朱倩倩 胡妍

嵊泗縣市場(chǎng)監(jiān)督管理檢驗(yàn)檢測(cè)中心 浙江舟山 202450

1 傳統(tǒng)檢測(cè)方法

1.1 瓊脂平板培養(yǎng)法

瓊脂平板培養(yǎng)法包括選擇性培養(yǎng)基檢測(cè)方法和顯色培養(yǎng)基檢測(cè)方法。選擇性培養(yǎng)基檢測(cè)方法利用不同微生物化學(xué)物質(zhì)及其敏感度的差異性，在瓊脂平板培養(yǎng)基中，加入具有抑制效果的化學(xué)制劑，可對(duì)某種微生物的生長(zhǎng)產(chǎn)生一定影響，從而對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。顯色培養(yǎng)基檢測(cè)方法利用生物化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，在瓊脂平板培養(yǎng)基中適當(dāng)?shù)募尤爰?xì)菌特異性酶顯色物質(zhì)，從而使其所檢測(cè)的菌群發(fā)生顏色的變化，根據(jù)所呈現(xiàn)的變化情況判斷該物質(zhì)的數(shù)量以及存在狀況檢測(cè)微生物種類，這種方法是目前檢測(cè)食品微生物致病菌最常見的傳統(tǒng)方法之一。調(diào)查結(jié)果顯示，檢測(cè)過程中存在部分微生物感染不能全部檢測(cè)出來的情況，并且所獲得的檢測(cè)結(jié)果還可能是假陰性[1]。

1.2 顯微鏡檢測(cè)方法

將待測(cè)食品中的微生物進(jìn)行富集，之后將其滴在放置好的載玻片上，用準(zhǔn)備好的蓋玻片將其蓋好后，向其中適當(dāng)?shù)奶砑酉惆赜顽R檢。

2 免疫學(xué)方法

2.1 免疫層析技術(shù)

在免疫測(cè)定技術(shù)中，免疫層析是一種新興的方式，其檢測(cè)主要是在相應(yīng)的膜毛細(xì)血管作用下，檢測(cè)的物質(zhì)發(fā)生定向移動(dòng)，且在這個(gè)過程中，有效地實(shí)現(xiàn)抗原抗體的融合、固化和分離，最后根據(jù)顏色的變化來判斷食品的合格性。但是據(jù)目前的調(diào)查結(jié)果來看，最受歡迎以及應(yīng)用最多的是金免疫層技術(shù)，它所應(yīng)用的范圍非常廣泛，所涉及的食品行業(yè)也非常多。與其他技術(shù)相比較，金免疫層技術(shù)操作簡(jiǎn)易，且不會(huì)造成任何污染。另外該技術(shù)在沙門氏菌、布氏桿菌的檢測(cè)方面，也取得了良好的效果[2]。

2.2 免疫磁珠技術(shù)

免疫磁珠法將磁珠微球技術(shù)與免疫化學(xué)技術(shù)進(jìn)行有效地結(jié)合，具有快速性和高效性。

2.3 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)主要是將放射免疫技術(shù)和熒光技術(shù)相結(jié)合，同時(shí)應(yīng)用該技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，必須要將其具有的抗原抗體特異性充分利用起來，另外將免疫酶進(jìn)行染色，可有效實(shí)現(xiàn)食品微生物的快速檢測(cè)目標(biāo)。

2.4 免疫熒光技術(shù)

免疫熒光技術(shù)能夠?qū)κ称分泻械幕钚钥乖w進(jìn)行熒光標(biāo)記，肉眼是觀察不到其熒光所在的，只有在相應(yīng)的顯微鏡下才能觀察到其熒光，從而有效地對(duì)食品微生物進(jìn)行快速的檢測(cè)。

2.5 乳膠凝集試驗(yàn)

乳膠凝集試驗(yàn)獲得的結(jié)果比較直觀的，其主要是通過在抗體上被大分子乳膠顆粒標(biāo)記，同時(shí)又和待測(cè)的微生物發(fā)生凝集的現(xiàn)象，以此來達(dá)到檢測(cè)的目的。這種方法在免疫檢測(cè)中是比較常見的一種，且檢測(cè)效果十分可觀。

3 分子生物學(xué)檢測(cè)法

PCR技術(shù)與基因芯片技術(shù)為生物分子技術(shù)中的兩大代表性技術(shù)。以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，簡(jiǎn)稱PCR）為例，該技術(shù)模仿DNA的天然復(fù)制過程，對(duì)不同物質(zhì)中的微生物進(jìn)行測(cè)量。采用該方法檢測(cè)，首先需對(duì)DNA進(jìn)行變性，使其形成單鏈DNA[3]。在此基礎(chǔ)上，經(jīng)退火、延伸等過程，既可得到最終的檢測(cè)結(jié)果。當(dāng)前，部分PCR擴(kuò)增區(qū)較短。因此，Taq酶的活性，對(duì)DNA復(fù)制時(shí)間的影響較為有限。將PCR技術(shù)，應(yīng)用到食品微生物檢測(cè)過程中，同樣能夠使檢測(cè)效率得以提升。與傳統(tǒng)的鏡檢法相比，優(yōu)勢(shì)顯著。

4 細(xì)菌計(jì)數(shù)法

4.1 流式法

流式法主要是指充分利用激光技術(shù)識(shí)別細(xì)胞的濃度。流式法主要流程如下：①選擇好檢測(cè)樣品，之后通過激光進(jìn)行照射。②檢測(cè)者要時(shí)刻對(duì)樣品的變化進(jìn)行密切觀察，看是否存在著反射現(xiàn)象。③詳細(xì)分析檢測(cè)的樣品，其中包括細(xì)胞的大小以及和散射光之間的聯(lián)系、激光亮度和細(xì)胞膜的抗原強(qiáng)度之間的密切關(guān)系。④得出最終結(jié)果，并且進(jìn)行詳細(xì)的記錄。合理地應(yīng)用流式法，不但能夠?qū)⑽⑸锏男螤钸M(jìn)行快速的檢測(cè)，同時(shí)對(duì)于所含有的菌群數(shù)量也依然能夠準(zhǔn)確的檢測(cè)出來。

4.2 固定式計(jì)數(shù)法

固定式計(jì)數(shù)法也是常見的檢測(cè)方法之一，又被稱為SPC計(jì)數(shù)方法，這項(xiàng)技術(shù)方法具體應(yīng)用于單個(gè)微生物或者革蘭氏陰性菌的檢測(cè)，這個(gè)方法與其他的檢測(cè)方法相比更準(zhǔn)確。

5 傳感器檢測(cè)方法

5.1 基因傳感器法

基因傳感器法主要是在傳感器上固定一個(gè)已知核苷酸序列的DNA分子單鏈，同時(shí)要讓其和另一條相關(guān)的DNA單鏈雜交，從而有效的構(gòu)成一條新的雙鏈DNA，這樣能夠?qū)⑽锢硇盘?hào)通過換能器準(zhǔn)確地反映以及傳達(dá)出來?；騻鞲衅魉鶓?yīng)有的優(yōu)勢(shì)是具有較高的靈敏性以及在操作上是比較容易操作的?，F(xiàn)如今我國(guó)所呈現(xiàn)的基因傳感器是多種多樣的，但是主要將其概括為石英晶體振蕩器以及電極電化學(xué)式基因傳感器2種。

5.2 生物傳感器

應(yīng)用生物傳感器進(jìn)行有效的檢測(cè)，主要是將被測(cè)物質(zhì)放在生物接收器的敏感材料上，同時(shí)出現(xiàn)一系列的化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象，所表現(xiàn)的現(xiàn)象可能是顏色以及離子強(qiáng)度發(fā)生了改變，或者有強(qiáng)烈的信號(hào)發(fā)出。這個(gè)生物傳感器所具有的優(yōu)點(diǎn)就是靈敏度較高。

6 結(jié)語(yǔ)

食品是人們生活的基礎(chǔ)，所以食品的檢測(cè)已經(jīng)成為了目前國(guó)家重點(diǎn)關(guān)注的問題，但在生產(chǎn)的過程中總是由于各種外在的因素導(dǎo)致食品中有剩余的微生物細(xì)菌存留，而這些細(xì)菌是肉眼觀察不出來的，所以需要采用進(jìn)行微生物檢測(cè)，食品檢測(cè)中合理的引用快速檢測(cè)方法，可有效提升食品的檢測(cè)效率。