郭惠東，田京江，萬(wàn)魯長(zhǎng)，任鵬飛，任海霞，曲 玲，黃春燕，張柏松**

（1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部廢棄物基質(zhì)化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250100；2.德州市蔬菜辦公室，山東 德州 253012）

草菇［Volvariella volvacea（Bull.ex.Fr.）Sing.］，又名苞腳菇、貢菇、蘭花菇、中國(guó)菇，分類(lèi)上隸屬于真菌界擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota） 傘菌目（Agaricales） 光 柄 菇 科 （Pluteaceae） 小 苞 腳 菇 屬（Volvariella）[1]。草菇主要分布于中國(guó)、韓國(guó)、日本、泰國(guó)、新加坡、馬來(lái)西亞和印度等亞洲國(guó)家的熱帶和亞熱帶高溫多雨地區(qū)，其栽培原料來(lái)源廣，是生產(chǎn)成本低、周期短、效益高的草腐性大型真菌。草菇子實(shí)體肉質(zhì)肥嫩爽口、營(yíng)養(yǎng)豐富且具有較高的保健價(jià)值和藥用價(jià)值[2-3]，深受?chē)?guó)內(nèi)外消費(fèi)者的青睞，市場(chǎng)前景廣闊。但由于草菇現(xiàn)有品種抗逆性和抗病性差，配方復(fù)雜多變且不精準(zhǔn)，基質(zhì)發(fā)酵工藝滯后，基料的理化性狀不適，出菇管理和環(huán)境管控措施粗放，濫用劇毒、高殘留農(nóng)藥等原因，導(dǎo)致草菇競(jìng)爭(zhēng)性雜菌污染嚴(yán)重，病蟲(chóng)害高發(fā)且逐年加重，全國(guó)每年浪費(fèi)20%以上的栽培基質(zhì)，直接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)100億元以上[4]。病蟲(chóng)害高發(fā)已成為草腐性食用菌健康發(fā)展的短板和瓶頸，也制約了現(xiàn)代菌業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和農(nóng)業(yè)供給側(cè)結(jié)構(gòu)性改革的進(jìn)展。近年來(lái)，在草菇抗病性和抗逆性菌株篩選、栽培配方優(yōu)化、基質(zhì)發(fā)酵工藝、新型覆土材料等方面進(jìn)行了病蟲(chóng)害防控的關(guān)鍵技術(shù)研究[5-6]，效果顯著?，F(xiàn)將草菇病蟲(chóng)害防控的研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供 試 菌 株 為 V1296、 V733、 V37、 VSD-1、V35、V10，共6個(gè)草菇菌株，分別由福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心和山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所微生物室保存提供。以上菌株均為我國(guó)北方地區(qū)特別是山東及其周邊省份的主推品種。

1.2 改良豬糞渣和新型覆土材料的制備

從養(yǎng)殖場(chǎng)收集新鮮、無(wú)霉變、無(wú)雜質(zhì)的豬糞，經(jīng)水洗后加入除臭去粘改性劑，攪拌均勻后使固體、液體分離，得到的固形物經(jīng)自然晾曬發(fā)酵后制成改良豬糞渣[7]。新型覆土材料由田園細(xì)土和改良牛糞渣組成。田園細(xì)土應(yīng)挖取土表0.3 m以下無(wú)根、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)污染的清潔土壤，打碎暴曬2 d～5 d后過(guò)7目～10目篩，篩成直徑在0.5 cm～1 cm的細(xì)小土粒備用。備用的田園細(xì)土和改良豬糞渣按2:1的比例（質(zhì)量比）充分混勻，制備成新型覆土材料。新型覆土材料空隙度高、結(jié)構(gòu)疏松、持水性強(qiáng)、團(tuán)粒結(jié)構(gòu)好且穩(wěn)定，pH適中，含少量腐殖質(zhì)（5%～10%） 和臭味假單胞桿菌等有益微生物菌群，且成本低廉。

1.3 輕簡(jiǎn)化發(fā)酵工藝

輕簡(jiǎn)化發(fā)酵工藝相對(duì)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是1種新型發(fā)酵工藝，發(fā)酵過(guò)程分為一次發(fā)酵（鼓風(fēng)增氧）階段和二次發(fā)酵（通蒸汽巴氏消毒）階段，具有發(fā)酵時(shí)間短、發(fā)酵效果好、勞動(dòng)強(qiáng)度低、提質(zhì)增效等優(yōu)點(diǎn)。具體方法為：按照配方把栽培主料玉米芯、麥秸、稻草或玉米秸稈碾壓后，提前1 d～2 d用1%石灰水預(yù)濕，濾去多余水分后與畜禽糞便、生石灰、輕質(zhì)碳酸鈣、硫酸鈣或餅肥等其他輔料充分混勻，調(diào)節(jié)含水量至65%～70%。選取地勢(shì)較高、地面平坦硬化、遠(yuǎn)離污染源的場(chǎng)地建設(shè)下寬1.5 m～2.0 m、上寬1.0 m～1.5 m、高1.0 m～1.5 m、長(zhǎng)度不限的長(zhǎng)形料堆。在料堆的底部間隔適當(dāng)距離縱向平行埋入2根直徑為15 cm～20 cm的PVC管，在PVC管的上部料堆端向內(nèi)0.5 m處開(kāi)始打直徑2 cm左右的通氣孔，孔徑由近至遠(yuǎn)逐漸增大，遠(yuǎn)端至料堆端0.5 m處封堵氣道，PVC管的另一端接5 kW的鼓風(fēng)機(jī)。然后從料堆側(cè)面向料堆底部PVC管處每隔2 m打1排直徑5 cm的通氣孔，必要時(shí)用薄膜或草苫覆蓋料堆并壓實(shí)周邊。通過(guò)鼓風(fēng)機(jī)間歇式通風(fēng)增氧調(diào)控料溫，使料溫保持在65℃左右，1 d～2 d后翻堆1次，3 d～4 d完成一次發(fā)酵[8-9]。一次發(fā)酵結(jié)束后，PVC管外端通入蒸汽進(jìn)入二次發(fā)酵，間歇式通風(fēng)和蒸汽，待料溫達(dá)到60℃時(shí)保持8 h～10 h（巴氏消毒），整個(gè)發(fā)酵結(jié)束。

1.4 病蟲(chóng)害的檢測(cè)與計(jì)算方法

草菇病害主要包括發(fā)菌期病害和子實(shí)體生長(zhǎng)期（出菇期）病害。其中發(fā)病程度（發(fā)病率）的計(jì)算方法為：處理區(qū)內(nèi)發(fā)病面積（或發(fā)病子實(shí)體個(gè)數(shù)）占同一處理區(qū)總面積（或同一處理區(qū)子實(shí)體總數(shù)）的比率；蟲(chóng)害程度的檢測(cè)與計(jì)算方法為：各處理區(qū)用60目防蟲(chóng)網(wǎng)完全隔離，形成密閉空間，空間內(nèi)均勻分布懸掛3張～5張粘蟲(chóng)黃板，檢測(cè)統(tǒng)計(jì)每個(gè)密閉空間內(nèi)黃板上的蟲(chóng)頭總數(shù)。抗蟲(chóng)率（P，%）公式為：

式中：n1表示對(duì)照區(qū)活蟲(chóng)頭數(shù)；n2表示其他處理區(qū)活蟲(chóng)頭數(shù)。

病蟲(chóng)害發(fā)生程度調(diào)查均統(tǒng)計(jì)前2潮菇，3次重復(fù)取平均值。

1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法

1.5.1 抗病性和抗逆性草菇菌株優(yōu)選試驗(yàn)

供試菌株的母種培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基；原種和栽培種培養(yǎng)基均為：棉籽皮86%、麩皮10%、石灰2%、輕質(zhì)碳酸鈣1%、石膏1%，含水量65%左右；栽培料配方為：改良豬糞渣50%、小麥秸稈40%、輕質(zhì)碳酸鈣1%、石膏1%、生石灰8%，含水量70%。對(duì)初選的6個(gè)草菇菌株進(jìn)行活化、復(fù)壯、擴(kuò)繁，然后挑選剛發(fā)滿菌且長(zhǎng)勢(shì)旺盛、純度高、菌齡一致的菌種用于出菇栽培試驗(yàn)。

本試驗(yàn)采取層架式床栽出菇模式，利用輕簡(jiǎn)化發(fā)酵技術(shù)對(duì)栽培料進(jìn)行發(fā)酵，使用新型覆土材料進(jìn)行覆土，每個(gè)品種設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)10 m2，隨機(jī)排列，統(tǒng)計(jì)前2潮菇總產(chǎn)量取平均值，計(jì)算子實(shí)體生物轉(zhuǎn)化率并進(jìn)行差異顯著性分析。在其他出菇管理措施完全一致的情況下觀察并記錄各菌株栽培料菌絲生長(zhǎng)速度、長(zhǎng)勢(shì)、菌膜厚度、子實(shí)體性狀和抗病抗逆效果[10]。

1.5.2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與輕簡(jiǎn)化發(fā)酵工藝防控草菇病害效果試驗(yàn)

本試驗(yàn)供試菌株為V1296，覆土采用新型覆土材料，在基質(zhì)配方、出菇管理措施完全一致的條件下，以傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)為對(duì)照，比較2種不同發(fā)酵處理工藝對(duì)基料發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵效果、菌絲長(zhǎng)勢(shì)、發(fā)菌期雜菌污染率與出菇期病害發(fā)生率的影響。每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)10 m2，隨機(jī)排列。1.5.3 新型覆土材料防控草菇病蟲(chóng)害效果試驗(yàn)

待菌絲長(zhǎng)滿料面時(shí)應(yīng)及時(shí)覆土。覆土材料配方設(shè)3個(gè)處理，分別為處理T1（CK）：傳統(tǒng)田園細(xì)土，應(yīng)挖取土表0.3 m以下無(wú)根、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)污染的清潔土壤，打碎暴曬2 d～5 d后過(guò)7目～10目篩；處理T2：草炭土與田園細(xì)土按質(zhì)量比1:2混合，打碎暴曬2 d～5 d后過(guò)篩，篩成直徑在0.5 cm～1 cm的細(xì)小土粒。處理T3：新型覆土材料，制備方法見(jiàn)1.2。供試菌株為V1296，采取新型輕簡(jiǎn)化發(fā)酵工藝對(duì)基質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，在其他栽培條件一致的情況下觀察并記錄不同覆土材料處理對(duì)草菇出菇時(shí)間、病蟲(chóng)害危害程度、產(chǎn)量和商品性的影響。每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)10 m2，隨機(jī)排列。統(tǒng)計(jì)前2潮菇總產(chǎn)量取平均值，并對(duì)各處理產(chǎn)量進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同草菇菌株抗病性和抗逆性優(yōu)選試驗(yàn)結(jié)果

不同草菇菌株抗病性和抗逆性優(yōu)選試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同菌株生物學(xué)特性對(duì)產(chǎn)量、抗病性和抗逆性影響Tab.1 Effects of biological characteristics of different strains on yield,disease resistance and stress resistance

由表1可知，草菇不同菌株菌絲長(zhǎng)勢(shì)、生長(zhǎng)速度、出菇時(shí)間、子實(shí)體顏色和個(gè)體大小與其抗病抗逆無(wú)直接相關(guān)性，發(fā)菌期有無(wú)厚垣孢子和子實(shí)體菌膜厚度決定了草菇菌株的抗病性和抗逆性。菌絲有厚垣孢子且數(shù)量較多、子實(shí)體菌膜越厚，抗病性和抗逆性就越強(qiáng)。其中菌株V1296、V733、V35發(fā)菌期污染率分別為1.50%、1.70%、1.55%，出菇期病害發(fā)生率均為2.5%，產(chǎn)量較高且無(wú)顯著性差異；其次為菌株V37、V10，菌株VSD-1發(fā)菌期污染率和出菇期病害發(fā)生率均最高，分別為3.0%和5.0%，且產(chǎn)量也最低。

2.2 不同發(fā)酵工藝對(duì)草菇病害防控效果

發(fā)酵技術(shù)是草菇乃至所有草腐性食用菌栽培的關(guān)鍵技術(shù)之一，栽培料發(fā)酵質(zhì)量直接影響草菇發(fā)菌期和出菇期的病害發(fā)生率進(jìn)而影響草菇的栽培產(chǎn)量與效益。不同發(fā)酵工藝防控草菇病害效果見(jiàn)表2。

由表2可以看出，傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中間厭氧層較多，發(fā)酵不均勻、不徹底，有刺激性氣味，如氨味和糞臭味，菌絲長(zhǎng)勢(shì)弱。發(fā)菌期污染率、出菇期病害發(fā)生率分別高達(dá)5%和10%。發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng)、勞動(dòng)強(qiáng)度大，產(chǎn)量低，效益差。輕簡(jiǎn)化發(fā)酵技術(shù)只翻堆1次，與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比勞動(dòng)強(qiáng)度降低了40%，發(fā)酵料棕褐色，質(zhì)地松軟有彈性，易拉斷，有濃郁的菌香味，菌絲發(fā)菌快，長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，含水量、pH和碳氮比適宜。發(fā)菌期雜菌污染率和出菇期病害發(fā)生率分別降低到1.5%和2.5%，生物轉(zhuǎn)化率較對(duì)照提高了16.3%。

2.3 不同覆土材料防控草菇病蟲(chóng)害效果

覆土是草菇栽培的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，覆土材料的好壞直接影響草菇的產(chǎn)量與品質(zhì)。覆土期是草菇發(fā)菌結(jié)

表2 新型輕簡(jiǎn)化發(fā)酵技術(shù)與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)比較Tab.2 Comparison between new light-simplified fermentation technology and traditional fermentation technology

束準(zhǔn)備進(jìn)入出菇期的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，也是進(jìn)入病蟲(chóng)害高發(fā)期的關(guān)鍵時(shí)刻，因此覆土材料和覆土技術(shù)的優(yōu)化創(chuàng)新對(duì)草菇出菇期病蟲(chóng)害的防控就顯得尤為重要。不同覆土材料防控草菇病蟲(chóng)害效果見(jiàn)表3。

表3 不同覆土材料防控草菇病蟲(chóng)害的效果Tab.3 Effects of different casing soil on prevention and control of disease and insect pests of Volvariella volvacea

由表3可知，T3處理草菇出菇早，商品性好，出菇期病害發(fā)生率、抗蟲(chóng)率分別為2.5%和95%。其產(chǎn)量也高于T1處理，差異顯著。T2處理草菇出菇時(shí)間、病害發(fā)生率與T3處理一致，但T2處理成本最高、商品性最差，其抗蟲(chóng)率和產(chǎn)量均低于T3處理。T1處理草菇出菇時(shí)間最長(zhǎng)，病害發(fā)生率最高且產(chǎn)量和商品性一般。

3 小結(jié)

供試6個(gè)草菇菌株雖然只是眾多草菇菌株的一部分，但作為我國(guó)北方地區(qū)尤其是山東及其周邊省份的主推品種，其抗病性和抗逆性卻存在差異。試驗(yàn)結(jié)果表明草菇菌株V1296、V733、V35菌絲濃白、粗壯，發(fā)菌快，長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，菌絲體厚垣孢子多，子實(shí)體中大型，呈灰白色，菌膜厚，不易開(kāi)傘，耐儲(chǔ)運(yùn)，生物轉(zhuǎn)化率高，可作為我國(guó)北方地區(qū)的首選品種。

在草菇栽培實(shí)踐中除優(yōu)選抗病性和抗逆性強(qiáng)的菌株外，栽培基料合理精準(zhǔn)配制、新型發(fā)酵技術(shù)和創(chuàng)新覆土材料等也是草菇病蟲(chóng)害防控特別是實(shí)現(xiàn)綠色防控的有效手段。試驗(yàn)結(jié)果表明通過(guò)優(yōu)選抗病品種，采用輕簡(jiǎn)化發(fā)酵工藝和新型覆土材料，通過(guò)改變基料的理化性狀和微生態(tài)環(huán)境，可將發(fā)菌期雜菌污染率、出菇期病害發(fā)生率控制在1.5%和2.5%以下，抗蟲(chóng)率達(dá)95%。