王洪銳，徐玉紅，何 英

（1.廣東省深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院，廣東 深圳 518103； 2.中山大學(xué)附屬第八醫(yī)院，廣東 深圳 518033）

藥品效期是指藥品在規(guī)定貯藏條件下，能維持其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的最大期限。每種藥品都標(biāo)示有經(jīng)藥品監(jiān)管部門批準(zhǔn)的貯藏條件及有效期，嚴(yán)格遵守藥品規(guī)定的貯藏條件，并在效期內(nèi)使用，是保證藥品安全性和有效性的重要前提。而實(shí)際情況是，市場(chǎng)上流通使用的藥品，說明書【貯藏】項(xiàng)標(biāo)示為冷處及陰涼處貯藏的藥物越來越多，而在藥品供應(yīng)、使用的終端環(huán)節(jié)，如急救車、醫(yī)院藥房備藥環(huán)節(jié)，患者出院帶藥環(huán)節(jié)及臨床配液給藥環(huán)節(jié)，很難保證藥品在貯存、使用全過程中完全符合貯藏條件[1－5]。頭孢西丁為半合成的第2代頭孢菌素類抗菌藥物，對(duì)革蘭陽性菌、革蘭陰性菌及厭氧菌均有殺滅作用，且具有高度抗β－內(nèi)酰胺酶性質(zhì)，臨床應(yīng)用廣泛。注射用頭孢西丁需遮光、密閉、在陰涼干燥處保存（不超過20℃），但醫(yī)院藥房、配液室等終端貯存、使用環(huán)節(jié)多不能滿足此貯存條件，常需要26℃空調(diào)室溫環(huán)境下短暫貯存藥品。本研究中采用藥物穩(wěn)定性長(zhǎng)期及加速試驗(yàn)方法，觀察室溫貯藏條件下注射用頭孢西丁的穩(wěn)定性，為在溫度變異條件下藥品的短期貯存管理提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀，包括G1311A四元泵、G1322A真空脫氣機(jī)、G1315B－DAD檢測(cè)器、D1316A柱溫箱，rheodyne－7725i手動(dòng)進(jìn)樣器、Chem-Station工作站（美國安捷倫公司）；UV－2201型紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；AG285型電子天平（梅特勒托利多儀器有限公司）；pHS－3C數(shù)字pH計(jì)（上海精科雷磁儀器廠）；DGX－90703B－1型電熱鼓風(fēng)干燥箱（10～250℃，溫度波動(dòng)范圍為±1℃，上海福瑪實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。

1.2 試藥

頭孢西丁對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)為130572－201102，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95.3%，供含量測(cè)定用）；注射用頭孢西?。êＤ夏持扑幱邢薰?，批號(hào)分別為 140301，140602，141001，規(guī)格為每支 2.0 g）；甲醇、乙腈均為色譜純（德國Merck公司）；其他試劑均為分析純，水為高純水。所有試劑及緩沖液使用前均經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量及有關(guān)物質(zhì)測(cè)定[6]

色譜柱：ZorbaxEclipseXDB－C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：水 －乙腈 －冰醋酸（81∶19 ∶1）；檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；流速：1.0mL ／min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)符合藥典要求。有關(guān)雜質(zhì)含量測(cè)定采用梯度洗脫法進(jìn)行。

2.2 長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)

取足夠數(shù)量3個(gè)批號(hào)的注射用頭孢西?。ㄔ囼?yàn)開始日期距離標(biāo)示生產(chǎn)日期不超過6個(gè)月），以市售原包裝形式分別貯存在18，26，30℃3個(gè)溫度條件下放置6個(gè)月，首次測(cè)定分析后每隔1個(gè)月取樣測(cè)定分析。比較含量、雜質(zhì)、酸度、澄清度和顏色變化情況，以評(píng)估注射用頭孢西丁在規(guī)定貯藏條件下和非規(guī)定貯藏條件下的質(zhì)量穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，在18℃和26℃貯存6個(gè)月后，其質(zhì)量可維持穩(wěn)定；在30℃貯存6個(gè)月后，批號(hào)為141001的藥品標(biāo)示含量不達(dá)標(biāo)，顏色及雜質(zhì)總量接近高限。結(jié)果見表1至表3。

2.3 殺菌效力試驗(yàn)

選取質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922及1株臨床分離經(jīng)生化鑒定為肺炎克雷伯菌且對(duì)頭孢西丁敏感的菌株為試驗(yàn)對(duì)象，采用常量肉湯稀釋法比較不同溫度條件下貯存0，3，6個(gè)月后3批注射用頭孢西丁最小抑菌／殺菌濃度（MIC／MBC）的變化情況。

結(jié)果各批號(hào)注射用頭孢西丁在18℃和26℃貯存6個(gè)月后，對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922及臨床分離的肺炎克雷伯菌的 MIC／MBC未發(fā)生變化；30℃貯存6個(gè)月后，批號(hào)為140602及141001的藥品在3個(gè)月或6個(gè)月時(shí)對(duì)上述菌株 MIC發(fā)生變化，但按美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（clinicaland laboratory standard institute，CLSI）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定[7]，仍在規(guī)定范圍內(nèi)。

表1 注射用頭孢西丁18℃長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.4 等溫加速試驗(yàn)

采用經(jīng)典恒溫法對(duì)注射用頭孢西丁在25℃的有效期進(jìn)行推算。分別將若干支注射用頭孢西丁置40，50，60，70℃ 4個(gè)溫度條件下，分別在設(shè)定試驗(yàn)時(shí)間（t）取樣進(jìn)行含量測(cè)定，并計(jì)算其標(biāo)示量（A）。結(jié)果見表4。得到的數(shù)據(jù)分別按0級(jí)、1級(jí)和2級(jí)化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程進(jìn)行擬合，以獲得其最佳熱降解動(dòng)力學(xué)方程。結(jié)果表明，在設(shè)定溫度范圍內(nèi)，注射用頭孢西丁熱降解可用一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程ln C＝ln C0－Kt描述。不同溫度時(shí)間條件下的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表5，各方程斜率相反數(shù)即對(duì)應(yīng)各溫度下的速率常數(shù)。根據(jù)阿侖尼烏斯（Arrhenius）公式，以速率常數(shù)（K）的自然對(duì)數(shù)（ln K）對(duì)熱力學(xué)溫度（T）的倒數(shù)作圖并進(jìn)行線性回歸，得方程lnK＝ －9 269.6／T＋19.444（R2＝0.980 7）。將溫度 20℃和25℃分別代入方程，即可推算出注射用頭孢西丁在20℃及 25℃的速率常數(shù)分別為 K20＝5.07×10－6／h，K25＝8.62×10－6／h，按濃度下降至初始濃度的 10%為有效期計(jì)算，20℃有效期為29個(gè)月，與藥品說明書標(biāo)識(shí)效期接近；25℃有效期為17個(gè)月，縮短約40%。假定初始標(biāo)示含量為100.00%，在25℃貯存約6個(gè)月后，經(jīng)推算，其標(biāo)示含量約為初始標(biāo)示含量的96.00%。

表2 注射用頭孢西丁26℃長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

表3 注射用頭孢西丁30℃長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

目前，藥品穩(wěn)定性研究文獻(xiàn)中，國內(nèi)報(bào)道基本集中在藥品研發(fā)、臨床配液使用或與其他藥品相互配伍穩(wěn)定性方面，關(guān)于市售完整包裝藥品在溫度波動(dòng)情況下的穩(wěn)定性研究基本沒有[8－10]。本研究中對(duì)需在陰涼處貯存的注射用頭孢西丁在非規(guī)定貯存溫度下的穩(wěn)定性進(jìn)行了初步研究。6個(gè)月長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，注射用頭孢西丁在26℃和30℃ 2個(gè)非規(guī)定貯存溫度條件下分別貯存6個(gè)月和3個(gè)月后，其含量、有關(guān)物質(zhì)、酸度及檢查項(xiàng)（溶液澄清度與顏色）仍符合法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，殺菌效力也未發(fā)生明顯變化，表明在此模擬貯存條件下和時(shí)限內(nèi)，頭孢西丁質(zhì)量仍相對(duì)穩(wěn)定可靠。

表4 注射用頭孢西丁不同溫度、不同時(shí)間含量測(cè)定結(jié)果（標(biāo)示含量）

表5 不同溫度時(shí)間條件下ln A－t回歸方程及相關(guān)系數(shù)

藥物有效期預(yù)測(cè)方法的理論基礎(chǔ)是化學(xué)動(dòng)力學(xué)，為預(yù)測(cè)注射用頭孢西丁在常溫條件下的穩(wěn)定性及有效期，本研究中采用經(jīng)典恒溫法對(duì)其降解規(guī)律及有效期進(jìn)行了研究和預(yù)測(cè)。結(jié)果表明，在試驗(yàn)溫度范圍內(nèi)，注射用頭孢西丁熱降解動(dòng)力學(xué)模式最符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)特征。隨著溫度逐漸升高，注射用頭孢西丁的熱降解速率常數(shù)逐漸增大，符合溫度每升高10℃，反應(yīng)速率常數(shù)增加2～4倍規(guī)律特征。研究結(jié)果證實(shí)，溫度對(duì)于注射用頭孢西丁的穩(wěn)定性有較大影響，在20℃貯存，預(yù)測(cè)效期為29個(gè)月，與說明書標(biāo)識(shí)有效期接近；25℃貯存時(shí)，預(yù)測(cè)效期為17個(gè)月，相比20℃縮短約40%。據(jù)此推測(cè)，假定標(biāo)示含量為100.00%的注射用頭孢西丁從貯存溫度條件符合規(guī)定的醫(yī)院藥庫領(lǐng)出后，在25℃貯存6個(gè)月，藥品標(biāo)示含量約為原始標(biāo)示量的96.00%，含量項(xiàng)仍符合法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，與長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)結(jié)果相符。如果按其藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)示含量為90.00%～110.00%計(jì)算，藥品可在25℃貯存6個(gè)月的前提是初始標(biāo)示量不得低于94.00%，且初始標(biāo)示含量越低，25℃對(duì)應(yīng)的貯存時(shí)間越短。在30℃溫度條件下，其推算有效期只有10個(gè)月。結(jié)果表明，溫度變化越劇烈，相應(yīng)的使用效期縮短越明顯。

本研究為注射用頭孢西丁在醫(yī)院藥房、配液室等終端短暫超規(guī)定溫度存放提供了一定的參考依據(jù)，但也存在一定的局限。如研究只對(duì)某一廠家生產(chǎn)的注射用頭孢西丁在高于規(guī)定貯存溫度條件下的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，鑒于不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的同一種藥品，工藝質(zhì)量上可能存在差異，故研究結(jié)果不能武斷推及其他生產(chǎn)廠家的注射用頭孢西??；即使同一廠家也可能存在工藝質(zhì)量穩(wěn)定性差異。對(duì)于易致過敏性的藥物，溫度變異下雜質(zhì)變化對(duì)其致敏性的影響也需要重視。雖然本研究為注射用頭孢西丁可能發(fā)生的非規(guī)定溫度條件下的貯存提供了依據(jù)，但從監(jiān)管、法律角度而言，尚無實(shí)際意義，在實(shí)際藥品貯存中應(yīng)盡可能遵守藥品說明書。

藥品的穩(wěn)定性取決于溫度、濕度等多種因素，對(duì)于完整包裝的市售藥品，溫度因素最關(guān)鍵，溫度升高常導(dǎo)致藥品降解加速、臨床療效下降，甚至毒性增加。鑒于在藥品流通運(yùn)輸、貯存及使用過程中，特別是對(duì)于需陰涼處保存的藥品，不可避免地會(huì)出現(xiàn)超出溫度上限的情況，非規(guī)定貯存溫度條件下短期貯存藥品在世界范圍內(nèi)均不可避免[1－5]。因此，對(duì)非規(guī)定貯存溫度條件下藥品質(zhì)量維持程度，如藥品的最高耐受溫度、在某一溫度范圍內(nèi)其可耐受的時(shí)間極限等進(jìn)行研究有現(xiàn)實(shí)意義[11]。