陳文姍，韋 勵，陳艷雅，吳雪薇

(廣東省東莞市人民醫(yī)院，廣東 東莞 523000)

子宮內(nèi)膜癌是現(xiàn)階段臨床上較為常見的婦科惡性腫瘤，其發(fā)病率長期占據(jù)婦科惡性腫瘤的前三位。流行病學研究顯示，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率可達20.3/10萬人，而且在圍絕經(jīng)期女性人群中，其發(fā)病率具有進一步上升的趨勢[1-2]。

多種生物學因素均可以促進子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生，加劇癌細胞低分化或者異常增殖的風險。人表皮生長因子-2(correlation between human epidermal growth factor-2，C-erbB-2)、抑癌基因p53(p53)、細胞核相關(guān)抗原Ki-67等，能夠影響子宮內(nèi)膜腺體上皮細胞的核裂變、癌細胞凋亡的抑制，增加早期病變內(nèi)膜腺體細胞對于子宮肌層的浸潤等病理過程，促進子宮內(nèi)膜癌的病情進展，特別是p53癌相關(guān)基因的表達異常，能夠在促進信號相關(guān)通路信號的激活，增加癌細胞的轉(zhuǎn)錄等，影響腫瘤病灶的擴散[3]。為了進一步揭示C-erbB-2、p53、Ki-67與子宮內(nèi)膜癌的相關(guān)性分析，本研究選取2013年3月至2017年3月廣東省東莞市人民醫(yī)院保存的子宮內(nèi)膜癌組織標本80例，探討了相關(guān)指標的異常表達，并揭示了其與患者臨床病理特征的關(guān)系，報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年3月至2017年3月東莞市人民醫(yī)院病理科保存的子宮內(nèi)膜癌組織標本80例，其中患者年齡32～67歲，中位年齡51.20歲。納入標準：①術(shù)前未進行化療、放療等抗癌治療；②臨床病理資料完整。排除標準：合并其他惡性腫瘤者。同時選取正常子宮內(nèi)膜標本80例，其中年齡31～70歲，中位年齡52.10歲；不典型增生子宮內(nèi)膜標本80例，年齡33～68歲，中位年齡51.50歲。標本的獲取和實驗方案已通過倫理學審核。

1.2實驗方法

采用石蠟切片脫水，采用離子水進行反復洗滌，加入牛奶液體封閉抗體，封閉時間為5min，加入C-erbB-2、p53和Ki-67抗體(鼠來源，Abcum公司)， 37℃孵育2h，采用磷酸鹽緩沖液洗滌3次，滴加熒光染色標記的二抗抗體(購自Abcum公司)，37℃孵育30min，加入磷酸鹽緩沖液進行洗滌，采用南京凱基生物制劑公司生產(chǎn)的顯色劑進行顯色，封片，鏡下觀察。

1.3結(jié)果判斷

p53定位于細胞核呈棕黃色顆粒，C-erbB-2定位于胞漿和細胞膜呈棕黃色，Ki-67定位于細胞核呈棕黃色。在高倍鏡下任選10個視野，計數(shù)陽性細胞比例，將≤5%、<50%、50%～75%、≥75%歸為“-”“+”“++”“+++”，將“-”和“+”定為陰性表達，將“++”和“+++”定為陽性表達。

1.4統(tǒng)計學方法

統(tǒng)計分析采用SPSS 19.0軟件，計數(shù)資料比較使用χ2檢驗，相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析。以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1各組織C-erbB-2、p53和Ki-67陽性表達情況

各組織C-erbB-2、p53和Ki-67陽性表達比較差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)，見表1。其中子宮內(nèi)膜癌組織C-erbB-2、p53和Ki-67陽性表達率明顯高于正常組織和不典型增生組織(C-erbB-2：χ2值分別為51.23、17.07；p53：χ2值分別為44.06、16.78；Ki-67：χ2值分別為34.49、13.33，均P<0.05)；不典型增生組織C-erbB-2、p53和Ki-67陽性表達率明顯高于正常組織(χ2值分別為12.17、16.78、5.70，均P<0.05)。

表1各組織C-erbB-2、p53和Ki-67陽性

表達情況[n(%)]

Table 1 Positive expressions of C-erbB-2, p53 and

Ki-67 in each tissue[n(%)]

注：a與正常組織比較P<0.05；b與不典型增生組織比較P<0.05。

2.2 C-erbB-2、p53和Ki-67表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征關(guān)系

C-erbB-2表達與患者組織分級、肌層浸潤、臨床病理分期和分化程度有關(guān)(均P<0.05)；p53表達與患者臨床病理分期有關(guān)(P<0.05)；Ki-67表達與患者組織分級有關(guān)(P<0.05)，見表2。

表2 C-erbB-2、p53和Ki-67表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征關(guān)系[n(%)]

注：*與其他分級比較P<0.05。

2.3相關(guān)性分析

C-erbB-2表達與p53和Ki-67呈正相關(guān)(rs值分別為0.27、0.35，均P<0.05)，p53與Ki-67呈正相關(guān)(rs=0.55，P<0.05)，見表3。

表3相關(guān)性分析結(jié)果(r)

Table 3 Results of correlation analysis(r)

指標C-erbB-2p53Ki-67C-erbB-2-0.27*0.35*p530.27*-0.55*Ki-670.35*0.55*-

注：*表示P<0.05。

3討論

3.1子宮內(nèi)膜癌的流行病學背景研究

現(xiàn)階段子宮內(nèi)膜癌臨床上總體治療有效率不足25%，包括手術(shù)或者聯(lián)合放化療等綜合性治療措施的臨床病情緩解率較低[4-5]。同時對于子宮內(nèi)膜癌的早期發(fā)病過程缺乏有效的篩查指標，雖然CEA或者CA125等上皮腫瘤糖蛋白成分能夠在一定程度上提高子宮內(nèi)膜癌的診斷水平，但其篩查的靈敏度或者特異度等局限性仍然較為明顯。而通過對子宮內(nèi)膜癌發(fā)病過程中基因或者蛋白水平的表達差異性研究，能夠為疾病的診療提供新的思路。

3.2細胞生物學因子在促進子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用

子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制較為復雜，遺傳因素、性激素水平的紊亂或者基因突變等，均可能增加癌細胞早期病變的風險?；蛩降漠惓＝陙肀徽J為是影響惡性腫瘤發(fā)生的核心因素，基因突變或者基因表達調(diào)控的異常，增加了癌細胞過度擴增的風險，導致癌細胞的正常分化或者促凋亡過程明顯失常[6]。C-erbB-2是生長因子家族成員，其能夠加劇子宮內(nèi)膜腺體早期對子宮內(nèi)膜肌層的浸潤，加劇癌細胞的轉(zhuǎn)移風險，同時C-erbB-2能夠影響新生血管的形成，增加腫瘤病灶組織的血流灌注等，從而促進癌病灶組織的增殖[7-8]；p53作用腫瘤相關(guān)基因，其表達的異常影響了惡性腫瘤的細胞調(diào)控、凋亡抑制及癌細胞的生物學特征的改變過程[9]；Ki-67作為癌細胞核DNA增殖相關(guān)抗原，其能夠提高癌細胞DNA的增殖速度，導致癌細胞的增殖失去調(diào)控[10-11]?；仡檱鴥?nèi)外已有的相關(guān)研究，已經(jīng)證實的是C-erbB-2、p53、Ki-67等能夠在子宮內(nèi)膜癌等疾病發(fā)生過程中發(fā)揮顯著作用[12-13]，但對于相關(guān)指標的表達與子宮內(nèi)膜癌的臨床病理特征的關(guān)系研究不足。

3.3 C-erbB-2、p53和Ki-67的異常表達及其與子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理特征的關(guān)系

本次研究發(fā)現(xiàn)，在子宮內(nèi)膜癌病灶組織中C-erbB-2、p53和Ki-67等指標的表達均明顯高于正常組織，差異具有統(tǒng)計學意義，提示不同的生物學指標可能均參與了子宮內(nèi)膜癌的病情進展，不同指標的異常表達可能在下列幾個方面影響腫瘤的發(fā)生：①C-erbB-2的高表達，提高了癌細胞的變形能力，導致癌細胞的侵襲風險明顯增強。②p53和Ki-67的高表達，影響了癌細胞的程序性凋亡的速度，導致癌細胞G1/S期細胞比例明顯增高，凋亡減少，癌細胞的擴增速度明顯增加。林鳳等[13]研究者探討了35例樣本量的子宮內(nèi)膜腺癌患者的血清學分子譜改變過程，發(fā)現(xiàn)C-erbB-2或者KI-67的表達陽性率可平均上升35%以上，且患者的病程越長、器官累及程度越高，相關(guān)指標的高表達情況越為明顯，在不典型增生的子宮內(nèi)膜癌病灶組織中，C-erbB-2、p53和Ki-67等的表達陽性率可進一步上升，高于正常對照人群，差異具有統(tǒng)計學意義，相關(guān)指標對于癌細胞不典型增生的影響，主要考慮與其對于患者癌細胞分化誘導因子a的表達調(diào)控障礙有關(guān)。在組織分級較差、肌層浸潤程度較深、臨床病理分期較晚的患者中，C-erbB-2表達陽性率可進一步上升，這主要考慮與C-erbB-2對癌細胞多種生物學特征的影響有關(guān)，而p53表達與患者臨床病理分期的相關(guān)性，主要考慮與p53蛋白對腫瘤相關(guān)信號通路NOTCH的激活促進了癌病灶癥狀的轉(zhuǎn)移及臨床組織器官的累及有關(guān)。子宮內(nèi)膜癌患者的組織學分級越差，Ki-67的表達陽性率越高，提示了Ki-67可能影響癌細胞的細胞極性排列、組織分化差異性。最后，本次研究發(fā)現(xiàn)C-erbB-2、p53和Ki-67的表達具有內(nèi)在的相關(guān)性，不同的指標可能在影響癌細胞的分化、凋亡、轉(zhuǎn)移及遷移或者癌細胞DNA的增殖等方面具有一定的協(xié)同作用。

3.4總結(jié)

本次研究的創(chuàng)新性在于探討了C-erbB-2、p53和Ki-67等指標與子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理特征的關(guān)系，并揭示其內(nèi)在的相關(guān)關(guān)系。綜上所述，子宮內(nèi)膜癌組織C-erbB-2、p53和Ki-67表達明顯升高，與患者臨床病理特征有一定關(guān)系，值得進一步研究。

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