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(河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，河南 鄭州 450002)

鹽脅迫嚴(yán)重影響植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的各個(gè)代謝路徑，導(dǎo)致細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)被破壞、植物抗氧化系統(tǒng)失去平衡、植物光合作用和呼吸作用受到抑制，植物的新陳代謝發(fā)生紊亂[1]。光系統(tǒng)對(duì)逆境脅迫非常敏感，研究發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫對(duì)植物光合作用具有抑制作用，并隨著鹽濃度和脅迫時(shí)間的增加，抑制作用更加明顯，鹽脅迫下植物的PSⅡ反應(yīng)中心活性受到影響[2]。WANG等[3]發(fā)現(xiàn)鹽敏感品種水稻的光抑制作用比非敏感品種明顯。BRUNING等[2]認(rèn)為，鹽脅迫會(huì)抑制PSⅡ的反應(yīng)，最大光化學(xué)效率(Fv/Fm)、光化學(xué)猝滅系數(shù)(qP)呈下降趨勢(shì)，非光化學(xué)猝滅系數(shù)(NPQ)呈上升趨勢(shì)，而且NPQ比qP的反應(yīng)更加敏感。鹽脅迫下，光合過(guò)程的電子傳遞和光合速率受到抑制，植株內(nèi)活性氧大量積累，活性氧清除系統(tǒng)通過(guò)清除植物體內(nèi)的氧自由基、過(guò)氧化氫等活性氧，減少活性氧的積累，增強(qiáng)植物的抗鹽性。植物產(chǎn)生大量活性氧，抗氧化酶活性增加，減少活性氧積累，提升植物的抗鹽性[4]。超氧化物歧化酶(SOD)是植物體內(nèi)抗氧化酶防御體系中的首道防護(hù)線，鹽脅迫下，SOD能夠與其他抗氧化酶共同抵抗外界逆境脅迫[5]。鹽脅迫下，大量的活性氧導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化，丙二醛(MDA)大量聚集。植物可以通過(guò)細(xì)胞膜吸收無(wú)機(jī)鹽離子維持細(xì)胞滲透勢(shì)[6-7]，也可以通過(guò)合成可溶性糖、蛋白質(zhì)以及氨基酸等保持細(xì)胞內(nèi)水分和細(xì)胞完整性[8-9]，從而提高抗鹽性。

脂肪酸各組分的比例能夠影響膜的穩(wěn)定性。目前針對(duì)植物脂肪酸的研究主要集中在溫度脅迫方面，有關(guān)鹽脅迫的報(bào)道相對(duì)較少[10]。有研究發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫致使小麥根系膜脂不飽和指數(shù)下降[11]，不飽和脂肪酸可提升光合作用的耐鹽性和受損后的修復(fù)能力，同時(shí)減少逆境脅迫下活性氧傷害[12]。脂肪酸去飽和酶基因在不飽和脂肪酸的合成中具有重要的調(diào)控作用，此類酶主要有脂酰-ACP(Acyl-ACP)去飽和酶和脂酰-酯(Acyl-lipid)去飽和酶兩大類。Acyl-ACP去飽和酶(Stearoyl-ACP desaturase,SAD)能夠?qū)︼柡椭舅崞鸬酱呋饔?，最終產(chǎn)生單不飽和脂肪酸。此前已有學(xué)者從不同植物里克隆出了Acyl-ACP去飽和酶基因[13]。Acyl-ACP去飽和酶包含了ω-6和ω-3兩種酶，通過(guò)催化作用與甘油結(jié)合的脂肪酸產(chǎn)生雙鍵，調(diào)節(jié)膜脂不飽和度。CmFAD2基因是影響ω-6脂肪酸去飽和酶催化途徑的關(guān)鍵基因，ω-3脂肪酸去飽和酶基因包含F(xiàn)AD3、FAD7和FAD8三大類基因。現(xiàn)已經(jīng)從許多植物中克隆得到ω-6和ω-3基因，相關(guān)轉(zhuǎn)基因和表達(dá)模式的研究也有較多報(bào)道。在對(duì)煙草的研究中發(fā)現(xiàn)，過(guò)量表達(dá)ω-3基因引起耐鹽性有所增強(qiáng)[14]。

菊花(Chrysanthemunmorifolium)有著悠久的栽培歷史，茶用菊是以茶用為主的菊花種類，具有較高的觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前茶用菊與農(nóng)作物之間的栽培用地之爭(zhēng)愈發(fā)嚴(yán)重，研究茶用菊的抗鹽性機(jī)制，可以有效地篩選抗鹽性品種，為鹽漬化土地的茶用菊生產(chǎn)提供新思路[15]。目前菊類植物的鹽脅迫探究主要集中在菊芋、藥用菊、野菊以及菊花近緣屬種[16]，有關(guān)鹽脅迫下茶用菊的脂肪酸組分變化及抗性機(jī)制需要深入探討。前期針對(duì)菊花脂肪酸含量及脂肪酸去飽和酶基因表達(dá)開(kāi)展了基礎(chǔ)性研究工作[17-19]，本試驗(yàn)以茶用菊品種金絲皇菊作為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)NaCl脅迫下其葉片光合特性、抗氧化酶活性與脂肪酸含量，以及3種脂肪酸去飽和酶基因表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定，分析茶用菊鹽脅迫下的生理響應(yīng)，為闡明茶用菊的相關(guān)抗性機(jī)制提供理論基礎(chǔ)，為鹽漬化土地茶用菊的生產(chǎn)提供理論參考。

1 材料和方法

1.1 材料培養(yǎng)和處理

供試材料為茶用菊品種金絲皇菊，選取生長(zhǎng)健壯均勻的植株，盆栽基質(zhì)配比為V(草炭)∶V(蛭石)∶V(珍珠巖)=1∶1∶1，每盆栽種1株。待株高為(25±2)cm，葉片數(shù)為(15±1)時(shí)，開(kāi)始進(jìn)行試驗(yàn)處理。

試驗(yàn)共設(shè)4個(gè)NaCl濃度梯度：0[以清水為對(duì)照(CK)]、50、100、200 mmol/L，為避免過(guò)高濃度的鹽溶液帶來(lái)沖擊效應(yīng)，NaCl脅迫采取漸進(jìn)式(對(duì)照組除外)，NaCl脅迫濃度以每日50 mmol/L的濃度增加，在同一時(shí)間達(dá)到不同濃度[15]。達(dá)到設(shè)定濃度當(dāng)天為脅迫0 d，在處理的0、3、6、9 d選取植物上部第4～6片完全展開(kāi)葉完成多個(gè)指標(biāo)的測(cè)定，每組重復(fù)3次，每重復(fù)3盆。

1.2 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.2.1 生理指標(biāo)的測(cè)定 葉綠素含量采用乙醇提取法和分光光度計(jì)測(cè)定，MDA含量用硫代巴比妥酸反應(yīng)法測(cè)定，SOD活性采用氮藍(lán)四唑(NBT)顯色法測(cè)定，過(guò)氧化物酶(POD)活性采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定，可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定，可溶性蛋白含量采用Bradford法測(cè)定，游離脯氨酸含量采用磺基水楊酸法測(cè)定[20-21]。

1.2.2 葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測(cè)定 在取樣當(dāng)天8:00—10:00采用熒光成像儀Fluor Cam對(duì)各處理下受光相同的第4～6片完全展開(kāi)葉進(jìn)行測(cè)定。檢測(cè)時(shí)將整株菊花放入暗室中暗反應(yīng)20 min，然后檢測(cè)每片葉的最小初始熒光(Fo)、最大熒光(Fm)、qP和NPQ。

1.2.3 葉片中脂肪酸組分的測(cè)定 脂肪酸組分參照李永華等[17]使用外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定。新鮮葉片于105 ℃殺青5 min，之后50 ℃烘干。稱量樣品0.2 g，加入100 mL磨口錐形瓶里，加入10%(V/V)硫酸甲醇溶液10 mL，70 ℃水浴中放置30 min。轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，加入20 mL蒸餾水，用正己烷5 mL進(jìn)行萃取，重復(fù)3次，加一定量的無(wú)水硫酸鈉進(jìn)行干燥，過(guò)濾膜作為氣相樣品，運(yùn)用DB-WAXFTLP柱進(jìn)行氣相檢測(cè)(島津氣相)。

測(cè)定過(guò)程：氮?dú)庾鳛檩d氣，流動(dòng)速度1 mL/min，柱溫140 ℃，維持2 min，然后以每分鐘5 ℃提升溫度至200 ℃，持續(xù)1 min，隨后以每分鐘5 ℃提升溫度至220 ℃，持續(xù)20 min，將樣品與脂肪酸標(biāo)品(Nu-CheckPrep，Elysian，MN，USA)反應(yīng)進(jìn)行對(duì)比，樣品進(jìn)樣溫度225 ℃，檢測(cè)器溫度275 ℃。

1.2.4 脂肪酸去飽和酶基因表達(dá)量的測(cè)定 使用CTAB改良方法得到總RNA，運(yùn)用電泳和分光光度儀檢測(cè)RNA的質(zhì)量。選取高質(zhì)量樣品，使用大連寶生物有限公司(TaKaRa)生產(chǎn)的反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Prime Script TM RT reagent Kit with gDNA Erser)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。實(shí)驗(yàn)室前期研究表明，CmSAD、CmFAD2以及CmFAD7是調(diào)控同一途徑上的3種脂肪酸去飽和酶基因，且這3種脂肪酸去飽和酶所調(diào)控的反應(yīng)是連續(xù)的。本研究根據(jù)實(shí)驗(yàn)室得到的基因序列，運(yùn)用Primer Premier 5.0確定實(shí)時(shí)PCR引物，具體的序列如下：

SAD-F1：5′-TCTGCCAACCTACCAAAC-3′

SAD-R1：5′-TGTCTTCTGAATCTGCCTC-3′

FAD7-F1：5′-AAACCATCAGCTTTGCGGTC-3′

FAD7-R1：5′-CGCAGCTCGAATATCAGCCA-3′

FAD2-F1：5′-TACTTCCTCGCAAACAC-3′

FAD2-R1：5′-TGACCAATGACCCATAA-3′

18S-rRNA-F1：5′-CTCATGGGATGTGGCTTCTT-3′

18S-rRNA-R1：5′-GCGTTCAAAAACTCGATGGT-3′

qRT-PCR操作參照張華奧等[22]的方法進(jìn)行。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)分析采用Microsoft Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入和作圖，應(yīng)用SPSS 24軟件進(jìn)行方差和相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鹽脅迫對(duì)菊花葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

如圖1所示，與對(duì)照組相比，隨著鹽處理時(shí)間的推移，F(xiàn)v/Fo、Fv/Fm和qP均有不同程度的降低。處理6 d以后，50、100、200 mmol/L處理組的Fv/Fo、Fv/Fm和qP與對(duì)照組均呈現(xiàn)顯著差異，處理9 d時(shí)，各處理組Fv/Fo較對(duì)照組分別下降19.0%、29.5%和40.7%，F(xiàn)v/Fm較對(duì)照組分別下降13.2%、26.0%和40.3%，qP較對(duì)照組分別下降11.0%、24.9%和40.4%；NPQ隨著處理時(shí)間的增加開(kāi)始上升，同時(shí)處理濃度越大相應(yīng)的上升幅度越大，各處理組在9 d時(shí)達(dá)到峰值，較對(duì)照組分別增加28.6%、44.0%和58.4%。

植物光系統(tǒng)對(duì)鹽逆境脅迫最敏感。鹽脅迫下菊花的光系統(tǒng)受到影響，NPQ呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，菊花的PSⅡ功能已經(jīng)受到影響。菊花通過(guò)提高熱散耗能力、減少激發(fā)能的產(chǎn)生保護(hù)自身光合系統(tǒng)不受損，提高抵御鹽脅迫的能力。鹽脅迫下，植物光合過(guò)程中電子傳遞和光合速率受到抑制，植株內(nèi)活性氧大量積累，各種抗氧化酶活性發(fā)生變化。

2.2 鹽脅迫對(duì)菊花葉片抗氧化酶活性和MDA含量的影響

如圖2所示，與對(duì)照組相比，鹽處理后POD和CAT活性提高；處理9 d時(shí)，50、100、200 mmol/L處理組中POD活性較對(duì)照組分別增長(zhǎng)94.6%、121.1%和258.9%，CAT活性較對(duì)照組分別增長(zhǎng)88.0%、93.9%和137.6%。不同處理下SOD活性表現(xiàn)具有差異性，50 mmol/L和100 mmol/L處理組中，SOD活性明顯增大；200 mmol/L 處理組中SOD活性先上升后下降。各處理組菊花葉片MDA含量不斷上升，處理9 d時(shí)，各處理組較對(duì)照組分別增長(zhǎng)了17.8%、58.5%、73.0%?？梢?jiàn)，菊花可以通過(guò)提高葉片內(nèi)抗氧化酶的活性來(lái)適應(yīng)外界的鹽脅迫環(huán)境，當(dāng)鹽濃度過(guò)高時(shí)，膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA開(kāi)始大量聚集，并表現(xiàn)顯著性提高。

同一時(shí)間下不同小寫(xiě)字母表示處理間差異顯著(P<0.05)，下同

圖2 NaCl脅迫對(duì)菊花葉片抗氧化酶和MDA含量的影響Fig.2 Effects of NaCl stress on the contents of antioxidant enzymes and malondialdehyde in chrysanthemum leaves

2.3 鹽脅迫對(duì)菊花葉片可溶性物質(zhì)及葉綠素含量的影響

由圖3A可知，隨著處理時(shí)間的增加，50 mmol/L處理組中可溶性糖含量不斷增加；100 mmol/L處理組先增加然后減少，處理6 d時(shí)較對(duì)照組增加115.3%，此時(shí)處于峰值，然后開(kāi)始降低；200 mmol/L處理組呈不斷下降的趨勢(shì)，處理9 d時(shí)較對(duì)照組下降46.4%；圖3B中，可溶性蛋白含量在50、200 mmol/L處理組中先增加后減小，3 d時(shí)達(dá)到峰值，9 d時(shí)達(dá)到最低點(diǎn)，較對(duì)照組分別下降30.0%和48.9%；在100 mmol/L處理組中不斷下降，處理9 d時(shí)較對(duì)照組下降37.7%；由圖3C可知，50、100、200 mmol/L處理組中，脯氨酸含量不斷上升，處理9 d時(shí)，較對(duì)照組分別上升60.3%、73.9%和123.9%。由圖3D可知，處理0～6 d內(nèi)，100 mmol/L處理組中葉綠素含量先下降后上升，6 d時(shí)葉綠素含量較對(duì)照組增加13.5%，9 d時(shí)葉綠素含量開(kāi)始出現(xiàn)下降趨勢(shì)。

圖3 NaCl脅迫對(duì)菊花葉片可溶性物質(zhì)和葉綠素含量的影響Fig.3 Effects of NaCl stress on the contents of soluble matter and chlorophyll in chrysanthemum leaves

2.4 鹽脅迫對(duì)菊花葉片脂肪酸的影響

如表1所示，隨著處理時(shí)間的增加，處理組中棕櫚酸和硬脂酸含量逐漸下降；50、100 mmol/L處理組中亞麻酸和亞油酸含量不斷增加，處理9 d時(shí)，亞麻酸含量較對(duì)照組分別增長(zhǎng)4.5%和25.6%，亞油酸含量分別增長(zhǎng)21.7%和39.5%；50 mmol/L處理組中的油酸含量升高，6 d后趨于平穩(wěn)；100 mmol/L處理組中的油酸含量不斷增加，9 d時(shí)較對(duì)照組增加26.4%；200 mmol/L處理組中的油酸、亞油酸和亞麻酸3種物質(zhì)的水平變化基本一致，均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。

如圖4所示，隨著處理時(shí)間的增加，處理組中飽和脂肪酸含量不斷下降；50、100 mmol/L處理組中不飽和脂肪酸含量不斷增加，9 d時(shí)，較對(duì)照組分別上升12.4%和31.4%；200 mmol/L處理組中不飽和脂肪酸先增加后減少，3 d時(shí)達(dá)到最大值，增幅為23.6%，9 d時(shí)下降18.3%。100 mmol/L和200 mmol/L處理組中不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸的比率(USFA/SFA)逐漸增大，9 d時(shí)較對(duì)照組分別增長(zhǎng)202.7%和195.9%；脂肪酸不飽和指數(shù)(IUFA)也呈現(xiàn)出不斷升高的趨勢(shì)，200 mmol/L處理組中IUFA先升高后降低，處理3 d時(shí)上升22.9%，達(dá)到峰值，隨后開(kāi)始下降，9 d時(shí)較對(duì)照組下降16.4%。

以上結(jié)果說(shuō)明低濃度鹽處理下，植物脂肪酸進(jìn)行適應(yīng)性調(diào)整，調(diào)節(jié)脂肪酸組分，增加不飽和脂肪酸的含量，增強(qiáng)細(xì)胞膜體系的穩(wěn)定性。鹽濃度過(guò)高時(shí)，受植物細(xì)胞內(nèi)活性氧影響，不飽和脂肪酸被分解，細(xì)胞膜相發(fā)生改變。

2.5 鹽脅迫對(duì)菊花葉片脂肪酸去飽和酶關(guān)鍵基因表達(dá)量的影響

在課題組前期研究基礎(chǔ)上，選取CmSAD、CmFAD2以及CmFAD7三個(gè)脂肪酸去飽和酶關(guān)鍵基因進(jìn)行分析。CmSAD在50 mmol/L和100 mmol/L處理組中的表達(dá)量不斷上升，9 d時(shí)分別達(dá)到對(duì)照組的2.8倍和8.2倍；200 mmol/L處理組中CmSAD的表達(dá)量先增加后減小，處理6 d時(shí)最高，是對(duì)照組的5.7倍，隨后開(kāi)始降低(圖5A)。處理0 d時(shí)，CmFAD2的表達(dá)量隨著處理濃度的增加逐漸降低。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，50 mmol/L和100 mmol/L處理組中基因表達(dá)量逐漸上升，處理9 d時(shí)分別達(dá)到對(duì)照組的1.3倍和1.9倍；200 mmol/L處理組中，3 d時(shí)數(shù)值最大，與對(duì)照組比較，是其1.4倍，6 d時(shí)表達(dá)量出現(xiàn)驟降，9 d時(shí)幾乎不表達(dá)(圖5B)。CmFAD7在50 mmol/L處理組中表達(dá)量不斷升高，9 d時(shí)是對(duì)照組的5.6倍；100 mmol/L和200 mmol/L處理組中的表達(dá)量均先升高后降低，100 mmol/L處理組在6 d達(dá)到峰值，是對(duì)照組的7.2倍，隨后開(kāi)始降低，處理9 d時(shí)表達(dá)量只有對(duì)照組的59.0%；200 mmol/L處理組在3 d數(shù)值最高，是對(duì)照組的6.1倍，隨后開(kāi)始下降，處理9 d時(shí)幾乎不表達(dá)(圖5C)。

表1 NaCl脅迫下菊花葉片脂肪酸組分及含量Tab.1 Fatty acid components in chrysanthemum leaves under NaCl stress %

注：同一時(shí)間下不同小寫(xiě)字母表示處理間差異顯著(P<0.05)；* 為同一濃度處理組下該類脂肪酸最大含量，**為同一濃度處理組下該類脂肪酸最低含量。

Note：There were significant differences between different lowercase letters at the same time(P<0.05)；*represents the maximum content of such fatty acids in the same concentration treatment group,** represents the lowest content of such fatty acids in the same concentration treatment group.

圖4 NaCl脅迫對(duì)菊花葉片脂肪酸含量的影響Fig.4 Effects of NaCl stress on the content of fatty acids in chrysanthemum leaves

結(jié)合脂肪酸組分變化分析可知，50、100 mmol/L處理組的基因表達(dá)量與葉片中不飽和脂肪酸含量變化均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，200 mmol/L處理組中CmFAD7的表達(dá)量與不飽和脂肪酸含量同時(shí)在6 d時(shí)下降，CmFAD2表達(dá)量的下降則出現(xiàn)在9 d時(shí)，較不飽和脂肪酸含量的下降有滯后性。

圖5 NaCl脅迫對(duì)菊花葉片脂肪酸去飽和酶基因表達(dá)量的影響Fig.5 Effects of NaCl stress on expression of fatty acid desaturase gene in chrysanthemum leaves

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽脅迫下，菊花葉片的qP、Fv/Fm和Fv/Fo不斷減小，NPQ不斷增大。鹽脅迫下菊花PSⅡ反應(yīng)中心活性受到抑制，通過(guò)提高熱散耗能力、減少激發(fā)能產(chǎn)生以保護(hù)自身光合中心，提高自身抵御鹽脅迫的能力。在不同植物的試驗(yàn)中均發(fā)現(xiàn)鹽脅迫下Fv/Fm、Fv/Fo降低，PSⅡ中心活性受到影響[23-24]，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

鹽濃度較低時(shí)，SOD、CAT、POD活性逐漸上升，高濃度下，SOD活性減小，MDA開(kāi)始積累，此時(shí)植物的活性氧清除力開(kāi)始下降。在脅迫濃度閾值內(nèi)，活性氧清除系統(tǒng)能夠迅速反應(yīng)，對(duì)菊花的各種代謝機(jī)構(gòu)產(chǎn)生一定的保護(hù)作用，超出脅迫濃度閾值后，活性氧聚集，膜脂過(guò)氧化嚴(yán)重，MDA大量積累，對(duì)各種代謝機(jī)構(gòu)產(chǎn)生影響。在鹽脅迫下，菊花葉中的可溶性糖、蛋白質(zhì)和脯氨酸含量增大，用以增強(qiáng)植物細(xì)胞的保水能力；超出了菊花自身耐受能力后，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重，可溶性糖、蛋白質(zhì)和脯氨酸的合成能力受到影響，含量開(kāi)始降低，細(xì)胞失水。AHMED等[25]在對(duì)橄欖樹(shù)幼苗的研究中指出，脯氨酸可以提高抗氧化酶活性，這一關(guān)系在菊花中有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

本課題組前期試驗(yàn)表明，菊花葉片總膜脂脂肪酸中棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸5種占有率在95%以上[17]。隨著處理時(shí)間的增加，低濃度鹽處理下不飽和脂肪酸含量逐漸增加，膜的流動(dòng)性得以保持；當(dāng)脅迫濃度和時(shí)間超出菊花的耐受力時(shí)，不飽和脂肪酸含量減少，膜相發(fā)生改變。脂肪酸的去飽和途徑是不飽和脂肪酸合成的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，CmSAD、CmFAD2、CmFAD7是不飽和脂肪酸合成中關(guān)鍵的限速酶基因。低濃度鹽處理下，不飽和脂肪酸以及CmSAD、CmFAD2、CmFAD7三個(gè)基因的表達(dá)量均呈現(xiàn)不斷上升的趨勢(shì)；高濃度下，基因表達(dá)出現(xiàn)滯后性。這種滯后性可能是由于植物在鹽脅迫下膜結(jié)構(gòu)受到損傷，導(dǎo)致基因表達(dá)與轉(zhuǎn)錄受到影響，也可能是光抑制過(guò)程中過(guò)量的活性氧引起不飽和脂肪酸含量下降所致。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽脅迫下金絲皇菊通過(guò)抗氧化酶、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的改變以及脂肪酸去飽和基因的表達(dá)，保護(hù)光合系統(tǒng)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，調(diào)節(jié)脂肪酸組分的變化以保護(hù)膜系統(tǒng)，提高自身抗鹽性。當(dāng)脅迫程度超過(guò)自身的調(diào)節(jié)能力時(shí)，光合機(jī)構(gòu)受到損傷，PSⅡ光合效率下降，活性氧大量積累對(duì)膜結(jié)構(gòu)造成不可逆的傷害，導(dǎo)致不飽和脂肪酸含量與去飽和酶基因表達(dá)量下降。此外，還發(fā)現(xiàn)在100 mmol/L鹽脅迫處理中細(xì)胞內(nèi)理化指標(biāo)有明顯變化，在后期試驗(yàn)中可以作為一個(gè)重要的參考指標(biāo)。在接下來(lái)的研究中，將通過(guò)對(duì)比不同類型菊花的抗鹽性，為鹽堿地菊花種植提供科學(xué)依據(jù)。