■ 文｜清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 陳金輝 冼昶華

清遠(yuǎn)市農(nóng)業(yè)科技推廣服務(wù)中心 李永峰

清遠(yuǎn)市清城區(qū)畜牧水產(chǎn)服務(wù)中心 梁熾強(qiáng)

清遠(yuǎn)市綠之源漁業(yè)科技有限公司 戴惠田

在中國(guó)，很多地區(qū)都具有悠久的稻魚養(yǎng)殖歷史。稻魚共生系統(tǒng)是清遠(yuǎn)傳統(tǒng)農(nóng)耕文化的重要組成部分。在清遠(yuǎn)北部山區(qū)縣，稻田養(yǎng)魚已有上千年的歷史悠久。在長(zhǎng)期的養(yǎng)殖與自然選擇過程中，清遠(yuǎn)稻田鯉魚品種逐步形成了區(qū)別本地野生鯉魚及其它鯉魚品種的形態(tài)特征：頭小、尾小、尾柄短、軀干部側(cè)扁、身高體長(zhǎng)比大、特色金黃等。本文以其體色和體型特征似金元寶，我們將體型特化的清遠(yuǎn)稻田鯉魚取名為清遠(yuǎn)金元鯉。

本研究嘗試以清遠(yuǎn)金元鯉為親本，使用人工催產(chǎn)等技術(shù)手段開展清遠(yuǎn)金元鯉的規(guī)模化繁殖，采用人工催產(chǎn)等技術(shù)為輔助手段的現(xiàn)代化人工繁殖方式，為清遠(yuǎn)金元鯉的選育保種、魚稻共生農(nóng)旅文產(chǎn)業(yè)的發(fā)展建立必要的技術(shù)基礎(chǔ)。

1.材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

清遠(yuǎn)金元鯉采自清遠(yuǎn)連南瑤族自治縣香坪鎮(zhèn)稻田鯉魚核心養(yǎng)殖區(qū)，共采集0.5年齡左右的金元鯉830尾。

1.2 主要試劑

注射用絨促性素（HCG）購(gòu)買自寧波第二激素廠。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 親本飼養(yǎng)

采集的金元鯉親本飼養(yǎng)在清遠(yuǎn)清城區(qū)清遠(yuǎn)市水產(chǎn)技術(shù)推廣站石板基地土池內(nèi)（土池面積為 4.5畝，每畝使用750千克生石灰干法消毒），每天按金元鯉體重的5.0%～8.0%定時(shí)定量投喂配合飼料，早上（9:00～9:30）投喂總量的60%，下午（16:30～17:00）投喂總量的40%。

1.3.2 親本選擇

在人工催產(chǎn)前2～3天，進(jìn)行拉網(wǎng)，首先選出頭小、尾小、體色金黃、性成熟的清遠(yuǎn)金元鯉個(gè)體，然后對(duì)選出個(gè)體的身高、體長(zhǎng)兩項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)量計(jì)算，以身高體長(zhǎng)比達(dá)到0.5000以上的性成熟金元鯉雌雄魚作為親本，雌雄比為1:1。將挑選出的親本飼養(yǎng)在循環(huán)水產(chǎn)卵池。

1.3.3 人工催產(chǎn)

在 4月份，當(dāng)室外水溫達(dá)到15℃以上時(shí)，進(jìn)行催產(chǎn)。催產(chǎn)方式為一次催產(chǎn)（雌雄魚均只催產(chǎn)一次），設(shè)置三種激素濃度：雌雄魚均在下午15:00～16:00注射 HCG，雌魚注射量分別為700IU/kg、1000IU/kg、1300IU/kg，雄魚減半。催產(chǎn)后雌雄魚按照1∶1的比例放置于清水產(chǎn)卵池（水溫16～21℃）。以水葫蘆作為魚巢，將水葫蘆布設(shè)在產(chǎn)卵池水面（密度為水葫蘆占水面總面積的20%～30%）。使用微孔增氧方式和循環(huán)水增氧方式進(jìn)行增氧。

1.3.4 受精與孵化

采用一次注射激素催產(chǎn)方式進(jìn)行催產(chǎn)，使用自然受精方式進(jìn)行受精。在第一條雌魚產(chǎn)卵2小時(shí)后，將所有的親本撈出，使用循環(huán)水和微孔增氧方式進(jìn)行增氧孵化。

1.3.5 開口餌料制備

蛋黃餌料的制備：生雞蛋煮熟后，將蛋黃取出，并用三層紗布裹住，在裝有清水的桶中反復(fù)擠壓，制備得到蛋黃懸渾液，即蛋黃餌料。

1.3.6 魚苗培育

在魚苗孵化后的第二天，開始使用蛋黃懸渾液進(jìn)行飼喂。在孵化后第10天，將魚苗轉(zhuǎn)入土池飼養(yǎng)（10萬(wàn)尾/畝）。

2.結(jié)果

2.1 親本身高體長(zhǎng)比

隨機(jī)選取性成熟的清遠(yuǎn)金元鯉雌雄各20條，測(cè)量身高和體長(zhǎng)并計(jì)算身高體長(zhǎng)比，數(shù)據(jù)顯示，與普通鯉魚（身高體長(zhǎng)比一般小于 0.4）相比較，清遠(yuǎn)金元鯉在普遍具有較大身高體長(zhǎng)比的同時(shí)，也有一部份個(gè)體的身高體長(zhǎng)比特征出現(xiàn)了弱化。（見表1）

2.2 催產(chǎn)與孵化效果

在16～20℃的條件下，使用三種不同濃度的 HCG對(duì)雌雄鯉魚進(jìn)行人工催產(chǎn)。結(jié)果顯示，這三種濃度（700IU/kg、1000IU/kg、1300IU/kg）的 HCG激素分別在注射激素后的22h、19h、15h能促進(jìn)雌性清遠(yuǎn)金元鯉魚在布設(shè)有魚巢（水葫蘆）的產(chǎn)卵池中產(chǎn)卵。使用本實(shí)驗(yàn)中的三種不同濃度的 HCG激素，催產(chǎn)率均能達(dá)到100%。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，在沒有布設(shè)魚巢的情況下，雌性清遠(yuǎn)金元鯉在注射HCG激素（1000IU/kg）36h內(nèi)均不會(huì)產(chǎn)卵。

排卵3h后，通過對(duì)魚卵發(fā)育情況的觀察與統(tǒng)計(jì)，雌魚 HCG注射量分別為700IU/kg、1000IU/kg、1300IU/kg時(shí)，受精率分別為92.12%、93.24%、91.86%，孵化率分別是 88.65%、87.36%、85.39%，存活率分別是83.25%、82.47%、82.16%。

2.3 子代身高體長(zhǎng)比

通過對(duì) F1代95條個(gè)體身高、體長(zhǎng)的測(cè)量及身高體長(zhǎng)比的計(jì)算，結(jié)果顯示，身高體長(zhǎng)比處于 0.5000及以上區(qū)間的清遠(yuǎn)金元鯉占比為 49.31%，身高體長(zhǎng)比處于 0.4500～0.4999區(qū)間的雌雄清遠(yuǎn)金元鯉占比分別為41.10%，身高體長(zhǎng)比處于 0.4000～0.4499區(qū)間的雌雄清遠(yuǎn)金元鯉占比分別為8.22%，身高體長(zhǎng)比處于0.3999及以下區(qū)間的雌雄清遠(yuǎn)金元鯉占比分別為1.37%。

表1 清遠(yuǎn)金元鯉親本身高體長(zhǎng)比分析

3.討論

3.1 清遠(yuǎn)金元鯉親本身高體長(zhǎng)比

清遠(yuǎn)金元鯉的形態(tài)特征為頭小、尾小、尾柄短、軀干部側(cè)扁、身高體長(zhǎng)比大、特色金黃等。通過對(duì)清遠(yuǎn)金元鯉身高體長(zhǎng)比數(shù)據(jù)的分析，發(fā)現(xiàn)清遠(yuǎn)金元鯉具有較大身高體長(zhǎng)比的同時(shí)，也有一部份個(gè)體的身高體長(zhǎng)比特征出現(xiàn)了弱化。這說明清遠(yuǎn)金元鯉已經(jīng)在形態(tài)特征方面出現(xiàn)了特化，這種特化是人工選擇和自然選擇的結(jié)果。表現(xiàn)為：在植株網(wǎng)格化分布的稻田里，較短的體型更有利于它在稻田里網(wǎng)格化的水稻植株間穿梭游動(dòng)，且這種體型的鯉魚較普通鯉魚躍水能力弱。

稻田鯉魚形態(tài)特征特化在郭梁等人的研究中也有報(bào)道，部分個(gè)體出現(xiàn)特征弱化的現(xiàn)象可能受外來普通鯉魚、鯽魚種的污染。一些魚苗培育廠為了經(jīng)濟(jì)效益，選用較大體重的外來鯉魚與鯽魚（如沅江鯉、日本白鯽）進(jìn)行雜交育苗。另外，通過對(duì)清遠(yuǎn)金元鯉身高體長(zhǎng)比數(shù)據(jù)的分析發(fā)現(xiàn)，不同性別的個(gè)體在身高體長(zhǎng)比區(qū)間的分布具有較為一致的趨勢(shì)。這可能是因?yàn)榍暹h(yuǎn)金元鯉身高體長(zhǎng)形態(tài)特征不表現(xiàn)為性別上的差異。

3.2 人工催產(chǎn)與自然受精

本實(shí)驗(yàn)使用三種不同濃度（700IU/kg、1000IU/kg、1300IU/kg）的HCG對(duì)雌雄清遠(yuǎn)金元鯉進(jìn)行人工催產(chǎn)，催產(chǎn)率均能達(dá)到100%。這三種不同濃度對(duì)清遠(yuǎn)金元鯉催產(chǎn)效果的差別主要體現(xiàn)在效應(yīng)時(shí)間的不同。在沒有布設(shè)魚巢的情況下，清遠(yuǎn)金元鯉在注射激素36h內(nèi)均不能自然排卵。這表明合適的卵附著物的存在是清遠(yuǎn)金元鯉產(chǎn)卵的一種重要誘導(dǎo)物質(zhì)。在三種不同濃度（700IU/kg、1000IU/kg、1300IU/kg）的 HCG誘導(dǎo)組中，使用自然受精方式進(jìn)行受精，受精率沒有顯著性差別，這說明本實(shí)驗(yàn)所使用的三種不同濃度HCG激素對(duì)清遠(yuǎn)金元鯉受精率沒有顯著的影響。

3.3 人工孵化、開口餌料和存活率

三組不同 HCG注射濃度實(shí)驗(yàn)組魚苗存活率是 83.25%、82.47%、82.16%，沒有顯著性差別。本實(shí)驗(yàn)使用蛋黃懸濁液作為清遠(yuǎn)金元鯉的開口餌料。通過對(duì)魚苗存活率的分析，三個(gè)不同激素濃度實(shí)驗(yàn)組的存活率均達(dá)到 80%以上。這種較高的存活率已經(jīng)完全可以滿足實(shí)際生產(chǎn)育苗過程的要求。因此，在生產(chǎn)上，蛋黃懸濁液可作為清遠(yuǎn)金元鯉的開口餌料。

3.4 子代F1身高體長(zhǎng)比

在F1代中，身高體長(zhǎng)比處于0.5000及以上區(qū)間的清遠(yuǎn)金元鯉占比為 49.31%，比親代統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)上升20%以上。這說明本實(shí)驗(yàn)所選用的選擇育種方法適用于清遠(yuǎn)金元鯉新品種的選育。在育種后代中，部分個(gè)體出現(xiàn)身高體長(zhǎng)比下降的原因可能是因?yàn)榭刂魄暹h(yuǎn)金元鯉身高體長(zhǎng)特征的基因機(jī)制屬于多基因控制機(jī)制。在有性生殖的過程中，染色體隨機(jī)配對(duì)，使得后代在身高體長(zhǎng)特征方面出現(xiàn)分化。因此，為大規(guī)模培育具有較大身高體長(zhǎng)比、更適合稻田養(yǎng)殖的清遠(yuǎn)金元鯉，有必要進(jìn)行清遠(yuǎn)金元鯉的進(jìn)一步選擇育種：以 F1代身高體長(zhǎng)比較大個(gè)體為親本，進(jìn)一步培育純合的清遠(yuǎn)金元鯉新品種。