范治云，譚會(huì)萍，李志坤，陳 峰，祝清芬*

（山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，山東 濟(jì)南 250101；2. 濟(jì)南市第三人民醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250132）

高血脂是指血中膽固醇或甘油三脂過高或高密度脂蛋白膽固醇過低，是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的主要因素，是心腦血管病發(fā)生發(fā)展的危險(xiǎn)因素[1-3]，由于其發(fā)病緩慢漸進(jìn)具有隱匿的特性，臨床上被稱為“隱形殺手”。因此控制血脂于正常水平，可預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的形成及發(fā)展，有效地控制或預(yù)防心血管病的發(fā)生。高脂血癥患者除了增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)、飲食調(diào)節(jié)外，還服用藥物治療[4]；有輔助降血脂功效的保健食品也可用于輔助治療。本文采用大鼠混合型高脂血癥模型對(duì)修凈膠囊的輔助降血脂功能進(jìn)行評(píng)價(jià)研究，以期為修凈膠囊在輔助降血脂功能保鍵食品的開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料和方法

1.1 受試物

修凈膠囊，性狀：內(nèi)容物為棕色粉末的硬膠囊，規(guī)格：0.4 g/粒，批號(hào)：20141225，由煙臺(tái)博奧生物科技公司提供。每日食用量為2.4 g。保存條件：置陰涼干燥通風(fēng)處。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)SD雄性大鼠50只，體重180～206 g，購自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司，許可證號(hào)：SCXK（魯）20140007。飼養(yǎng)環(huán)境：屏障級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，許可證號(hào)：SYXK（魯）2013 0012。溫度：20～26 ℃，日溫差≤3 ℃，濕度：40 %～70 %，換氣次數(shù)：≥10次/h。照明時(shí)間：12 h明暗交替。

1.3 高脂模型飼料

在大鼠維持飼料基礎(chǔ)上添加20 % 蔗糖、15 %豬油、1.002 %膽固醇、0.2 %膽酸鈉、適量磷酸氫鈣、酪蛋白、石粉等，由北京科澳協(xié)力飼料有限公司生產(chǎn)，許可證號(hào)：SCXK（京）2014-0012。

1.4 主要儀器

7220型日立生化分析儀，日本日立公司；甘油三酯測(cè)定試劑盒（GPO-PAP法）、總膽固醇測(cè)定試劑盒（CHOD-PAP法）、低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定試劑盒（CAT法）、高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定試劑盒（CAT法），四川邁克生物科技有限公司。

1.5 方法

1.5.1 動(dòng)物造模 采用混合型高脂血癥動(dòng)物模型進(jìn)行試驗(yàn)[5]。按體重隨機(jī)分成2組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對(duì)照組，40只給予模型飼料作為模型組。給予飼料1周后，2組大鼠不禁食眼內(nèi)眥采血，分離血清，測(cè)定血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。根據(jù)TC水平將模型組隨機(jī)分成修凈膠囊低、中、高3個(gè)劑量組和模型對(duì)照組。

1.5.2 分組給藥 設(shè)修凈膠囊低、中、高劑量分別為0.2，0.4，0.8 g/kg，相當(dāng)于人體推薦量的5，10，20倍劑量。臨用前用0.5 %羧甲基纖維素鈉溶液配制相應(yīng)濃度的受試物溶液。各組大鼠灌胃體積為20 ml/kg，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予同等體積的0.5 %羧甲基纖維素鈉溶液，每天灌胃1次，連續(xù)30 d。空白對(duì)照組繼續(xù)給予維持飼料，模型對(duì)照組及3個(gè)劑量組繼續(xù)給予高脂飼料，并每周稱一次體重，根據(jù)體重調(diào)整給藥量。

1.5.3 指標(biāo)檢測(cè) 于試驗(yàn)結(jié)束時(shí)（第31天）不禁食采血，分離血清，測(cè)定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 修凈膠囊對(duì)大鼠體重的影響

各組大鼠生長良好，體重均表現(xiàn)逐漸增長趨勢(shì)。與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠體重明顯增加（P＜0.05或P＜0.01），提示高脂飼料可能導(dǎo)致大鼠體重增加；與模型組比較，3個(gè)劑量組動(dòng)物體重均未見顯著性差異（P＞0.05），表明修凈膠囊對(duì)大鼠的體重?zé)o顯著影響。見表1。

表1 修凈膠囊對(duì)大鼠體重的影響（±s，n=10)

表1 修凈膠囊對(duì)大鼠體重的影響（±s，n=10)

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 空白對(duì)照組。

?組別 劑量/g·kg-1 給藥前/g 第1周/g 第2周/g 第3周/g 第4周/g空白對(duì)照組 0 255±16 268±23 317±29 344±35 366±34模型對(duì)照組 0 258±10 295±14* 358±19** 383±21* 393±19低劑量組 0.2 256±17 282±24 337±37 373±46 390±42中劑量組 0.4 250±8 277±28 347±21 380±26 396±23高劑量組 0.8 252±10 280±16 333±26 355±29 374±28

2.2 修凈膠囊對(duì)大鼠血脂的影響

喂飼模型飼料7 d后，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組及各劑量組血清TG和血清TC均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01，見表2）；給藥結(jié)束，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組血清TG、血清TC和LDL-C均顯著升高（P＜0.01，見表3），表明混合型高脂血癥動(dòng)物模型成立。

表2 給予修凈膠囊前大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

表2 給予修凈膠囊前大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

注: *P＜0.05，**P＜0.01 vs 空白對(duì)照組。

組別 劑量/g·kg-1 TC/mmol·L-1 TG/mmol·L-1 LDL-C/mmol·L-1 HDL-C/mmol·L-1空白對(duì)照組 0 2.56±0.56 1.54±0.32 0.30±0.07 0.66±0.14模型對(duì)照組 0 4.06±0.77** 3.79±1.48** 0.44±0.16 0.66±0.11低劑量組 0.2 4.18±1.04** 3.30±0.81** 0.46±0.14* 0.71±0.07中劑量組 0.4 4.12±0.87** 3.56±1.03** 0.46±0.15* 0.65±0.07高劑量組 0.8 4.27±1.06** 3.79±1.09** 0.44±0.12 0.68±0.13

給予修凈膠囊30 d后，與模型對(duì)照組比較，0.8 g/kg劑量組血清TC和血清TG顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；0.4，0.8 g/kg 劑量組LDL-C顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），同時(shí)3個(gè)劑量組血清高密度脂蛋白無明顯變化（P＞0.05）。顯示受試樣品輔助降低血脂功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。

表3 給予修凈膠囊30d后大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

表3 給予修凈膠囊30d后大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 空白對(duì)照組；#P＜0.05，##P＜0.01 vs 模型對(duì)照組。

組別 劑量/g·kg-1 TC/mmol·L-1 TG/mmol·L-1 LDL-C/mmol·L-1 HDL-C/mmol·L-1空白對(duì)照組 0 2.02±0.30 1.94±0.85 0.19±0.05 0.69±0.11模型對(duì)照組 0 3.90±0.89** 3.75±0.68** 0.44±0.12** 0.51±0.08低劑量組 0.2 3.78±0.74 3.40±0.68 0.37±0.07 0.54±0.11中劑量組 0.4 3.68±0.47 2.89±0.95 0.34±0.05# 0.53±0.11高劑量組 0.8 3.08±0.72# 2.38±1.00## 0.30±0.08## 0.52±0.09

3 討論與結(jié)論

修凈膠囊是以葛根提取物、紅曲、山楂提取物為主要原料，經(jīng)粉碎、混合等工藝而制成的保健食品。葛根為藤本植物野葛的塊狀根，近現(xiàn)代研究表明葛根提取物中含有葛根素、大豆苷元、葛根皂苷等多種活性成分，具有調(diào)節(jié)心血管、緩解風(fēng)寒感冒癥狀及解酒護(hù)肝等藥理作用[6-7]；山楂為藥食同源植物，含有黃酮類、 黃烷及其聚合物類、三萜類和有機(jī)酸類等多種化學(xué)成分，具有調(diào)節(jié)血脂、保肝、降壓、助消化、強(qiáng)心、抗氧化、抗腫瘤、抗菌等作用[8-9]；紅曲是我國傳統(tǒng)的食藥兩用發(fā)酵產(chǎn)品，廣泛用于食品和藥物等多個(gè)個(gè)領(lǐng)域，有學(xué)者從紅曲中分離得到了兩個(gè)降血脂活性成分：洛伐他汀和豆甾醇[10]。

本文參照國食藥監(jiān)?；痆2012]107號(hào)“關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評(píng)價(jià)方法等9個(gè)保健功能評(píng)價(jià)方法的通知”附件6《輔助降低血脂功能評(píng)價(jià)方法》，建立了混合型高脂血癥大鼠動(dòng)物模型。并在此基礎(chǔ)上研究了修凈膠囊對(duì)大鼠血脂水平的影響。結(jié)果顯示，給予修凈膠囊30 d，0.8 g/kg劑量能顯著降低大鼠血清TC和血清TG；0.4，0.8 g/kg劑量能顯著降低大鼠血清LDL-C，同時(shí)對(duì)血清HDL-C水平無顯著影響。表明修凈膠囊有一定的輔助降血脂功能，本試驗(yàn)為其開發(fā)為降血脂保健產(chǎn)品提供了理論依據(jù)。