張冬冬，徐官根，李曉英，，董志國，葛紅星，董迎輝，林志華，張 倩

（1.淮海工學(xué)院，江蘇省海洋生物技術(shù)重點建設(shè)實驗室，連云港 222005；2.浙江萬里學(xué)院，寧波 315100；3.連云港海浪水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，連云港 222045）

文蛤（Meretrix meretrix Linnaeus）是一種肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富的埋棲型雙殼經(jīng)濟貝類，廣泛分布于我國的沿海地區(qū)［1－3］。近年，隨著國外如日韓市場的緊俏及國內(nèi)海產(chǎn)品市場需求增大，文蛤產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)供不應(yīng)求現(xiàn)象。但人工養(yǎng)殖仍舊依賴野生苗種，由于未經(jīng)選育，易出現(xiàn)種質(zhì)退化、生長緩慢、疾病頻發(fā)等問題，導(dǎo)致人工養(yǎng)殖難度加大，產(chǎn)業(yè)發(fā)展緩慢［4］。對此，浙江萬里學(xué)院從江蘇南通文蛤野生種群選育出文蛤“萬里”新品種（系）。該新品種（系）中，“萬里紅”表現(xiàn)出生長速度快、營養(yǎng)價值高的特點；“萬里2號”品系呈現(xiàn)出繁殖力好、抗逆性強的特點，可有效解決當(dāng)前文蛤良種化之路［5］。目前，該品系商品貝在國家貝類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系連云港綜合試驗站的養(yǎng)成比較已獲初步成果［6］，但對于稚貝的中間培育技術(shù)與生長性能比較尚未見報道，開展稚貝養(yǎng)殖性能評估對于文蛤新品種（系）苗種繁育企業(yè)的養(yǎng)殖及成貝推廣具有現(xiàn)實的應(yīng)用價值。

本研究以文蛤“萬里”新品種（系）生長性能養(yǎng)殖比較研究為基礎(chǔ)，探索“萬里”新品種（系）稚貝在連云港地區(qū)池塘養(yǎng)殖模式，比較其不同季節(jié)生長速度，篩選適合當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的苗種，以期推動當(dāng)?shù)匚母蝠B(yǎng)殖良種化進(jìn)程，實現(xiàn)“萬里”新品種（系）養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 苗種來源

試驗所用兩個文蛤“萬里”新品種（系）苗種來自浙江省象山縣寧波甬盛水產(chǎn)種業(yè)有限公司繁育。

1.2 試驗設(shè)計

將“萬里紅”與“萬里2號”共計沙苗1 000萬粒，分別投放到連云港板橋地區(qū)同一池塘不同區(qū)域并做好標(biāo)記。放養(yǎng)密度每平方米約1 000粒，放養(yǎng)苗種規(guī)格詳見表1。放苗時間為2016年12月10日－2017年12月10日，試驗周期12個月，每個月采樣一次。

1.3 取樣與測量

試驗期間，每個月10號測量水溫、鹽度和pH值等水質(zhì)指標(biāo)；同時，設(shè)3個平行，每個平行隨機選取多個地點測量50個樣品，采用游標(biāo)卡尺（精度0.02 mm）測量樣品的殼長、殼高和殼寬，采用天平（精確到0.000 1 g）測量體質(zhì)量，該數(shù)據(jù)用于分析文蛤生長性能。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

增長量 Δ＝（W2－W1）／（t2－t1）

式中：t1和t2分別表示各階段測量初始時間和結(jié)束時間，W1、W2為相對應(yīng)時間稚貝的初始體質(zhì)量和結(jié)束時體質(zhì)量，測量方法參照李松榮［7］。

通過Excel統(tǒng)計分析，計算殼長、殼高、殼寬以及體質(zhì)量的均值和標(biāo)準(zhǔn)差并繪制柱狀圖和折線圖（鑒于2016年12月10日－2017年3月10日低溫期間，文蛤基本停止生長，并且個體太小，文中圖表數(shù)據(jù)從2017年3月10日開始繪制），采用SPASS17.0 edition軟件進(jìn)行多重比較，分析各組之間差異顯著性，以P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 水質(zhì)指標(biāo)

試驗期間，水溫方面，100～250 d期間（3－8月），水溫不斷升高，至250 d時（8月10日），達(dá)到最高值27℃；250 d之后，開始緩慢降溫。鹽度方面，整個養(yǎng)殖周期鹽度維持在26～31之間，隨著水溫的升高，池塘鹽度逐漸從31降到25，后隨著溫度降低，鹽度從25逐步升至28。pH值方面，全程pH值變化不大，在7.98～8.6之間波動，呈弱堿性。

2.2 殼長

稚貝在養(yǎng)殖100～160 d期間，“萬里紅”與“萬里2號”殼長無顯著性差異（P＞0.05）（圖1）；160～340 d期間，“萬里紅”與“萬里2號”都呈現(xiàn)較快的增長趨勢。其中在160～220 d，“萬里2號”殼長增長率高于“萬里紅”（P＜0.05）；在220～280 d，“萬里2號”殼長增長率低于“萬里紅”；在280～340 d期間，兩個品種（系）增長趨勢較緩。

表1 苗種數(shù)據(jù)Tab.1 Data of clam seedling

表2 采樣點溫度、鹽度和pH數(shù)據(jù)Tab.2 Data of temperature，salinity and pH in sample points

圖1 “萬里紅”與“萬里2號”殼長生長指標(biāo)Fig.1 Shell length of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

2.3 殼高

稚貝在養(yǎng)殖100～160 d期間，“萬里紅”與“萬里2號”殼高無顯著性差異（P＞0.05）（圖2）；在160～280 d期間，“萬里紅”與“萬里2號”都呈現(xiàn)較快的增長趨勢，其中在160～220 d期間，“萬里2號”殼高生長趨勢比“萬里紅”快，但在220～280 d期間，“萬里紅”又表現(xiàn)更快的增長趨勢。且在220 d與280 d時，“萬里2號”殼高顯著大于“萬里紅”（P＜0.05）；第340天時，兩個品種（系）殼高無顯著性差異（P＞0.05）。

圖2 “萬里紅”與“萬里2號”殼高生長指標(biāo)Fig.2 Shell height of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

2.4 殼寬

稚貝在100～160 d期間，“萬里紅”與“萬里2號”殼寬無顯著性差異（P＞0.05）；在160～280 d時，“萬里紅”與“萬里2號”殼寬都呈現(xiàn)較快的增長趨勢，且在220 d與280 d時，“萬里2號”殼寬顯著大于“萬里紅”（P＜0.05）；在160～220 d期間，“萬里2號”殼寬生長比“萬里紅”快，但在220～280 d期間，“萬里紅”又表現(xiàn)更快的增長趨勢。第340天，兩個品種（系）殼寬無顯著性差異（P＞0.05）。

圖3 “萬里紅”與“萬里2號”殼寬生長指標(biāo)Fig.3 Shell width of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

2.5 體質(zhì)量

前期100～160 d，兩個品種（系）稚貝體質(zhì)量生長無顯著性差異（P＞0.05）；在中后期（160～340 d），兩個品系體質(zhì)量均呈現(xiàn)較快的增長趨勢。在220 d與280 d時，“萬里2號”體質(zhì)量顯著大于“萬里紅”（P＜0.05）；在160～220 d期間，“萬里2號”比“萬里紅”增長略快，但在220～340 d期間，“萬里紅”體質(zhì)量增速逐漸增大，直至340 d時反超“萬里2號”，兩者末期體質(zhì)量無顯著性差異（P＞0.05）。

2.6 日增質(zhì)量

為了更充分的反映兩個品種（系）稚貝的生長發(fā)育速度以及更深入研究季節(jié)對其生長影響，對具有代表性的活體質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行了進(jìn)一步的細(xì)化分析，抽取增長較明顯階段5－11月（160～340 d）期間的每月數(shù)據(jù)，將稚貝活體日增質(zhì)量制成折線圖（圖5）。

稚貝在5月份期間，日增質(zhì)量無顯著性差異；在6－8月，隨著水溫的增加，“萬里紅”日增質(zhì)量明顯上升，而“萬里2號”在6月中旬至7月中旬階段增長遲緩，7月中旬至8月增長迅速。兩者至8月份都呈現(xiàn)最高值，且“萬里紅”日增質(zhì)量是“萬里2號”的1.2倍。8月之后，隨著氣溫下降，日增質(zhì)量出現(xiàn)明顯下降。其中6－7月，“萬里2號”日增質(zhì)量顯著大于“萬里紅”；而8－10月，“萬里紅”日增質(zhì)量顯著大于“萬里2號”。

圖4 “萬里紅”與“萬里2號”體質(zhì)量生長指標(biāo)Fig.4 Weight of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

圖5 “萬里紅”與“萬里2號”5－11月日增質(zhì)量比較Fig.5 Growth rate of two experimental groups of M.meretrix from May to November

3 討論

3.1 貝類不同品種（系）、殼色與生長相關(guān)性

不同品種（系）的貝類生長性能一般存在顯著差異。比如董志國等［8］研究發(fā)現(xiàn)三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）不同群體及后代生長性能不同，張躍環(huán)等［9］發(fā)現(xiàn)菲律賓蛤仔 （Ruditapes philippinarum）海洋紅品系與斑馬蛤品系差異明顯。本試驗中，稚貝在160～220 d養(yǎng)殖期間，“萬里2號”的殼長、殼高、殼寬和體質(zhì)量都顯著大于“萬里紅”，在220～280 d養(yǎng)殖期間，“萬里紅”生長性能增速又大于“萬里2號”。280 d后，“萬里紅”生長性能逐漸與“萬里2號”縮小差距直至趨于一致。同一養(yǎng)殖環(huán)境兩個品種（系）稚貝出現(xiàn)這種明顯的階段性生長差異，課題組之前試驗也發(fā)現(xiàn)成貝同一池塘養(yǎng)殖環(huán)境出現(xiàn)“萬里2號”前期生長顯著大于“萬里紅”現(xiàn)象，而后期正好相反［6］，顧向飛［10］通過比較“萬里紅”與其它殼色文蛤生長性狀也發(fā)現(xiàn)生長速度存在明顯的季節(jié)差異性。課題組猜測這種差異性可能因為“萬里紅”與“萬里2號”選育指標(biāo)及遺傳基因不同，導(dǎo)致“萬里2號”具有耐低溫性，對前期低溫的新環(huán)境具有更強的適應(yīng)性，而“萬里紅”具有耐高溫性，“萬里紅”在中后期生長具有更大的優(yōu)勢。這種同一物種不同品種（系）對環(huán)境適應(yīng)能力的差異現(xiàn)象在牡蠣（Ostrea gigas）的研究中也有報道［11］。

已有研究表明貝類的殼色與生長性能存在一定的關(guān)聯(lián)性，同一物種但殼色不同的貝類在同一環(huán)境中會出現(xiàn)生長差異［12］。NEWKIRK［13］研究發(fā)現(xiàn)貽貝（Mytilus edulis）高溫時藍(lán)色個體生長速度比棕色個體快10%～20%，鄧岳文等［14］研究發(fā)現(xiàn)華貴櫛孔扇貝（Chlamys nobibis）桔黃殼色群體的生長顯著大于紫褐殼色群體，閆喜武等［15］研究發(fā)現(xiàn)菲律賓蛤仔兩道紅品系生長大于斑馬蛤顏色品系。本試驗也發(fā)現(xiàn)，紅殼色“萬里紅”與黃殼色“萬里2號”生長存在差異。鑒于連云港本地尚未見有專業(yè)從事文蛤養(yǎng)殖，且研究發(fā)現(xiàn)江蘇選育的紅殼色與黃殼色“萬里”品種（系）生長速度均要大于未經(jīng)選育的普通野生品種［16］，所以本試驗未與本地野生種群做比較。但一般研究認(rèn)為殼色屬于質(zhì)量性狀，生長性能屬于數(shù)量性狀。所以要想解釋清楚殼色與生長的具體關(guān)聯(lián)性機理，還需要借助分子生物學(xué)手段進(jìn)一步分析。

3.2 不同季節(jié)相同環(huán)境下貝類早期生長差異性

溫度和鹽度適宜與否是影響稚貝生長的重要因素［17－19］。曹伏君等［20］研究發(fā)現(xiàn)文蛤稚貝適宜生存溫度在4～36℃，最適生長溫度在24～27℃，最適生長鹽度在15～23。本研究中不同季節(jié)溫度及鹽度差異使得稚貝在不同季節(jié)也具有不同的生長表現(xiàn)。稚貝在100～160 d（3－5月）養(yǎng)殖期，“萬里紅”與“萬里2號”生長較緩慢，這除了與稚貝前期攝食能力弱、代謝慢有關(guān)，也可能因為溫度低影響其生長；在160～340 d（5－11月）期間，稚貝兩個品系都呈現(xiàn)高速增長趨勢，尤其5－8月，稚貝日增長量不斷增加，直至8月達(dá)到頂峰。而肖國強等［21］關(guān)于文蛤不同群體自繁和互交F1代稚貝試驗結(jié)果顯示，7－9月日生長量不大，9－11月處于高速生長期，本試驗結(jié)果（5－11月高速生長期）與其基本吻合。但肖國強等［21］反映9－10月中旬達(dá)到高峰期，而本研究高峰期在8月，這種差異可能有3個原因：其一，可能其稚貝規(guī)格較小、選育子代數(shù)不同導(dǎo)致對季節(jié)敏感性有差異。其二，也可能是由于杭州與連云港兩地區(qū)同時期水溫不同，因為本試驗中8月份水溫處于稚貝最適生長溫度，鹽度接近最適生長鹽度；而其試驗時杭州最適水溫和鹽度可能在9－10月。其三，不排除本地池塘8月蝦料投喂增多導(dǎo)致浮游生物及單胞藻餌料豐富的影響［22］。8－11月，隨著溫度降低，pH值增加，日增長量明顯下降，11月過后基本停止生長，這正表明稚貝在冬季低水溫條件下，只能維持其最低的生命活動狀態(tài)，基本處于休長期。因此，通過整個生長曲線反映出這兩個品種文蛤在連云港沿海養(yǎng)殖具有春冬季（11－5月）遲緩、夏秋季（5－11月）生長迅速的規(guī)律，這與肖國強等［21］關(guān)于季節(jié)對稚貝的生長規(guī)律影響結(jié)論基本一致。

4 小結(jié)

1）前期“萬里2號”生長性能顯著大于“萬里紅”，但是后期相反，所以二者均可在連云港推薦養(yǎng)殖。

2）可以利用不同季節(jié)生長曲線信息，盡可能在5月份生長節(jié)點前，將養(yǎng)殖密度、養(yǎng)殖環(huán)境調(diào)控到適宜條件以迎接快速生長期。