曾芳彥，彭夏培，肖敏，金錢倩，羅濤

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬武漢中心醫(yī)院，武漢430000)

急性腦梗死是由腦組織局部血液供應(yīng)突然減少或者停止，引起腦組織缺血、缺氧而致組織軟化、壞死所致，常伴有不同程度的神經(jīng)功能缺損[1]。該病具有起病急、病情兇險(xiǎn)、致殘率和致死率高的特點(diǎn)。頸動(dòng)脈粥樣硬化是引起急性腦梗死的重要病因，粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定或者斑塊破裂阻塞血管腔，使動(dòng)脈血流量明顯減少，最終引發(fā)急性腦梗死[2]。載脂蛋白A1(apoA-1)由243個(gè)氨基酸殘基組成，是高密度脂蛋白的主要組成部分。apoA-1具有抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化的功能[3]。抗載脂蛋白A1抗體(抗apoA-1 IgG)是apoA-1的自身抗體，可抑制apoA-1功能而引起高密度脂蛋白失調(diào)，進(jìn)而參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，抗apoA-1 IgG通過介導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化而參與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展[4]?；|(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員，是可降解細(xì)胞外基質(zhì)的鋅依賴性蛋白酶。研究顯示，MMP-9在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成及破裂過程中發(fā)揮重要作用[5]。本研究通過檢測(cè)血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平，探討二者在急性腦梗死患者頸動(dòng)脈硬化發(fā)病中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2016年9月～2018年3月本院神經(jīng)內(nèi)科收治的急性腦梗死患者100例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①CT或MRI檢查證實(shí)為急性腦梗死，并符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》中關(guān)于急性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②首次發(fā)病，且發(fā)病至入院時(shí)間<1周。排除標(biāo)準(zhǔn)：①心功能不全；②肝、腎功能障礙；③急、慢性炎癥性疾?。虎苎合到y(tǒng)疾?。虎葑陨砻庖咝约膊。虎迱盒阅[瘤；⑦2周內(nèi)有創(chuàng)傷史或行外科手術(shù)；⑧入組前1個(gè)月內(nèi)服用過免疫抑制劑、類激素類藥物等。根據(jù)彩色多普勒超聲檢查的頸動(dòng)脈內(nèi)-中膜厚度(IMT)將患者分為頸動(dòng)脈粥樣硬化組(IMT≥1.00 mm，n=72)和頸動(dòng)脈正常組(IMT<1.00 mm，n=28)，根據(jù)斑塊性質(zhì)將頸動(dòng)脈粥樣硬化組分為穩(wěn)定型斑塊組(n=39)，不穩(wěn)定型斑塊組(n=33)。穩(wěn)定型斑塊組男20例、女19例，年齡(57.92±8.92)歲，BMI(24.35±2.27)kg/m2；不穩(wěn)定型斑塊組男18例、女15例，年齡(59.07±8.16)歲，BMI(23.98±2.54)kg/m2；頸動(dòng)脈正常組男17例、女11例，年齡(56.79±8.57)歲，BMI(25.02±2.60)kg/m2。同期選取體檢健康者30例作為對(duì)照組，男16例、女14例，年齡(58.34±9.24)歲，BMI(24.67±2.52)kg/m2。各組性別、年齡、BMI具有可比性。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，研究對(duì)象及家屬均簽署知情同意書。

1.2 頸動(dòng)脈超聲檢查 采用EPIQ-7型彩色多普勒超聲診斷儀(飛利浦投資有限公司)對(duì)患者雙側(cè)頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)段和球部、IMT、血管管腔內(nèi)徑進(jìn)行檢查。其中IMT是指管腔和血管內(nèi)膜交點(diǎn)的垂直距離，以頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)段、球部，頸內(nèi)動(dòng)脈近段三個(gè)位點(diǎn)IMT的平均值為IMT最終值。同時(shí)評(píng)估IMT厚度及粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性。其中IMT<1.00 mm為頸動(dòng)脈正常，IMT≥1.00 mm為頸動(dòng)脈粥樣硬化，根據(jù)斑塊性質(zhì)將其分為穩(wěn)定型斑塊和不穩(wěn)定型斑塊。

1.3 血清抗apoA-1 IgG、MMP-9檢測(cè) 清晨采集各組空腹肘靜脈血5 mL，常溫條件下以3 000 r/min離心5 min，收集上清液置于-70 ℃環(huán)境中保存，待檢。用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清抗apoA-1 IgG、MMP-9?？筧poA-1 IgG試劑盒由北京百奧萊博科技有限公司提供，MMP-9試劑盒由艾萊薩生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行相關(guān)操作。

2 結(jié)果

2.1 各組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比較 各組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；穩(wěn)定型斑塊組、不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于頸動(dòng)脈正常組、對(duì)照組(P均<0.05)，且不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于穩(wěn)定型斑塊組(P均<0.05)。見表1。

表1 各組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比較

2.2 急性腦梗死患者血清抗apoA-1 IgG水平與MMP-9的相關(guān)性 經(jīng)Pearson積矩相關(guān)分析，急性腦梗死患者血清抗apoA-1 IgG水平與MMP-9呈正相關(guān)(r=0.672，P<0.05)。

2.3 血清抗apoA-1 IgG、MMP-9對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)測(cè)價(jià)值 抗apoA-1 IgG的AUC為0.837，95%CI(0.740，0.899)，最佳截?cái)嘀禐?.57 μg/mL，靈敏度、特異度分別為0.87、0.91，準(zhǔn)確度為0.83；MMP-9的AUC為0.816，95%CI(0.725，0.879)，最佳截?cái)嘀禐?.97 ng/mL，靈敏度、特異度分別為0.81、0.77，準(zhǔn)確度為0.79；抗apoA-1 IgG聯(lián)合MMP-9的AUC為0.938，95%CI(0.839，0.982)，靈敏度、特異度分別為0.93、0.95，準(zhǔn)確度為0.89。

3 討論

急性腦梗死是臨床常見的腦血管疾病，發(fā)病率高，并呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅人們健康和生命質(zhì)量，頸動(dòng)脈粥樣硬化是其重要誘因。姚漢云等[7]研究結(jié)果顯示，約68.5%急性腦梗死患者有頸動(dòng)脈斑塊，其中33.3%為不穩(wěn)定型斑塊；而Kitamura等[8]研究結(jié)果顯示，較頸動(dòng)脈不伴粥樣硬化斑塊患者而言，伴粥樣硬化斑塊患者發(fā)生腦梗死的風(fēng)險(xiǎn)增加3倍，提示斑塊破裂后暴露血管壁膠原以及脂質(zhì)，引起血小板聚集，造成凝血功能障礙，血栓形成導(dǎo)致血液供應(yīng)減少，發(fā)生腦梗死?？梢姡i動(dòng)脈斑塊在動(dòng)脈粥樣硬化所致的急性腦梗死發(fā)病過程中具有重要作用[9]。尋找靈敏度高、特異度好且與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)的指標(biāo)，對(duì)輔助診斷急性腦梗死及評(píng)估病情嚴(yán)重程度有重要意義。

抗apoA-1 IgG與氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能障礙及炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，并且參與了心血管疾病的發(fā)病過程，增加了患者血栓事件的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[10]。此外，研究表明，抗apoA-1 IgG是連接動(dòng)脈粥樣硬化與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性之間的重要活性介質(zhì)，用抗apoA-1 IgG被動(dòng)免疫小鼠模型，動(dòng)脈粥樣硬化以及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性明顯增加[11]。推測(cè)其機(jī)制可能與抗apoA-1 IgG使血流中的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)至動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，并使斑塊穩(wěn)定性減弱而增加其易損性有關(guān)[12]。MMP屬于鈣離子和鋅離子依賴性蛋白酶，參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病理生理過程，MMP-9是MMP家族成員之一，是一種分解細(xì)胞外基質(zhì)的多源糖蛋白，主要由中性粒細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞合并并分泌。MMP-9主要作用于Ⅳ型、Ⅴ型明膠原，而Ⅴ型明膠原是粥樣斑塊底膜以及纖維帽的重要成分[13]。研究顯示，MMP-9在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成、破裂過程中發(fā)揮重要作用，其機(jī)制主要為激活Ⅴ型明膠酶原，并誘導(dǎo)其進(jìn)入平滑肌細(xì)胞而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的破裂；MMP-9使覆蓋在斑塊表面的纖維帽遭到破壞，降低斑塊的穩(wěn)定性，增加斑塊易損性[14～18]。

關(guān)于抗apoA-1 IgG、MMP-9在急性腦梗死發(fā)病過程中的作用，目前相關(guān)研究相對(duì)較少。本研究發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定型斑塊組和不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于頸動(dòng)脈正常組、對(duì)照組，且不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平最高，提示抗apoA-1 IgG、MMP-9與頸動(dòng)脈粥樣硬化程度密切相關(guān)，可作為評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化程度的重要指標(biāo)。該結(jié)果同時(shí)提示，抗apoA-1 IgG、MMP-9誘發(fā)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，并加速斑塊的破裂而致組織動(dòng)脈灌注障礙，血供不足導(dǎo)致腦梗死發(fā)生。Pearson積矩相關(guān)分析急性腦梗死患者血清抗apoA-1 IgG與MMP-9呈正相關(guān)，提示抗apoA-1 IgG與MMP-9協(xié)同作用介導(dǎo)頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程，進(jìn)而參與急性腦梗死的發(fā)病，其作用機(jī)制需進(jìn)一步研究證實(shí)。

采用AUC評(píng)估血清抗apoA-1 IgG與MMP-9對(duì)急性腦梗死頸動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)測(cè)價(jià)值，結(jié)果顯示抗apoA-1 IgG與MMP-9對(duì)急性腦梗死頸動(dòng)脈粥樣硬化具有較好的預(yù)測(cè)價(jià)值，進(jìn)一步分析顯示，抗apoA-1 IgG聯(lián)合MMP-9對(duì)急性腦梗死頸動(dòng)脈粥樣硬化預(yù)測(cè)的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度更高。提示早期聯(lián)合檢測(cè)可明顯提高預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，血清抗apoA-1 IgG與MMP-9通過參與頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程而介導(dǎo)急性腦梗死的發(fā)病，二者聯(lián)合檢測(cè)可作為預(yù)測(cè)頸動(dòng)脈粥樣硬化的重要生物標(biāo)志物。