張貴強

廣西醫(yī)科大學(xué)附屬民族醫(yī)院，廣西 南寧 530001

腦小血管病是一種常見的腦血管疾病[1]。隨著影像學(xué)的不斷發(fā)展，腦小血管病的檢出率也不斷攀升[2]，目前其在我國缺血性腦血管病中占比達42.3%[3]。近年來，關(guān)于腦小血管病的研究多為危險因素分析及影像學(xué)改變，但其發(fā)病后是否存在自我保護機制以及自我保護的機制如何卻少有報道。本研究旨在通過酶聯(lián)免疫分析對腦小血管病患者的血漿血管內(nèi)皮生長因子水平進行測定，分析其變化及意義，探討其自我保護機制。

1 資料與方法

1．1臨床資料選擇2016-05—2017-06廣西醫(yī)科大學(xué)附屬民族醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的符合納入標準的腦小血管病患者83例，完善頭顱MRI+SWI檢查，根據(jù)頭顱MRI的檢查結(jié)果分為單發(fā)腔梗組和多發(fā)腔梗組合并腦白質(zhì)病變組(圖1)，并選取廣西醫(yī)科大學(xué)附屬民族醫(yī)院體檢科經(jīng)頭顱磁共振檢查無異常的健康志愿者40例為對照組。單發(fā)腔梗組39例，男22例，女17例，年齡49～68(58.72±7.34)歲；多發(fā)腔梗合并腦白質(zhì)病變組44例，男25例，女19例，年齡48～71(60.04±7.08)歲；健康志愿者對照組男20例，女20例，年齡48～69(59±6.71)歲。3組性別、年齡差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)廣西醫(yī)科大學(xué)附屬民族醫(yī)院倫理委員會批準，且所有研究對象簽署知情同意書。

圖1 入組患者MRI表現(xiàn) A：單發(fā)腔梗組；B：多發(fā)腔梗合并腦白質(zhì)病變組Figure 1 MRI manifestations of patients in the group A：single lumen infarction group；B：multilocular infarction with leukodystrophy group

1．2診斷標準目前，關(guān)于腦小血管病的診斷標準還無統(tǒng)一定論，本研究參照《中國腦小血管病診治共識》[4]并結(jié)合MRI常見表現(xiàn)制定如下標準：(1)腔隙性梗死：MRI表現(xiàn)為圓形、橢圓形或裂隙狀的腔隙灶，邊界清晰，直徑3～15 mm，T1WI呈明顯低信號，T2WI呈高信號(圖1A)。(2)腦白質(zhì)病變：表現(xiàn)為基底節(jié)區(qū)、半卵圓中心、放射冠等部位的點狀或片狀異常信號，T1WI呈等、低信號，T2WI和MRI液體衰減反轉(zhuǎn)恢復(fù)序列為高信號，病灶邊界模糊，直徑多>5 mm(圖2A)。(3)腦微出血：MRI T2WI梯度回波或SWI呈現(xiàn)出直徑2～5 mm類圓形的均勻一致低信號灶，周圍無水腫帶(圖2B)。(4)血管周圍間隙擴大：T2WI呈高信號，直徑<3 mm，圓形或線形，位于白質(zhì)和深部灰質(zhì)，明顯時T1上可見低信號(圖2C)。

1．3納入標準與排除標準納入標準：(1)具有完善的頭顱MRI和SWI資料者；(2)符合上述腦小血管病診斷標準中第1條和(或)第2條；MRI示梗死灶為單發(fā)，或多發(fā)合并腦白質(zhì)病變者；(3)無溝通交流障礙者，同意參與本研究者。排除標準：(1)磁共振檢查提示梗死灶直徑>20 mm者；(2)頭頸部CT血管造影顯示頭顱內(nèi)外大動脈狹窄、顱內(nèi)出血性疾病或既往有腦出血、心源性腦栓塞者；(3)有腫瘤，嚴重的心、肺、肝和腎疾病及血液病；(4)有遺傳、代謝、中毒及風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病者；(5)有中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、多發(fā)性硬化等中樞系統(tǒng)炎性脫髓鞘性疾病、腦外傷、腦腫瘤等。

1．4樣本的采集與檢測清晨空腹抽取肘動脈處外周動脈血，血液樣本保存于內(nèi)含肝素的離心管中。樣本收集完30 min內(nèi)采用離心機在2 000 r/min、4 ℃的條件下離心15 min，分離出血漿后置于-80 ℃的冰箱內(nèi)儲藏備用。采用安迪生物科技有限公司購置的酶聯(lián)免疫分析試劑盒檢測血漿內(nèi)皮生長因子水平，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行，OD值在450 nm波長處進行酶標儀檢測，根據(jù)公式計算血漿血管內(nèi)皮生長因子濃度(pg/mL)，每一個樣本設(shè)置3個復(fù)孔用以確保數(shù)據(jù)可用性。

圖2 腦小血管病MRI表現(xiàn) A：腦白質(zhì)病變；B：腦微出血；C：血管周圍間隙擴大Figure 2 MRI manifestations of cerebellar va-scular disease A：brain white matter lesions；B：slight cerebral hemorrhage；C：the perivascular space is enlarged

2 結(jié)果

2．1 3組血漿血管內(nèi)皮生長因子水平比較與對照組相比，單發(fā)腔梗組、多發(fā)腔梗合并腦白質(zhì)病變組血漿血管內(nèi)皮生長因子均上升(P<0.05)。見表1。

2．2血漿血管內(nèi)皮生長因子水平變化與腦血管病變的相關(guān)性分析血漿血管內(nèi)皮生長因子與影像學(xué)病灶增多呈正相關(guān)(P<0.05)。見表1。

表1 3組血漿血管內(nèi)皮生長因子水平比較及相關(guān)分析Table 1 Comparison and correlation analysis of plasma vascular endothelial growth

3 討論

3．1腦小血管病患者血漿內(nèi)皮生長因子水平的變化及機制本研究顯示，腦小血管病單發(fā)腔梗組和多發(fā)腔梗合并腦白質(zhì)病變組血漿血管內(nèi)皮生長因子水平均較對照組上升(P<0.05)，提示腦小血管病的血漿血管內(nèi)皮生長因子水平升高，進一步對腦小血管病患者血漿血管內(nèi)皮生長因子水平的變化同影像學(xué)病灶增多的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，血漿血管內(nèi)皮生長因子水平的變化與病灶數(shù)量呈正相關(guān)(P<0.05)，提示腦小血管病患者的影像學(xué)病灶越多，其血漿血管內(nèi)皮生長因子水平升高越多。原因可能與腦小血管病患者腦內(nèi)小動脈、微動脈、毛細血管等微小血管的損害導(dǎo)致腦組織缺血缺氧有關(guān)。研究表明，缺氧在血管內(nèi)皮生長因子的表達調(diào)控占據(jù)主要作用[5]，其在血管內(nèi)皮生長因子基因的結(jié)合位點位于啟動子區(qū)域，調(diào)控機制為細胞在缺氧的刺激下產(chǎn)生一種缺氧誘導(dǎo)蛋白，激活正常的缺氧感受基因，從而調(diào)控腦組織中血管內(nèi)皮生長因子的表達；缺氧除能誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子的表達，還能提高其mRNA的穩(wěn)定性，防止其降解，從而間接提高其生理活性，促進腦組織中血管內(nèi)皮生長因子的表達[6-7]。另外，缺血缺氧導(dǎo)致腦組織損傷時，血腦屏障的通透性會增加[8]，且腦組織中血管內(nèi)皮生長因子也會進一步增加血腦屏障的通透性[9-10]。在這種情況下，腦組織中升高的血管內(nèi)皮生長因子，一部分通過血腦屏障進入外周血液循環(huán)中，導(dǎo)致患者血漿內(nèi)皮生長因子升高，并與缺氧的程度呈正相關(guān)。

3．2腦小血管病患者血漿內(nèi)皮生長因子水平變化的意義近幾年來，研究表明，正常腦功能的維持和行使主要依賴于腦實質(zhì)內(nèi)健全完整的神經(jīng)血管單元的功能及結(jié)構(gòu)[11-12]。神經(jīng)血管單元功能的完整性有賴于神經(jīng)膠質(zhì)細胞及神經(jīng)元在神經(jīng)遞質(zhì)的轉(zhuǎn)換及傳遞過程，相互協(xié)調(diào)執(zhí)行其功能；神經(jīng)血管單元結(jié)構(gòu)的完整性有賴于其多種組成細胞——神經(jīng)和非神經(jīng)細胞的完整[13]。其中，神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細胞參與組成神經(jīng)細胞，神經(jīng)膠質(zhì)細胞又包含小膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞、少突膠質(zhì)細胞；非神經(jīng)細胞的組成又包含血管平滑肌細胞、血管內(nèi)皮細胞、基底膜和細胞外基質(zhì)[14]。而腦小血管病所致的腦實質(zhì)損傷范圍雖小，卻也破壞了神經(jīng)血管單元功能和結(jié)構(gòu)的完整性。

腦內(nèi)存在某些被稱為“血管神經(jīng)素”的分子，這些分子具有調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞及神經(jīng)元功能的作用，因此其可影響神經(jīng)血管單元的完整性。血管內(nèi)皮生長因子作為一種重要的腦內(nèi)血管神經(jīng)素，不僅可以調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞的分化增殖、血管壁通透性及血管的增生等[15-16]，還可以直接調(diào)節(jié)神經(jīng)元的發(fā)育和再生[17-19]、興奮性及抑制性神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞[20]以及神經(jīng)元細胞膜上的多種離子通道的功能[21-22]等。另外，腦損傷發(fā)生后，血管內(nèi)皮生長因子可以促進神經(jīng)膠質(zhì)細胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)化[23]，推動神經(jīng)血管單元重塑[17]。血管內(nèi)皮生長因子還具有神經(jīng)保護效應(yīng)，如減輕缺血性腦損傷的程度、促進腦梗死灶縮小等作用，降低腦損傷時神經(jīng)細胞的死亡數(shù)[24-25]。

血管內(nèi)皮生長因子在腦小血管病的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中起一定作用，腦小血管病患者血管內(nèi)皮生長因子水平的升高可能是其自我保護機制之一，且這種自我保護機制的強度可能與病灶數(shù)量呈正相關(guān)。對腦小血管病血管內(nèi)皮生長因子進行更深入的研究，將為腦小血管病的預(yù)防和治療帶來新的途徑和方法。