bacterial lipoproteins[10]

圖2 大腸埃希菌Lgt晶體結(jié)構(gòu)[10]Fig. 2 Crystalstructure of E. coil Lgt[10]

2 脂蛋白信號肽酶II LspA

LspA作用于脂蛋白產(chǎn)生途徑的第二步，通過切除前脂蛋白上半胱氨酸N末端的信號肽，形成脂蛋白。LspA是由169個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，普遍存在于細(xì)菌中，位于細(xì)胞質(zhì)膜上，其反應(yīng)適宜溫度37～45℃，最適反應(yīng)pH7.8[14]。盡管其缺少天冬氨酰蛋白酶的氨基酸共有序列Asp-Thr-Gly[25]，但是LspA被初步確定為天冬氨酰肽鏈內(nèi)切酶。在革蘭陰性菌中，LspA嚴(yán)格切除脂質(zhì)修飾的半胱氨酸殘基N-末端的信號肽，而一些革蘭陽性菌的LspA可能對底物具有較低的特異性或不同的識別模式，如鏈球菌的LspA已被證明可以切割原前脂蛋白中未經(jīng)修飾的半胱氨酸殘基N末端的信號肽[26-27]。LspA是革蘭陰性菌中必需的酶。在革蘭陽性菌中，LspA是非必需的，可能是因為LspA突變菌株中前體脂蛋白的積聚導(dǎo)致其他肽酶的替代處理[28]，例如最近在糞腸球菌中發(fā)現(xiàn)了Eep肽酶，其參與了前體脂蛋白信號肽的切割過程。但LspA功能的缺失會導(dǎo)致革蘭陽性菌致病能力的減弱[29]，例如，金黃色葡萄球菌LspA突變菌株毒力減弱。大部分細(xì)菌有一個單一lspA基因，只有少數(shù)細(xì)菌擁有兩個同源性的lspA基因，并且LspA與已知結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)沒有序列同源性，在人體中無同源類似物，使其成為潛在藥物靶點(diǎn)[30-33]。2016年，Caffery課題組[34]解析出銅綠假單胞菌LspA-Globomycin(格羅泊霉素)共晶結(jié)構(gòu)，并確定了其催化位點(diǎn)。LspA由兩個結(jié)構(gòu)域組成(圖3a)，第一個結(jié)構(gòu)域由4個跨膜螺旋(MH1-4)組成，其N末端和C末端均在細(xì)胞質(zhì)中。第二個是細(xì)胞周質(zhì)結(jié)構(gòu)域，它由兩個亞結(jié)構(gòu)域所組成，其中較大的一個亞結(jié)構(gòu)域是一個由4條肽鏈組成，兩親性的β-片層，位于細(xì)胞內(nèi)膜上。第二個亞結(jié)構(gòu)域由周質(zhì)螺旋(PH)組成，也位于細(xì)胞內(nèi)膜上，其長軸正交于β-片層。LspA-Globomycin共晶結(jié)構(gòu)顯示，格羅泊霉素通過氫鍵以及疏水作用牢固的鑲嵌在LspA中，作用在跨膜螺旋MH1、MH2和MH3之間電子云密度獨(dú)特的環(huán)形區(qū)域，格羅泊霉素的Leu、Ile和Ser的主鏈羰基和LspA嚴(yán)格保守的氨基酸殘基Asn112和Arg116的側(cè)鏈形成氫鍵，而Leu的側(cè)鏈，羥基脂肪酸的乙?；溑cLspA非極性氨基酸殘基具有疏水相互作用。此外，格羅泊霉素Ser上的β-OH與LspA氨基酸殘基Asp143的羰基形成了最為顯著的氫鍵，Asp143是LspA催化二聯(lián)體中其中一個氨基酸殘基，另外一個是Asp124(圖3b)。LspA催化前體脂蛋白N-末端信號肽裂解的機(jī)制為：LspA的N端與二酰甘油基脂蛋白結(jié)合，起催化作用的天冬氨酸殘基Asp143、Asp124與水分子形成氫鍵來保持它所在的位置。當(dāng)遇到二酰甘油基脂蛋白時，Asp143協(xié)助水分子進(jìn)行親核進(jìn)攻，Asp124則是活化二酰甘油基脂蛋白肽鍵的羰基碳，形成四面體中間體。羰基碳上酰胺鍵的斷裂重排，導(dǎo)致前體脂蛋白N末端信號肽的斷裂。另外，對來自485個與銅綠假單胞菌的LspA具有35%～95%序列同源性的生物體進(jìn)行LspA氨基酸序列的推導(dǎo)，分析鑒定出LspA有14個嚴(yán)格保守的氨基酸殘基(Asp23、Lys27、Asn54、Gly56、Gly108、Ala109、Asn112、Arg116、Val122、Asp124、Phe139、Asn140、Ala142和Asp143)。

2.1 LspA抑制劑

2.1.1 格羅泊霉素(Globomycin)

1978年，格羅泊霉素(1)(圖4)首次被鑒定為由不同鏈霉菌菌株產(chǎn)生的對大腸埃希菌具有抑制活性的抗生素[35]。它是一個兩親性的19元環(huán)狀縮肽，由L-Ser和L-allo-Thr構(gòu)成了極性的一半，而羥基脂肪酸，L-Leu和L-Ile構(gòu)成了非極性的一半。動力學(xué)研究表明，格羅泊霉素以非競爭性抑制方式抑制LspA，其與二酰甘油基-前體脂蛋白的結(jié)合常數(shù)Ki為36nmol/L，米氏方程常數(shù)Km為6μmol/L[36]。其對LspA的EC50為2μg/mL[37]。格羅泊霉素對變形菌屬具有更好的抑制活性(但是對銅綠假單胞菌無活性)，對厚壁菌屬的抗菌活性較差[38-39]。對格羅泊霉素類似物的構(gòu)效關(guān)系研究表明，隨著羥基脂肪酸烷基側(cè)鏈的延長，對革蘭陰性菌的抗菌活性也會隨之增強(qiáng)，可能是因為較長的側(cè)鏈可以增強(qiáng)其與LspA跨膜螺旋 MH2非極性表面的疏水相互作用。并且隨著烷基側(cè)鏈延長，其對一些革蘭陽性菌(鏈球菌，金黃色葡萄球菌，腸球菌)表現(xiàn)出一定的抑制活性。L-Ser的羥基對于格羅泊霉素發(fā)揮抑制作用是必不可少的[39]，可能是其與關(guān)鍵氨基酸Asp143形成了氫鍵相互作用，阻斷了LspA的催化活性位點(diǎn)。

2.1.2 Myxovirescin(TA)

圖3 LspA-Globomycin共晶結(jié)構(gòu)[34]Fig. 3 LspA-globomycin complex structure[34]

抗生素TA(myxovirescin)(2)(圖4)是由黏細(xì)菌產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，具有28元大環(huán)內(nèi)酰胺內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，是一種快速殺菌劑，具有廣譜抗菌活性。TA已被證明可以靶向LspA發(fā)揮抑制作用[37]，對LspA的EC50為0.25μg/mL。TA對大腸埃希菌YX127的最低抑菌濃度為0.25μg/mL，而格羅泊霉素對大腸埃希菌YX127的最低抑菌濃度為2μg/mL，TA比格羅泊霉素顯示出更好的LspA抑制活性及抗菌活性。由于TA對真菌，原生動物，真核細(xì)胞，嚙齒動物甚至人類沒有毒性，其抗菌活性是特異性的[40]。但是TA具有代謝不穩(wěn)定性，可將TA作為LspA抑制劑的先導(dǎo)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化。

2.1.3 苯甲酰胺類化合物

2017年，Seiya等[41]報道了苯甲酰胺類化合物以非競爭性方式抑制LspA的活性，初始苗頭化合物3a(圖4)是通過高通量篩選得到的，該化合物包含苯甲酰胺基和噻二唑結(jié)構(gòu)，對LspA的IC50為4.2μmol/L。通過對該化合物苯環(huán)上的甲氧基，噻二唑雜環(huán)，以及雜環(huán)上所連接的脂肪鏈進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，得到了對LspA具有更強(qiáng)抑制作用的化合物3b，該化合物的IC50為99nmol/L。可能是由于革蘭陰性菌的外膜滲透性限制了該化合物的有效性，化合物3b必須在細(xì)胞外膜穿透劑多黏菌素衍生物PMBN存在下，才能抑制大腸埃希菌的生長。在PMBN存在下，其對大腸埃希菌的最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration, MIC)為11μg/mL。此外，格羅泊霉素在PMBN存在下，對大腸埃希菌的抗菌活性增強(qiáng)了100倍。外膜滲透性是革蘭陰性抗生素藥物發(fā)現(xiàn)中的重要障礙，同時說明了體外LspA抑制作用和體內(nèi)抗菌作用的差異。因此，LspA抑制劑和細(xì)胞外膜穿透劑或更多臨床相關(guān)的黏菌素或多黏菌素B的組合療法可能是增強(qiáng)LspA抑制劑體內(nèi)和臨床有效性的方法。

3 脂蛋白N-?；D(zhuǎn)移酶Lnt

Lnt是作用于脂蛋白產(chǎn)生過程中的最后一個酶，催化磷脂酰乙醇胺(PE)的sn-1-酰基鏈轉(zhuǎn)移到脂蛋白半胱氨酸游離的α-氨基上，最終形成成熟的三酰化脂蛋白[42-43]，成熟的脂蛋白停留在內(nèi)膜或被特定的脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞外膜上，通過N端脂基團(tuán)錨定在膜上發(fā)揮其正常功能。在革蘭陰性菌中，脂蛋白正確的細(xì)胞定位是其發(fā)揮正常生理功能的基礎(chǔ)，這依賴于細(xì)胞內(nèi)脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，Lnt對脂蛋白從細(xì)胞質(zhì)膜釋放和通過脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)到外膜是必不可少的。Lnt的缺失，會導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)膜中脂蛋白的積累，這對革蘭陰性菌來說是致命的[44]。1991年，Gupta等[44]證實了大腸埃希菌Lnt位于細(xì)胞質(zhì)膜上，并且確定了其最適反應(yīng)pH(pH6.5～7.5)。2007年，Vidal-Vidal-Ingigliardi等[45]鑒定了Lnt的幾個主要的氨基酸殘基，它們主要位于起催化作用的周質(zhì)結(jié)構(gòu)區(qū)域，包括催化三聯(lián)體Glu267-Lys335-Cys387。該催化三聯(lián)體參與了兩步反應(yīng)：在第一步反應(yīng)中，Glu267充當(dāng)反應(yīng)過程的堿基，離去氫原子，活化Cys387，增強(qiáng)其親核性，進(jìn)攻磷脂sn-1脂肪酸鏈上的羰基，形成硫酯-中間體；在第二步反應(yīng)中，?；D(zhuǎn)移產(chǎn)生成熟的三酰化脂蛋白，而Lys335用以穩(wěn)定在N-?；磻?yīng)兩個步驟中形成的四面體中間體的含氧陰離子[46-47]。動力學(xué)研究顯示Lnt遵循乒乓(ping-pong)機(jī)制，由此在第一個反應(yīng)中產(chǎn)生的溶血磷脂副產(chǎn)物，在第二個底物脂蛋白結(jié)合和修飾之前釋放[47]。Lnt對磷脂底物有選擇性，具有sn-1飽和脂肪酸鏈(棕櫚酸酯或油酸酯)和sn-2不飽和脂肪酸鏈的磷脂酰乙醇胺是其最有效的供體[47]。2009年，Tschumi等[48-49]首次報道了Lnt在高GC含量放線菌屬中的活性，恥垢分枝桿菌和結(jié)核分枝桿菌的Lnt直系同源物具有N-?；D(zhuǎn)移酶活性，出乎意料地是，恥垢分枝桿菌脂蛋白的N-酰化脂肪酸種類和脂肪酸在磷脂中的位置分布表明[50]，其Lnt的底物應(yīng)該來自PE的sn-2位置。這種特異性不同于大腸埃希菌Lnt底物來自PE的sn-1位置[51]，而對大腸埃希菌Lnt功能必需的氨基酸殘基Try237和Lys388，在恥垢分枝桿菌的Lnt中不存在[52]，這些氨基酸殘基被證明參與第二步的反應(yīng)，載脂蛋白的N-?；砻魉鼈兛赡茉诘孜锾禺愋灾衅鹱饔肹53]。在所有的鏈霉菌屬中，含有兩種lnt基因(lnt1和lnt2)，在疥瘡菌屬中，lnt1基因?qū)τ贚nt的N-?；D(zhuǎn)移功能至關(guān)重要，而lnt2基因?qū)nt的功能不太重要，在lnt2基因不存在下，仍能產(chǎn)生成熟的三酰化脂蛋白[54]。綜上，Lnt對于革蘭陰性菌和一些高GC含量放線菌屬的存活十分重要。因此，Lnt可作為廣譜抗生素的潛在靶標(biāo)。2017年，Sharookn課題組[55]解析出野生型大腸埃希菌Lnt蛋白結(jié)構(gòu)(圖5)，其由八條跨膜螺旋組成，N末端和C末端均位于細(xì)胞質(zhì)中。TM3在氨基酸殘基Gly71中含有明顯的扭結(jié)，側(cè)鏈間的相互作用導(dǎo)致TM4和TM5具有相似的跨膜角度，TM4和TM5在內(nèi)膜的外小葉附近稍微張開以形成通向Lnt周質(zhì)結(jié)構(gòu)域的溝槽。除了一個短的兩親性螺旋(Lys161-Gly168)在TM6之前靠在膜周質(zhì)側(cè)，這些跨膜螺旋之間的大環(huán)(W141-V169)主要嵌入膜中。這些螺旋和介于它們之間的環(huán)形成一個小的親水性腔體。在跨膜螺旋TM7和8之間，具有一個大的特征性的α-β-β-α夾心折疊的周質(zhì)碳-氮水解酶結(jié)構(gòu)域，它由一個大的水解酶家族組成，包括腈基水解酶，酰胺水解酶，N-?；D(zhuǎn)移酶。其催化三聯(lián)體Glu267-Lys335-Cys387位于該水解酶區(qū)域。

圖4 LspA抑制劑(1、2、3a和3b)的結(jié)構(gòu)Fig. 4 Structures of LspA inhibitors (1, 2, 3a and 3b)

圖5 野生型大腸埃希菌Lnt晶體結(jié)構(gòu)[55]Fig. 5 Crystalstructure of wild-type Lnt[55]

4 結(jié)論與展望

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌對抗生素產(chǎn)生了耐藥性，因此研發(fā)新作用機(jī)制的抗生素有望克服細(xì)菌耐藥性問題。脂蛋白生物合成途徑的Lgt和LspA，Lnt酶是原核生物特有的，干擾該合成途徑將影響大量脂蛋白的合成，因此脂蛋白的生物合成途徑所涉及的3種酶可以作為抗生素發(fā)展的潛在靶標(biāo)。目前的臨床耐藥機(jī)制對作用于新靶標(biāo)的抗生素可能不存在交叉耐藥性。此外，Lgt、LspA和Lnt這3種酶都是跨膜蛋白，這種結(jié)構(gòu)可以使得一些小分子與它們結(jié)合，抑制它們的活性而不需要穿過難以滲透的細(xì)胞質(zhì)膜，從而提高抗菌有效性。目前這3種酶的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)均已被解析出來，從而可以開展基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計，加快抗耐藥菌藥物先導(dǎo)結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)。但是，目前針對脂蛋白的生物合成路徑所涉及的3種酶抑制劑，少有文獻(xiàn)報道。已報道的LspA抑制劑仍處于臨床前研究，其具體作用機(jī)理仍需進(jìn)一步探究。