孫云龍 龐 博 褚 穎

(長春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，吉林 長春 130117)

交泰丸出自明代韓懋所著《韓氏醫(yī)通》，其以黃連與肉桂為方，兩藥配比為10∶1〔1〕。泰，卦象之一，水上火下。陰陽失乖，水火不濟(jì)，人病失眠，可予交泰丸。本方雖簡，但其配伍獨(dú)特，黃連味苦性寒，主入心經(jīng)，肉桂辛甘大熱，主入腎經(jīng)，二者寒熱相伍，清溫并用，致以心腎相交，水火相濟(jì)，具解郁、安神之功效，臨床上用于治療各種嚴(yán)重失眠、心悸、多夢易醒等癥，且療效顯著〔2～4〕。本文擬評價(jià)交泰丸對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用和對記憶障礙的改善作用。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小白鼠〔由長春生物制品研究所有限公司提供，SCXK(吉)-2015-0003〕，雌雄各半，體質(zhì)量為(20±2)g。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑 交泰丸藥粉(由實(shí)驗(yàn)室自配，黃連∶肉桂為10∶1，為未成丸的棕色粉末，實(shí)驗(yàn)時(shí)用生理鹽水配至所需濃度)。戊巴比妥鈉(中國醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司，批號：F20170816)，棗仁安神膠囊(市售，無生藥量以藥粉量為準(zhǔn)，貴州同濟(jì)堂制藥有限公司，批號：20170207)，硝酸士的寧注射液(2 mg/ml，北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司，批號：170821)，東莨菪堿(0.5 mg/ml，上海禾豐制藥有限公司，批號23160911)。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器 xzc-4型小動(dòng)物自主活動(dòng)測定儀(牡丹江中華電器廠)，SDT-8M跳臺實(shí)驗(yàn)視頻分析儀(上海洛維生物科技有限公司)。

1.4對小鼠自主活動(dòng)的影響 以棗仁安神膠囊為陽性對照藥，其臨床用量為2.25 g·70 kg-1·d-1，小鼠按9.1倍給藥，為0.17 g·kg-1·d-1。將小鼠按性別和體重隨機(jī)分為5組，每組10只。分別為對照組(生理鹽水)、棗仁安神膠囊組(0.17 g·kg-1·d-1)、交泰丸低劑量組(2.0 g·kg-1·d-1)、交泰丸中劑量組(4.0 g·kg-1·d-1)、交泰丸高劑量組(8.0 g·kg-1·d-1)。以0.1 ml·10 g-1·d-1的給藥劑量灌胃給藥，連續(xù)7 d。末次給藥1 h后，小鼠分別放入多功能自主活動(dòng)記錄儀中，待其適應(yīng)3 min后，記錄5 min內(nèi)的自主活動(dòng)次數(shù)〔5〕。

1.5對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響 分組與給藥同1.4。末次給藥1 h后，腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，觀察記錄睡眠持續(xù)時(shí)間(翻正反射消失至恢復(fù)的時(shí)間)〔6〕。

1.6對閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠率的影響 分組與給藥同1.4。末次給藥1 h后，按28 mg/kg劑量腹腔注射戊巴比妥鈉閾下劑量，注射劑量為0.1 ml/10 g，給藥后15 min內(nèi)小鼠翻正反射消失達(dá)1 min以上的小鼠數(shù)量為入睡指標(biāo)。

1.7對硝酸士的寧誘發(fā)小鼠驚厥的影響 選苯妥英鈉為陽性對照藥。將小鼠按性別和體重隨機(jī)分為6組，每組10只。分別為對照組(生理鹽水)、模型組、苯妥英鈉組(78 mg·kg-1·d-1)、交泰丸低劑量組(2.0 g·kg-1·d-1)、交泰丸中劑量組(4.0 g·kg-1·d-1)、交泰丸高劑量組(8.0 g·kg-1·d-1)。以0.1 ml·10 g-1·d-1的給藥劑量灌胃給藥，連續(xù)7 d。末次給藥1 h后，除對照組外，各組按15.0 mg/kg腹腔注射硝酸士的寧，注射劑量為0.1 ml/10 g，觀察驚厥潛伏期和存活時(shí)間〔7,8〕。驚厥以小鼠發(fā)生強(qiáng)直性跳躍為指標(biāo)，驚厥的潛伏期為從給硝酸士的寧開始到小鼠第一次出現(xiàn)驚厥的時(shí)間(20 min之內(nèi)未出現(xiàn)驚厥潛伏期計(jì)為20 min)。記錄注射硝酸士的寧后存活時(shí)間(20 min之內(nèi)未死亡計(jì)為20 min)。

1.8交泰丸對東莨菪堿所致記憶獲得障礙的影響 以他克林為陽性對照藥〔9〕。將小鼠按性別和體重隨機(jī)分為6組，每組10只。分別為對照組(生理鹽水)、模型組、他克林組(20 mg·kg-1·d-1)、交泰丸低劑量組(2.0 g·kg-1·d-1)、交泰丸中劑量組(4.0 g·kg-1·d-1)、交泰丸高劑量組(8.0 g·kg-1·d-1)。以0.1 ml·10 g-1·d-1的給藥劑量灌胃給藥，連續(xù)7 d。學(xué)習(xí)和認(rèn)知記憶功能反映了大腦的更高整合功能，其功能下降甚至喪失是腦老化的重要標(biāo)志〔10〕。跳臺法方法簡單，指標(biāo)便于觀察，實(shí)驗(yàn)周期短，所以常被用于藥物的篩選。末次給藥20 min后，除對照組外，各組腹腔注射東莨菪堿5 mg/kg，10 min后開始訓(xùn)練，在箱內(nèi)適應(yīng)3 min后通36 V交流電，記錄5 min內(nèi)小鼠跳下平臺遭受電擊的次數(shù)(即錯(cuò)誤次數(shù))，以此作為學(xué)習(xí)成績。24 h后開始測試其記憶保持能力。將上述刺激過的小鼠置于絕緣平臺上，隨即通電并開始計(jì)時(shí)，記錄5 min內(nèi)小鼠跳下平臺遭受電擊的次數(shù)(即錯(cuò)誤次數(shù))，以此作為記憶能力〔11〕。

1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1交泰丸對小鼠自主活動(dòng)的影響 與對照組比較，棗仁安神膠囊、交泰丸中、高劑量組自主活動(dòng)次數(shù)均有顯著性差異(P<0.05)，表明交泰丸能明顯抑制小鼠自發(fā)活動(dòng)，且其作用呈劑量依賴性降低。見表1。

2.2交泰丸對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響 與對照組比較，棗仁安神膠囊、交泰丸中、高劑量組均可延長小鼠睡眠時(shí)間(P<0.05)。見表1。

2.3交泰丸對閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠率的影響 與對照組比較，棗仁安神膠囊、交泰丸中、高劑量組能顯著增大入睡率(P<0.05)。見表1。

2.4交泰丸對硝酸士的寧誘發(fā)小鼠驚厥的影響 與對照組相比，模型組硝酸士的寧的誘導(dǎo)下，出現(xiàn)了驚厥現(xiàn)象，并發(fā)生死亡，表明造模成功。與模型組相比，苯妥英鈉組、交泰丸各劑量組可明顯延長驚厥潛伏期和存活時(shí)間(P<0.05)，表明交泰丸具有抗驚厥的作用，且呈劑量依賴性降低。見表2。

表1 交泰丸對小鼠自主活動(dòng)、閾上戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間及閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠率的影響

與對照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01，3)P<0.001

表2 交泰丸對硝酸士的寧誘發(fā)小鼠驚厥的影響

與對照組比較：1)P<0.001；與模型組比較：2)P<0.05，3)P<0.01，4)P<0.001

2.5交泰丸對東莨菪堿所致記憶獲得障礙的影響 與對照組〔(1.1±0.3)次/5 min〕相比，模型組錯(cuò)誤次數(shù)〔(3.8±0.8)次/5 min〕顯著增加(P<0.001)，表明記憶障礙模型造模成功。與模型組相比，他克林組〔(1.7±0.3)次/5 min〕與交泰丸高〔(2.5±0.5)次/5 min〕、中劑量組〔(2.8±0.9)次/5 min〕均能顯著減少錯(cuò)誤次數(shù)(P<0.01)，交泰丸低劑量組錯(cuò)誤次數(shù)為〔(3.4±0.8)次/5 min〕與模型組和對照組均無顯著差異(P>0.05)，表明中、高劑量交泰丸對東莨菪堿所致的記憶障礙具有顯著的改善效果，但效果遠(yuǎn)不如他克林，且作用呈劑量依賴性降低。

3 討 論

失眠輕則導(dǎo)致身乏疲累、記憶力減退、脾氣暴躁等癥狀，重則出現(xiàn)免疫功能紊亂，甚至誘發(fā)心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、糖尿病等疾病〔12〕。中醫(yī)認(rèn)為睡眠和營衛(wèi)有關(guān)，營衛(wèi)之氣的陰陽出入、循環(huán)運(yùn)行，是睡眠的機(jī)樞所在，而失眠的病機(jī)不外乎營衛(wèi)運(yùn)行失常和營衛(wèi)虛衰兩個(gè)方面。《靈樞》中記載“今厥氣客于五臟六腑，則衛(wèi)氣獨(dú)行于外，行于陽，不得入于陰。行于陽則陽氣盛，陽氣盛則陽蹺陷，不得入于陰，陰虛，故目不瞑”。即衛(wèi)氣日間溫煦、衛(wèi)外，但由于外邪侵犯，夜間衛(wèi)氣入里不得，則陽盛陰衰，陰陽失衡，故導(dǎo)致失眠。又或是《張氏醫(yī)通·不得臥》記載，由于病后虛弱，或是年事已高，導(dǎo)致營衛(wèi)之氣衰少，氣血陰陽相對失衡，而導(dǎo)致夜不得寐。交泰丸一方用黃連清心瀉火以制偏亢之心陽，用肉桂溫補(bǔ)下元以扶不足之腎陽；心火不熾則心陽自能下降，腎陽得扶則腎水上承自有動(dòng)力。心腎相交，水火既濟(jì)，交泰之象遂成，夜寐不寧等癥便可自除。本研究表明交泰丸有明顯的鎮(zhèn)靜安神、抗驚厥、催眠、改善記憶減退的作用，且呈劑量依賴性。