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仔豬腹瀉病原菌的分離與鑒定

2018-10-21 15:45逯海峰
關(guān)鍵詞:藥敏試驗(yàn)沙門(mén)氏菌腹瀉

逯海峰

摘 要 2017年7月,45日齡仔豬出現(xiàn)了食欲減退、消瘦、嚴(yán)重腹瀉,個(gè)別發(fā)病仔豬出現(xiàn)死亡。為了確定引起仔豬腹瀉死亡的病原,通過(guò)膠體金試紙條檢測(cè)豬瘟、偽狂犬、圓環(huán)、藍(lán)耳抗原為陰性。無(wú)菌采集病死仔豬的肝臟、心血、肺臟等病料組織中分離得到了2株病原菌,分別命名為XJ-1株和XJ-2株,通過(guò)培養(yǎng)特性、形態(tài)學(xué)觀(guān)察、生化特性檢測(cè)、等等方法對(duì)分離到的2株病原菌進(jìn)行鑒定,結(jié)果顯示,1株為沙門(mén)氏菌,另1株為大腸桿菌。對(duì)2株病原菌用口服方式攻毒小白鼠驗(yàn)證其致病性,結(jié)果顯示,對(duì)2株病原菌均有很強(qiáng)的致病性。用K-B藥敏紙片法對(duì)2株病原菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)分析其耐藥性,結(jié)果表明,2株病原菌均對(duì)恩諾沙星、阿米卡星、頭孢克肟、頭孢曲松、氟苯尼考4種藥物敏感,對(duì)其他的藥物存在不同程度的耐藥性。

關(guān)鍵詞 仔豬;腹瀉;致病性大腸桿菌;沙門(mén)氏菌;藥敏試驗(yàn)

隨著我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展,豬的養(yǎng)殖數(shù)量越來(lái)越多,逐漸形成了規(guī)?;⒓s化養(yǎng)殖模式,豬的健康養(yǎng)殖越來(lái)越來(lái)越受到養(yǎng)殖戶(hù)的重視。在養(yǎng)豬的過(guò)程中,仔豬的腹瀉病越來(lái)越嚴(yán)重,豬瘟、偽狂犬、圓環(huán)、藍(lán)耳病、致病性大腸桿菌病、沙門(mén)氏菌、綠膿桿桿菌多種病毒性和細(xì)菌性疾病均能能引起仔豬的嚴(yán)重腹瀉,其中,致病性大腸桿菌和雞沙門(mén)氏菌引起仔豬腹瀉為臨床多發(fā),成為臨床上仔豬常見(jiàn)病,感染率和死亡率均較高,嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展 [1-2]。

仔豬大腸桿菌病是由某些特定血清型的致病性大腸桿菌所引起的仔豬以腹瀉為主傳染性疾病,主要包括仔豬黃痢、仔豬白痢和仔豬水腫病3種疾病,其中,仔豬大腸桿菌病在臨床上以仔豬白痢和仔豬黃痢較為常見(jiàn),危害仔豬最為嚴(yán)重[3]。仔豬沙門(mén)菌病是由沙門(mén)菌屬的豬霍亂沙門(mén)菌、鼠傷寒沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌等不同血清型的沙門(mén)氏菌株引起的一種仔豬的高熱傳染病,1~4月齡的仔豬多發(fā),急性為敗血癥,慢性為壞死性腸炎[4-6]。近年來(lái),致病性大腸桿菌和沙門(mén)氏菌混合感染引起仔豬腹瀉問(wèn)題日益嚴(yán)重,尤其當(dāng)混合感染時(shí),發(fā)病率和死亡率都較高,不易控制,在治療時(shí),應(yīng)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)分析耐藥性,合理用藥。

1 仔豬腹瀉臨床癥狀

仔豬突然發(fā)生腹瀉,排出漿(糊)狀糞便,呈乳白、灰白、黃白色,偶有綠色,有時(shí)糞中帶有氣泡,氣味腥臭,肛門(mén)失禁,初期腹瀉次數(shù)少,精神沉郁,腰背拱起,行動(dòng)遲緩,被毛粗亂無(wú)光,體表不潔,肛門(mén)周?chē)?、尾根染糞,食欲減退,喜飲冷水,發(fā)育遲滯。病程長(zhǎng)者達(dá)一周以上,短者2~3天,雖能自行康復(fù),但多因嚴(yán)重脫水、營(yíng)養(yǎng)障礙而成僵豬。

2 仔豬腹瀉剖檢變化

對(duì)腹瀉死亡仔豬進(jìn)行剖檢,觀(guān)察病理學(xué)變化,剖檢可見(jiàn)死仔豬胃黏膜潮紅腫脹,以幽門(mén)部最明顯,上附黏液,胃內(nèi)充有凝乳塊,少數(shù)嚴(yán)重病例胃黏膜有出血點(diǎn)。肝和膽囊稍腫大。心冠狀溝脂肪膠樣浸潤(rùn),心肌柔軟。腸黏膜潮紅,腸內(nèi)容物呈黃白色,稀粥狀,有酸臭味,有的腸管空虛或充滿(mǎn)氣體,腸壁菲薄而透明。嚴(yán)重病例黏膜有出血點(diǎn)及部分黏膜表面脫落。腸系膜淋巴結(jié)腫大。腎臟呈蒼白色

3 病毒性疾病的檢測(cè)

采集病死仔豬的心血分離血清,按照豬瘟、偽狂犬、圓環(huán)、藍(lán)耳抗原膠體金試紙條說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,豬瘟、偽狂犬、圓環(huán)、藍(lán)耳抗原膠體金檢測(cè)為陰性。

4 細(xì)菌分離培養(yǎng)

無(wú)菌采集病死仔豬的肝臟、心血、肺臟等病料組織,分別接種于麥康凱培養(yǎng)基上和SS瓊脂培養(yǎng)基上,37℃恒溫培養(yǎng)12h后,結(jié)果顯示, 1株在SS瓊脂培養(yǎng)基長(zhǎng)出了周?chē)鸁o(wú)色半透明,部分中間帶黑色菌落,革蘭氏染色結(jié)果顯示,分離菌株為中等大小、兩端略圓的直桿狀革蘭氏陰性菌。另1株在麥康凱培養(yǎng)基上長(zhǎng)出了濕潤(rùn)的、邊緣光滑整齊、粉紅色菌落。蘭氏染色鏡檢結(jié)果,呈兩端鈍圓革蘭氏陰性桿狀菌。與報(bào)道沙門(mén)氏菌和大腸桿菌的培養(yǎng)特性和形態(tài)特征一致

5 分離菌株的生化鑒定

1株發(fā)酵麥芽糖、甘露醇、葡萄糖、枸櫞酸鹽; 不發(fā)尿素、酵乳糖、蔗糖;吲哚試驗(yàn)呈陰性,產(chǎn)生H2S,被鑒定為沙門(mén)氏菌,另1株能分解鼠李糖、麥芽糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇;木糖和阿拉伯糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,V-P試驗(yàn)呈陰性,吲哚和甲基紅反應(yīng)成陽(yáng)性,被鑒定為大腸桿菌。

6 致病性試驗(yàn)

2株能致死小白鼠,對(duì)死亡的小鼠剖檢后進(jìn)行分離鑒定,結(jié)果顯示,2組所分離菌株與大腸桿菌和沙門(mén)氏菌一致。對(duì)照組小白鼠健康存活,因而,證實(shí)了2株病原菌具有很強(qiáng)的致病性。

7 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

對(duì)分離的2株病原菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),按照美國(guó)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)推薦的標(biāo)準(zhǔn)K-B紙片法進(jìn)行試驗(yàn)操作和結(jié)果判斷。結(jié)果顯示,大腸桿菌和沙門(mén)氏菌均對(duì)恩諾沙星、阿米卡星、頭孢克肟、頭孢曲松、氟苯尼考4種藥物敏感;沙門(mén)氏菌株對(duì)大觀(guān)霉素、林可霉素、慶大霉素3種藥物中敏,大腸桿菌對(duì)林可霉素、氧氟沙星2種藥物中敏。

8 小結(jié)

從無(wú)菌采集病死仔豬體內(nèi)分離到了2株病原菌,被鑒定為沙門(mén)氏菌和大腸桿菌。2株病原菌均有很強(qiáng)的致病性。藥敏結(jié)果表明,2株病原菌均對(duì)恩諾沙星、阿米卡星、頭孢克肟、頭孢曲松、氟苯尼考4種藥物敏感,對(duì)其他的藥物存在不同程度的耐藥性。

參考文獻(xiàn):

[1]陳茹. 陜西某豬場(chǎng)仔豬腹瀉病原菌的分離鑒定[D].西北農(nóng)林科技大學(xué),2015.

[2]王斌,任偉,王青虎. 仔豬腹瀉的病原鑒定與綜合防治措施[J]. 畜禽業(yè),2015,(01):4-5.

[3]李心海,王兵,張林吉,遲蘭.豬大腸桿菌病病原的鑒定及藥敏試驗(yàn)研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī),2014,(08):75-76.

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