周世林 胡朝輝 丁宇星

缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)是發(fā)生率較高的新生兒疾病，對患兒腦神經(jīng)功能發(fā)育可造成嚴(yán)重的影響，近半數(shù)患兒可出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，嚴(yán)重者甚至死亡[1]，故早期診斷和準(zhǔn)確評估患兒病情嚴(yán)重程度對于有效防治HIE和選擇恰當(dāng)?shù)闹委煷胧╋@得極為重要。相關(guān)研究證實(shí)[2]，血清S100B蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)水平檢測可在一定程度上反映腦組織損傷的嚴(yán)重程度，而HIE也是導(dǎo)致新生兒腦組織損傷的重要因素，由此推測血清S100B蛋白、NSE可應(yīng)用于HIE的早期診斷及病情嚴(yán)重程度評估方面，因此本研究擬予以探討，從而有助于新生兒HIE的防治工作。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇大冶市人民醫(yī)院新生兒科2015年2月—2017年12月期間住院治療的85例HIE患兒作為研究對象，根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)將65例HIE患兒分為輕度HIE組(27例)、中度HIE組(28例)及重度HIE組(30例)，同期選擇30例正常新生兒作為對照組。本研究方案已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審核和批準(zhǔn)。

1.2 病例入選及排除標(biāo)準(zhǔn)

病例入選標(biāo)準(zhǔn)：患兒根據(jù)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查均符合HIE診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，所有患兒及正常新生兒家屬均知情本項(xiàng)研究內(nèi)容并簽署同意書，胎齡>35周，新生兒出生體重≥2 000 g。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：入院治療未滿6 h即死亡或要求自動(dòng)出院放棄治療，合并有宮內(nèi)感染、腦發(fā)育嚴(yán)重異常、高膽紅素血癥、顱內(nèi)出血和酸堿電解質(zhì)平衡紊等情況的新生兒。

1.3 觀察指標(biāo)及檢測方法

分別在正常新生兒出生后24 h時(shí)及HIE患兒出生后24 h、72 h及7 d時(shí)抽取外周靜脈血液2 mL，3 000 r/min離心處理15 min，留取上層血清后采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平，采用相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)在HIE患兒及正常新生兒出生后24 h時(shí)進(jìn)行新生兒神經(jīng)行為測定(neonatal behavioral neurological assessment, NBNA)評分[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件予以分析，多組間計(jì)量資料比較采用方差分析，兩兩比較采用q檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，血清S100B蛋白、NSE水平與NBNA評分相關(guān)性分析采用Pearson法，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組臨床資料比較

各組在性別、胎齡、出生體重及分娩方式等方面比較無顯著性差異(P>0.05)，見表1。

表1 各組臨床資料比較

注：各組臨床資料比較，P>0.05

2.2 各組血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平及NBNA評分比較及相關(guān)性分析

各組HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平明顯高于對照組(P<0.05)，而NBNA評分明顯低于對照組(P<0.05)，且隨著病情加重，HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平明顯升高而NBNA評分明顯降低(P<0.05)，血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平與NBNA評分呈負(fù)相關(guān)性關(guān)系(r=-0.625, -0.597,P<0.05)。

表2 各組血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平及NBNA評分比較及相關(guān)性分析

注：與對照組比較，1)P<0.05；重度、中度HIE組與輕度HIE組比較，2)P<0.05；重度HIE組與中度HIE組比較，3)P<0.05。

圖1 各組血清S100B蛋白表達(dá)水平比較

圖2 各組血清NSE表達(dá)水平及NBNA評分比較

2.3 不同時(shí)間點(diǎn)各組HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平變化比較

不同時(shí)間點(diǎn)各組HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平均存在明顯差異性(P<0.05)，且隨著病情加重，各組HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平明顯升高(P<0.05)，隨著時(shí)間延長，各組HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)，見表3。

表3 不同時(shí)間點(diǎn)各組HIE患兒血清S100B蛋白、NSE表達(dá)水平變化比較

注：重度、中度HIE組與輕度HIE組比較，1)P<0.05；重度HIE組與中度HIE組比較，2)P<0.05；與前一時(shí)間點(diǎn)比較，3)P<0.05

圖3 不同時(shí)間點(diǎn)各組HIE患兒血清S100B蛋白表達(dá)水平變化比較

圖4 不同時(shí)間點(diǎn)各組HIE患兒血清NSE表達(dá)水平變化比較

3 討論

HIE可導(dǎo)致新生兒智力發(fā)育遲緩、腦癱、癲癇等較多神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，對患兒以后的生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響。目前臨床尚缺乏敏感的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)，僅依靠臨床癥狀、體格檢查難以作出早期診斷，從而喪失最佳的治療時(shí)機(jī)[5]。通過腦電圖及神經(jīng)系統(tǒng)功能評定雖然可對HIE患兒病情嚴(yán)重程度作出評估，但易受到患兒精神狀態(tài)及身體健康程度等因素的影響，缺乏必要的客觀性[6]。

NSE是糖酵解生理途徑中的關(guān)鍵酶，特異性存在于機(jī)體神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi)，可有效避免神經(jīng)細(xì)胞受到缺氧、缺血等病理改變的損傷，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷或死亡后，腦脊液和血液循環(huán)中的NSE表達(dá)水平明顯升高，是臨床判斷腦神經(jīng)細(xì)胞壞死的敏感實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[7-8]。有研究證實(shí)[9]，NSE在診斷腦組織損傷和評估疾病預(yù)后方面具有重要的臨床價(jià)值，且指標(biāo)升高程度與腦組織損傷的嚴(yán)重程度之間存在正相關(guān)性關(guān)系。本研究顯示，HIE患兒血清NSE表達(dá)水平明顯高于對照組(P<0.05)，且隨著病情加重明顯升高而隨著時(shí)間延長明顯降低(P<0.05)，與NBNA評分呈負(fù)相關(guān)性關(guān)系(P<0.05)，此結(jié)果提示血清NSE可用于早期診斷新生兒HIE，且與HIE患兒病情嚴(yán)重程度有明顯的相關(guān)性關(guān)系。分析原因在于HIE新生兒腦神經(jīng)元受到缺血、缺氧等因素?fù)p傷，使得NSE大量釋放和滲入至腦脊液中，血-腦脊液屏障保護(hù)系統(tǒng)破壞后，NSE隨之進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)中，最終導(dǎo)致血清NSE表達(dá)水平明顯升高[10]。除了與腦神經(jīng)細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷因素以外，HIE患兒血清NSE水平升高還與NSE合成和分泌明顯增加有關(guān)。但處于缺氧、缺血病理狀態(tài)時(shí)，腦細(xì)胞能量代謝出現(xiàn)明顯異常，使得調(diào)控NSE合成的基因表達(dá)水平顯著性升高，進(jìn)而導(dǎo)致NSE合成與分泌總量增加，以維持自身的正常功能。

S100B蛋白也是一種神經(jīng)組織蛋白質(zhì)分子，主要存在于中樞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中，腦組織損傷早期階段，由于腦神經(jīng)元出現(xiàn)壞死導(dǎo)致S100B大量釋放至腦脊液中，血-腦脊液屏障保護(hù)系統(tǒng)破壞后可進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)中，故血清S100B可特異性和敏感反映患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的嚴(yán)重程度[11-13]。國外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)[14]，腦損傷大鼠血清S100B蛋白表達(dá)水平與腦組織損傷嚴(yán)重程度呈正相關(guān)性關(guān)系，采

取積極有效治療后臨床癥狀明顯改善，且血清S100B蛋白表達(dá)水平明顯降低。本研究顯示，HIE患兒血清S100B蛋白表達(dá)水平明顯高于對照組(P<0.05)，且隨著病情加重明顯升高而隨著時(shí)間延長明顯降低(P<0.05)，與NBNA評分呈負(fù)相關(guān)性關(guān)系(P<0.05)，此結(jié)果提示血清S100B蛋白可用于早期診斷新生兒HIE，且與HIE患兒病情嚴(yán)重程度有明顯的相關(guān)性關(guān)系，與上述研究相一致。

綜上所述，血清S100B蛋白、NSE在新生兒HIE早期診斷及病情嚴(yán)重程度評估中具有重要的臨床價(jià)值。