張然星 李漢蓮 魏戌 高景華 謝雁鳴 韓艷 史穎紅 游珂

1.中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院，北京 100102 2.中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)臨床基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所，北京 100700

骨的重建是破骨細(xì)胞吸收舊骨與成骨細(xì)胞合成新骨的動態(tài)偶聯(lián)過程，骨組織受激素信號、旁分泌和自分泌因子及物理壓力的刺激，在基本多細(xì)胞單位中完成吸收與合成的相互轉(zhuǎn)換，從而保證其礦化平衡與結(jié)構(gòu)完整，并通過精確有序的調(diào)節(jié)機制維持其正常骨量和生理功能[1-3]。在此過程中的代謝產(chǎn)物以不同濃度和結(jié)構(gòu)方式分布于骨骼、血液、尿液或其他體液中，因此，臨床上可以通過檢測血液或尿液中的骨代謝產(chǎn)物和相關(guān)激素，間接推斷骨骼的各種代謝狀態(tài)。這些可被檢測的骨代謝產(chǎn)物與相關(guān)激素統(tǒng)稱為骨代謝生化標(biāo)志物或骨代謝標(biāo)志物，其中能反映骨轉(zhuǎn)換狀態(tài)的指標(biāo)稱為骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物(bone turnover markers，BTMs)[4]。大量臨床試驗已證實，BTMs在骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險預(yù)測及抗骨質(zhì)疏松藥物的療效監(jiān)測等方面具有潛在的重要價值[4-5]。國際骨質(zhì)疏松基金會(IOF)和國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(IFCC)的骨標(biāo)志物標(biāo)準(zhǔn)化工作組推薦血清I型原膠原氨基端前肽(procollagen type 1 N-terminal propeptide, P1NP)和I型膠原羧基端肽交聯(lián)(β cross-linked C-telopeptide of type 1 collagen, β-CTX)作為骨轉(zhuǎn)換參考性標(biāo)志物，強調(diào)需要對兩者建立國際參考標(biāo)準(zhǔn)，協(xié)調(diào)不同檢測方法及研究結(jié)果的一致性，從而更好地評估其臨床應(yīng)用效能，擴大其在相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用經(jīng)驗[4]。

研究表明，在骨質(zhì)疏松癥的藥物療效監(jiān)測中，作為“金標(biāo)準(zhǔn)”的骨密度(bone mineral density, BMD)對藥物干預(yù)作用的響應(yīng)不及BTMs敏感。在骨質(zhì)疏松性骨折風(fēng)險預(yù)測中，BTMs水平的變化可疊加或獨立于BMD測量，提高風(fēng)險評估的可信度[6-8]。然而，由于BTMs檢測易受到顯著的分析前和分析變異，以及個體內(nèi)生物學(xué)變異的影響[9]，加之其檢測系統(tǒng)尚缺乏統(tǒng)一的國際標(biāo)準(zhǔn)[4]，這都極大地限制了其在臨床中的廣泛應(yīng)用[10]。在BTMs參考標(biāo)準(zhǔn)的建立過程中，如何確定不同人群的生物學(xué)參考區(qū)間無疑是一個核心問題[11]。絕經(jīng)后女性是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的高危人群，在對這部分人群骨質(zhì)疏松的防治和管理過程中，需要健康絕經(jīng)前女性BTMs的參考區(qū)間作為參照標(biāo)準(zhǔn)和評價依據(jù)。目前，BTMs水平在不同年齡階段呈現(xiàn)不同程度的變化和分布趨勢已成為共識[12-21]，因此建立健康絕經(jīng)期前女性BTMs參考區(qū)間的關(guān)鍵首先是要準(zhǔn)確界定其變化和分布趨勢趨于相對穩(wěn)定的特異年齡階段，再以此特異年齡階段的健康人群作為參考人群，篩選參考個體，形成參考樣本組，獲得參考值，最終得到參考分布，參考限和參考區(qū)間。另外，研究顯示[15,17,20]，BTMs水平在不同種族、不同生活方式的國家和地區(qū)人群及不同檢測系統(tǒng)之間都可能表現(xiàn)出顯著差異。而目前國內(nèi)臨床實驗室在開展BTMs檢測過程中，檢測項目的參考區(qū)間多由試劑廠商依據(jù)國外相關(guān)研究提供，近幾年雖陸續(xù)有符合中國人群特征參考區(qū)間建立的報道，但罕見有北京地區(qū)健康女性絕經(jīng)期前參考區(qū)間的研究[22-25]。

鑒于此，本研究選擇北京地區(qū)健康絕經(jīng)期前女性體檢人群作為研究對象，通過觀察不同年齡組血清BTMs水平的分布趨勢差異，確定參考人群的特異年齡階段，并初步建立北京地區(qū)健康絕經(jīng)期前女性骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物P1NP和β-CTX羅氏電化學(xué)發(fā)光法檢測系統(tǒng)的參考區(qū)間，進而為臨床實驗室如何建立骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物的參考區(qū)間提供經(jīng)驗與借鑒。

1 資料和方法

1.1 研究對象

選擇2015年8月至2016年8月在中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院體檢中心體檢的健康絕經(jīng)前女性作為招募對象，經(jīng)調(diào)查問卷及體檢篩查，確定符合入選標(biāo)準(zhǔn)的272名北京地區(qū)健康絕經(jīng)前女性作為研究對象，每位入選受試者至少在京居住5年。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)30～54歲月經(jīng)周期正常女性；(2)愿意接受研究方案，并同意進行有關(guān)檢查(如骨密度、血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物、肝腎功能、血糖等)；(3)自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)BMD經(jīng)雙能X線吸收測量法(DXA)測量，腰椎和髖部骨量異常，T值<-1；(2)患有全身代謝性骨骼疾??；(3)半年內(nèi)用過影響骨代謝藥物；(4)兩年內(nèi)有外傷引起的骨折；(5)患有影響骨代謝的慢性疾病如糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、甲旁亢、甲亢及其他需要長期治療的慢性疾??；(6)患有嚴(yán)重心、腦血管疾??；(7)肝腎功能異常；(8)患有慢性胃腸道疾?。?9)近期有急慢性感染過敏；(10)1年內(nèi)應(yīng)用避孕藥或懷孕；(11)當(dāng)前或3個月內(nèi)在哺乳期；(12)有長期吸煙和飲酒習(xí)慣；(13)2～3天內(nèi)有劇烈運動；(14)嚴(yán)重的器質(zhì)性疾病、精神神經(jīng)系統(tǒng)疾病和活動性骨關(guān)節(jié)病。

1.2 研究方法

1.2.1問卷調(diào)查：所有受試者簽署知情同意書后，在醫(yī)生協(xié)助下填寫調(diào)查問卷。調(diào)查問卷的基本內(nèi)容包括：受試者出生日期、身高(cm)、體重(kg)、體重指數(shù)=體重(kg)/身高(m)2、月經(jīng)周期、生活方式、飲食習(xí)慣及相關(guān)體檢結(jié)果資料。

1.2.2常規(guī)生化指標(biāo)及骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物檢測：每名受試者于體檢當(dāng)日清晨8:00～9:00空腹采集兩個真空采血管(每管4 mL)的靜脈血，離心3000 rpm，5 min，分離血清后，其中1管血清采用羅氏C702生化檢測系統(tǒng)檢測肝腎功能、血糖、血鈣、血磷；另一管血清于-80 ℃冰箱凍存，全部樣本收集結(jié)束后同一時間采用羅氏E602免疫檢測系統(tǒng)測定血清P1NP與β-CTX。檢測過程嚴(yán)格按照IOF/IFCC提出的骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物檢測的相關(guān)要求，盡量減少可控變異因素以保證實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。檢測所用試劑為羅氏E602免疫檢測系統(tǒng)專用試劑盒，實驗步驟按照試劑盒說明書進行。檢測不精密度為：P1NP的日內(nèi)CV：1.7%～3.2%，日間CV：2.3%～3.7%；β-CTX日內(nèi)CV：1.2%～4.7%，日間CV：1.7%～5.7%。最低檢測限為：P1NP：5 ng/mL；β-CTX：0.01 ng/mL。

1.2.3骨密度檢測：應(yīng)用美國GE公司雙能X線(DXA)骨密度儀，測定正位腰椎(L2～L4)和雙側(cè)股骨近端，即股骨頸(Neck)，Ward’s 三角區(qū)，大轉(zhuǎn)子(Troch)，獲取以下參數(shù)：骨密度(g/cm2)、T-值評分、Z-值評分。儀器精度1%，重復(fù)測量誤差<1%。根據(jù)WHO推薦的骨量判斷標(biāo)準(zhǔn)：T≥-1.0時，骨量正常；-2.5≤T<-1.0時，骨量減少；T<-2.5時，骨質(zhì)疏松。

1.3 數(shù)據(jù)管理與統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)管理與統(tǒng)計分析均由第三方中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)臨床基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所負(fù)責(zé)。應(yīng)用Epidata3.0數(shù)據(jù)庫對數(shù)據(jù)進行獨立雙人雙錄入，經(jīng)一致性檢驗審核通過后鎖定數(shù)據(jù)庫，采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計分析。所有的統(tǒng)計檢驗均采用雙側(cè)檢驗，P≤0.05被認(rèn)為具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異，數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布通過Kolmogorov-Smirnov檢驗來進行判斷。運用局部加權(quán)回歸散點平滑法(locally weighted scatterplot smoothing，LOWESS)描述P1NP與β-CTX水平隨年齡變化的分布趨勢，采用Kolmogorov-SmirnovZ檢驗比較不同年齡段間P1NP與β-CTX水平的分布差異，從而得出P1NP與β-CTX水平分布趨勢相對平穩(wěn)的特異年齡段。隨后按照CLSI發(fā)布的C28-A3文件中關(guān)于醫(yī)學(xué)實驗室參考區(qū)間建立的具體要求，計算得出P1NP和β-CTX的參考限及參考限90%的可信區(qū)間。

1.4 倫理審查與臨床研究注冊

本項臨床研究于2014年12月24日經(jīng)中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審查批準(zhǔn)，同意該項研究的實施(批件號WJEC-KT-2014-026-P002)。調(diào)查對象按照自愿參加的原則，全部簽署知情同意書。2015年5月10日在中國臨床試驗注冊中心完成臨床研究注冊(注冊號ChiCTR-DOC-15006377)。

2 結(jié)果

2.1 受試者篩選

根據(jù)受試者納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，636名體檢的絕經(jīng)期前女性參與篩選。427名受試者參與臨床篩選，最終納入健康絕經(jīng)期前女性受試者272名。

圖1 受試者篩選流程圖Fig.1 The flow-chart of the subject screening.

2.2 研究人群基本特征

共納入北京地區(qū)健康絕經(jīng)前女性272人，受試者年齡為(39.51±5.85)歲，身高為(161.97±4.48)cm，體重為(59.74±7.97)kg，體重指數(shù)為(22.77±2.86)kg/m2，血鈣(2.27±0.12)mmol/L，血磷(1.11±0.16)mmol/L(表1)。

表1 研究人群基本特征(n=272)Table 1 The levels of P1NP and β-CTX in the study subjects (n=272)

2.3 研究人群P1NP與β-CTX水平

經(jīng)Kolmogorov-Smirnov檢驗，總?cè)巳褐蠵1NP與β-CTX水平均不符合正態(tài)分布(P=0.000)。P1NP水平的中位數(shù)為34.30 ng/mL(95%CI：32.94～35.74 ng/mL)，β-CTX水平的中位數(shù)為0.24 ng/mL(95% CI：0.23～0.26 ng/mL)(表2)。

表2 研究人群P1NP與β-CTX水平(n=272)Table 2 The levels of P1NP and β-CTX in the study subjects (n=272)

2.4 P1NP與β-CTX水平隨年齡變化趨勢比較

運用LOWESS法繪制P1NP、β-CTX水平隨年齡變化的擬合曲線圖(圖2～3)，從圖中大致可以看出35～45歲之間兩種骨代謝標(biāo)志物水平的分布趨勢相對平穩(wěn)。同時，運用Kolmogorov-SmirnovZ檢驗比較35～39歲與40～44歲的P1NP與β-CTX水平的分布趨勢，無顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，因此根據(jù)年齡分組情況將35～39歲與40～44歲兩個年齡段進行合并，進一步采用Kolmogorov-SmirnovZ檢驗比較不同年齡段間P1NP與β-CTX水平的分布趨勢。

結(jié)果顯示β-CTX水平各年齡組比較，在30～34歲與35～44歲組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.015<0.05)，其余各組間比較無顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；P1NP水平各年齡組比較，在45～49歲與35～44歲組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.034<0.05)，其余各組間比較無顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)(表3)。

圖2 P1NP水平隨年齡變化的擬合曲線圖Fig.2 Plot of P1NP level following the change of age

圖3 β-CTX水平隨年齡變化的擬合曲線圖Fig.3 Plot of β-CTX level following the change of age

表3 不同年齡段P1NP與β-CTX水平比較Table 3 Comparison of P1NP and β-CTX among different age groups

注：與35～44歲相比，△P<0.05，其余P>0.05。

2.5 P1NP與β-CTX水平的參考限、參考限90%可信區(qū)間

根據(jù)上述結(jié)果，以35～44歲年齡組健康絕經(jīng)期前女性作為參考人群，P1NP水平的參考區(qū)間為17.95～65.60 ng/mL，β-CTX水平的參考區(qū)間為0.10～0.49 ng/mL；P1NP與β-CTX水平的參考限、參考限90%可信區(qū)間見表4。

表4 P1NP與β-CTX水平的參考限、參考限90%可信區(qū)間Table 4 The reference interval value of P1NP and β-CTX (CI 90%)

3 討論

參考區(qū)間是臨床實驗室解釋檢驗報告的一個“決策支持工具”[26]。建立代表健康成年人BTMs真實表達(dá)水平的參考區(qū)間，對于推進BTMs的臨床應(yīng)用具有重要的現(xiàn)實意義。多數(shù)前瞻性隊列研究證實，與健康絕經(jīng)前女性BTMs參考區(qū)間的上限比較，絕經(jīng)后女性非治療者BTMs水平升高程度可預(yù)測遠(yuǎn)期發(fā)生骨折風(fēng)險的大小[8]。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥藥物療效監(jiān)測的一個主要目標(biāo)就是將患者BTMs水平降至健康絕經(jīng)前女性參考區(qū)間的“下半段”，即低限值到均值之間的范圍內(nèi)[4]。

在參考區(qū)間的建立過程中，固有生物學(xué)變異對參考值的影響不容忽視，因為它決定了不同個體，甚至同一個體不同生理時期、不同生命階段具有變異性[27]。對參考個體進行分組可有效減少個體間變異的影響，從而減少“受影響個體”與“正常個體”之間判別值的重疊，提高參考區(qū)間在實際應(yīng)用中的參考價值[3]。女性在30歲之前可由骨骼發(fā)育尚未完全成熟而致BTMs的水平偏高，而在45歲之后開始進入圍絕經(jīng)期，雌激素水平的顯著下降致破骨細(xì)胞活性增強，使BTMs的水平再次進入顯著升高階段[28-30]。因此，健康絕經(jīng)前女性BTMs參考區(qū)間的建立是以年齡分組為前提的，IOF推薦其參考人群應(yīng)為30～45歲之間BMD正常的人群[28]。由此可見，即使是在絕經(jīng)期前，只有受變異因素影響最小的特異年齡段的健康人群，才適宜作為建立BTMs參考區(qū)間的參考人群。本研究應(yīng)用IFCC推薦的前瞻性采樣法，通過隨機選擇，按照納入及排除標(biāo)準(zhǔn)篩選出272名符合條件的30到54歲的受試者，并以5歲為一個年齡階段對受試者進行分組，這與國際相關(guān)研究的年齡分組方式相同，研究人群的基本特征代表了北京地區(qū)健康絕經(jīng)期前女性的自然狀態(tài)。同時，本研究選擇了目前公認(rèn)的具有較高靈敏度和特異性的電化學(xué)免疫分析技術(shù)來測定受試者血清P1NP與β-CTX水平，并通過嚴(yán)格的排除標(biāo)準(zhǔn)、分析前質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化操作盡量減少導(dǎo)致BTMs水平出現(xiàn)變異的可控因素。結(jié)果顯示，受試者血清P1NP與β-CTX整體水平的中位數(shù)分別為34.30(95% CI：32.94～35.74)ng/mL和0.24(95% CI：0.23～0.26)ng/mL。這與Li等[23]的研究結(jié)果存在差異，該研究報道的30歲至絕經(jīng)前的中國五個地區(qū)健康女性人群血清P1NP與β-CTX整體水平的中位數(shù)分別為40.42(95% CI：17.1～102.15)ng/mL和0.26(95% CI：0.08～0.72)ng/mL。經(jīng)分析，筆者認(rèn)為上述差異可能來自于篩選受試者時所使用的納入與排除標(biāo)準(zhǔn)的差異。

目前證實，骨量異常者和正常人群的BTMs水平具有顯著的重疊性[31]，這表明在確定參考人群年齡組過程中，更為準(zhǔn)確的方法應(yīng)該是通過比較各組BTMs水平的分布趨勢來判斷變異因素影響最小的年齡組，而不是只比較組間BTMs水平的均值/中位數(shù)是否存在差異[13,16,19,22]。因此，本研究通過LOWESS法繪制BTMs水平隨年齡變化趨勢的擬合曲線圖，并應(yīng)用Kolmogorov-SmirnovZ檢驗比較35～39歲與40～44歲年齡段及35～44歲年齡段與其他年齡段BTMs水平的分布趨勢差異。結(jié)果顯示，P1NP與β-CTX水平隨年齡的增加均呈現(xiàn)出底部平緩的“波谷樣”分布趨勢，谷底的最低點均出現(xiàn)在40歲，位于35～44歲的中間位置。進一步與兩者35～44歲的水平比較，P1NP與β-CTX水平具有統(tǒng)計學(xué)意義的分布趨勢差異分別出現(xiàn)在30～34歲及45～49歲年齡組。由于骨重建是骨形成與骨吸收的動態(tài)偶聯(lián)過程，因此，基本能夠證明不論是骨形成標(biāo)志物P1NP水平，還是骨吸收標(biāo)志物β-CTX水平，35～44歲是兩者分布趨勢趨于相對平穩(wěn)，受變異因素影響最小的年齡段，該年齡段的人群更適合作為建立健康絕經(jīng)期前女性BTMs參考區(qū)間的參考人群，這一結(jié)論與Ardawi等[16]的研究結(jié)果相似，其報道的沙特絕經(jīng)前女性參考人群年齡階段為35～45歲。另外，Michelsen等[19]的研究雖然使用了不同于羅氏的檢測系統(tǒng)，但其用于判斷德國女性絕經(jīng)前參考人群特異年齡段的方法、結(jié)論與本研究相同。

在計算參考區(qū)間時，由于大多數(shù)參考值不是正態(tài)分布，美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)和IFCC均推薦使用非參數(shù)統(tǒng)計方法計算參考區(qū)間，定義參考區(qū)間為參考值數(shù)據(jù)95%的分布范圍，即2.5%～97.5%位數(shù)所在的區(qū)間，并要求參考樣本組至少包括120個參考數(shù)據(jù), 這也是估計出參考上限和下限90%可信區(qū)間的最低保證[32]。本研究中，參考樣本的選擇遵循了上述方法和原則，經(jīng)BTMs水平隨年齡變化趨勢分析，最終確定的參考樣本組包含了129個P1NP和β-CTX的參考值。進而我們采用非參數(shù)方法并結(jié)合實際臨床意義，建立兩者的雙側(cè)95%參考區(qū)間。值得注意的是，在確定參考區(qū)間的參考限時，需要同時估計參考限的可信區(qū)間。這是因為，選擇受試者樣本進行參考限的計算，就是對研究人群相應(yīng)百分?jǐn)?shù)的評估，從同樣人群中的其它抽樣也許會得出稍微有些不同的參考限。因此，CLSI C28-A3指南中強調(diào)[32]，一個非常有效的方法是通過計算樣本中百分位數(shù)的可信區(qū)間，來識別和評定樣本估算時的可變性。兩個理由揭示了可信區(qū)間的必要性：首先，能夠提示研究人員進行變異性評估并提供可變性評估的定量測定方法。其次，當(dāng)采集的樣本量增加時可信區(qū)間就會變窄。因此，研究人員可以采取增加參考個體的樣本含量來提高評估的參考區(qū)間的精密度。本研究中，P1NP與β-CTX參考區(qū)間均值及其可信區(qū)間分別為35.37(95% CI：33.57～37.37)ng/mL，0.25(95% CI：0.23～0.27)ng/mL，這與Hu等[22]報道的上海地區(qū)健康絕經(jīng)前女性參考區(qū)間的均值及可信區(qū)間相似，兩者分別為：35.22(95% CI：30.67～40.10)ng/mL，0.242(95% CI：0.218～0.297)ng/mL。但本研究所建立的參考區(qū)間與試劑廠商提供的參考區(qū)間相差較大，試劑廠商提供的參考區(qū)間來自于OFELY研究[33-35]。這也再次證實，臨床實驗室在進行BTMs檢測時需建立滿足自身條件和符合本地人群特征的參考區(qū)間。

骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物能夠成功應(yīng)用于臨床試驗和實踐需要最大程度提高其檢測準(zhǔn)確性、精確性和可比性。檢測系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)化和協(xié)調(diào)化可使不同地區(qū)、不同時間、不同實驗室的檢測結(jié)果具有可比性。IOF和IFCC推薦在國際范圍內(nèi)建立BTMs的參考性檢測系統(tǒng)，此過程中主要包括：制備初級和次級參考物，控制分析前變異因素，協(xié)調(diào)研究結(jié)果一致性，建立健康人群的參考區(qū)間及評價BTMs的臨床應(yīng)用價值等[4]，這將有助于BTMs檢測臨床實踐指南的制定與實施。Bauer等[11]指出，在健康年輕人群中建立更為穩(wěn)健的參考區(qū)間極為必要，因為確定“非正常”范圍首先要明確何為“正?！狈秶?，來自于大樣本的健康年輕人群的BTMs參考區(qū)間可以更好的解釋骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物與臨床評價的相關(guān)性。Morris等[5]回顧既往研究表明，在BTMs參考區(qū)間建立過程中不同的納入與排除標(biāo)準(zhǔn)、不同的樣本采集程序、不同的檢測系統(tǒng)所致的研究結(jié)果存在一定差異。本研究的局限性在于：(1)在受試者體檢篩查過程中，并未對甲狀旁腺素與1,25-二羥維生素D3進行檢測；(2)參考樣本的數(shù)量為129例，僅能滿足評估參考限90%可信區(qū)間的最低要求；(3)受試者主要來源于城市地區(qū)，農(nóng)村地區(qū)的入選人數(shù)相對偏少。

本研究通過對北京地區(qū)30～54歲健康女性絕經(jīng)期前血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物P1NP和β-CTX水平在不同年齡段分布趨勢差異分析，證實了35～44歲為兩者分布趨勢趨于平穩(wěn)且受變異因素影響最小的年齡段，進而以此年齡段健康女性為參考樣本初步建立了血清P1NP和β-CTX的參考區(qū)間及其高、低限的可信區(qū)間。本研究可為北京地區(qū)女性骨質(zhì)疏松癥防治和管理提供參考依據(jù)，并為基層臨床實驗室建立骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序提供借鑒。另外，如何協(xié)調(diào)BTMs參考區(qū)間在不同檢測系統(tǒng)之間的一致性及如何提高其在骨質(zhì)疏松癥個體化治療中的實際臨床應(yīng)用價值還有待于進一步的深入研究。