劉瑞生，王 珂，徐建峰，張新報(bào)，師希雄，薛春勝

(1. 甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所，甘肅 平?jīng)?744000；3. 平?jīng)鍪嗅轻紖^(qū)畜牧技術(shù)服務(wù)中心；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院； 4.平?jīng)雎殬I(yè)技術(shù)學(xué)院)

近年來(lái)食品安全問(wèn)題不斷發(fā)生，無(wú)抗養(yǎng)殖成為研究熱點(diǎn)。以天然動(dòng)植物為主要原料的中草藥無(wú)毒副作用、無(wú)殘留、不污染環(huán)境，成為抗生素的理想替代品。在畜禽養(yǎng)殖業(yè)上的研究報(bào)道很多，普遍發(fā)現(xiàn)能夠促進(jìn)生長(zhǎng)，增強(qiáng)抗病力，改善肉品質(zhì)和風(fēng)味。本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定中草藥添加劑飼喂舍飼肉羊后不同階段血常規(guī)和免疫功能參數(shù)的變化，研究中草藥添加劑對(duì)舍飼肉羊血常規(guī)指標(biāo)和免疫功能的影響，探討中草藥添加劑的作用機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選擇發(fā)育正常、體質(zhì)健康的3月齡左右薩?？?♂)×小尾寒羊(♀)雜交F1代公羔10只，隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組5只，在涼棚下圍欄內(nèi)舍飼養(yǎng)殖。試驗(yàn)從2016年5月8日開(kāi)始至8月20日結(jié)束，其中預(yù)試期15 d，正試期90 d。預(yù)試期間分別進(jìn)行剪毛、驅(qū)蟲(chóng)和疫苗免疫。

1.2 中草藥添加劑

中草藥添加劑組方原則為補(bǔ)血益氣，消食健胃，清熱解毒。由黃芪、川芎、白術(shù)、益母草、山楂、麥芽、肉桂、厚樸、枳殼、蒲公英組成，上述中草藥購(gòu)自平?jīng)鍪嗅t(yī)藥超市，分別粉碎過(guò)40目篩，按照一定比例混合均勻，封裝密備保存。

精料組成

1.3 飼喂方法

試驗(yàn)期間對(duì)照組飼喂精料，試驗(yàn)組在精料中添加1.5%中草藥添加劑，攪拌均勻飼喂90 d。其中，1～30 d、31～60 d和61～90 d苜蓿粉喂量分別為1.15、1.3和1.35 kg/(d·只)，精料喂量分別為0.45、0.55和0.55 kg/(d·只)。精料每天分早晚2次，苜蓿粉早、中、晚3次飼喂。早晚先喂精料，后喂苜蓿粉，中午僅喂苜蓿，自由飲水。精料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 精料組成及營(yíng)養(yǎng)水平

注：預(yù)混料營(yíng)養(yǎng)成分含量為：鋅 70.00 mg/kg、鐵 70.00 mg/kg、銅 20.00 mg/kg、錳 10.00 mg/kg、硒 0.25 mg/kg、碘 0.2 mg/kg、鉆 0.15 mg/kg、VA10000.00 IU/kg、VD900.00 IU/kg、VE50.00 mg/kg、VK2 mg/kg、VB120.02 mg/kg、膽堿 1000 mg/kg、煙酸 50.00 mg/kg、泛酸 50 mg/kg、核黃素 6 mg/kg、硫胺素 2 mg/kg、吡哆醇 2.00 mg/kg、生物素 0.2 mg/kg。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

分別在試驗(yàn)前、試驗(yàn)后1月、2月和3月末逐只空腹頸靜脈采血10 mL，其中5 mL利用西森美康(Sysmex)醫(yī)用電子(上海)有限公司生產(chǎn)的XT-2000i型全自動(dòng)血液分析儀測(cè)定血常規(guī)指標(biāo)；另外5 mL以3 000 r/min離心5 min，利用羅氏(Roche)診斷產(chǎn)品(上海)有限公司生產(chǎn)的羅氏全自動(dòng)/隨機(jī)存取臨床化學(xué)分析儀COBAS-C-311測(cè)定血清中免疫功能參數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel表格進(jìn)行整理，應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 中草藥添加劑對(duì)肉羊血常規(guī)指標(biāo)的影響

測(cè)定的6項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)，試驗(yàn)前試驗(yàn)組與對(duì)照組差異均不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)后不同測(cè)定階段，紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量試驗(yàn)組均高于對(duì)照組，差異不顯著(P>0.05)；淋巴細(xì)胞百分率和淋巴細(xì)胞絕對(duì)值試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；試驗(yàn)后1月和3月，血小板計(jì)數(shù)試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，試驗(yàn)后2月試驗(yàn)組高于對(duì)照組，但組間差異不顯著(P>0.05)。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2 中草藥添加劑對(duì)肉羊血清中免疫功能參數(shù)的影響

由表3可知，試驗(yàn)前血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比，試驗(yàn)組均低于對(duì)照組，差異不顯著(P>0.05)。總蛋白試驗(yàn)后各個(gè)測(cè)定階段試驗(yàn)組均高于對(duì)照組，且差異不顯著(P>0.05)。白蛋白和白細(xì)胞比，試驗(yàn)后兩組各階段比試驗(yàn)前都緩慢升高，試驗(yàn)組高于對(duì)照組(試驗(yàn)后3月白/球比例外)，但組間差異不顯著(P>0.05)。球蛋白含量逐漸降低，試驗(yàn)后各階段試驗(yàn)組均高于對(duì)照組，差異不顯著(P>0.05)。

試驗(yàn)前肉羊血清中IgG和IL-1含量試驗(yàn)組低于對(duì)照組，IgA含量高于對(duì)照組，組間差異均不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)后IgG含量試驗(yàn)組逐漸升高，對(duì)照組試驗(yàn)后1月和2月保持不變，試驗(yàn)后3月升高。IgA和IL-1含量，試驗(yàn)后兩組均逐漸升高，試驗(yàn)組各測(cè)定階段均高于對(duì)照組，差異不顯著(P>0.05)。IgM可能因?yàn)楹康?，未檢測(cè)到。

表2 肉羊血常規(guī)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

表3 試驗(yàn)羊血清中免疫功能參數(shù)測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 中草藥添加劑對(duì)肉羊血常規(guī)指標(biāo)的影響

血常規(guī)檢查是反映機(jī)體病理變化和評(píng)價(jià)健康水平的重要指標(biāo)。其中紅細(xì)胞總數(shù)反映動(dòng)物機(jī)體造血機(jī)能狀況，血紅蛋白是運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的載體，承擔(dān)氣體運(yùn)輸功能。白細(xì)胞具有吞噬微生物和異物的作用，對(duì)機(jī)體具有防御和保護(hù)機(jī)能。淋巴細(xì)胞參與機(jī)體的免疫過(guò)程，在機(jī)體特異性免疫反應(yīng)過(guò)程中起重要作用。血小板主要參與血凝和促進(jìn)止血，在纖維蛋白溶解過(guò)程中和維持血管內(nèi)皮完整性方面發(fā)揮作用。劉志英等(2012)在云嶺黑山羊日糧中添加中藥復(fù)方紫錐菊提取物，可顯著提高血液中的紅細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞壓積，對(duì)白細(xì)胞數(shù)也有一定的提高作用。李春燕等(2013)在波爾山羊精料中添加中草藥添加劑飼喂，對(duì)紅細(xì)胞類和白細(xì)胞類大部分指標(biāo)有促升高作用，血小板則有促降低作用。江曉麗(2017)在肉羊飼料中添加中草藥渣，白細(xì)胞總數(shù)提高。本研究試驗(yàn)后各個(gè)測(cè)定階段，試驗(yàn)組紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞和血小板數(shù)量都高于對(duì)照組；淋巴細(xì)胞百分率和淋巴細(xì)胞絕對(duì)值，試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明添加補(bǔ)血益氣的中草藥能夠改善肉羊造血機(jī)能，促進(jìn)肉羊血液有形成分生成及免疫活性細(xì)胞激活作用，有利于加強(qiáng)血液循環(huán)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收，增強(qiáng)免疫功能。與上述研究報(bào)道結(jié)果相同。

3.2 中草藥添加劑對(duì)肉羊血清中免疫功能參數(shù)的影響

血清蛋白質(zhì)包括總蛋白、白蛋白和球蛋白，總蛋白由白蛋白和球蛋白組成。血清白蛋白和球蛋白是反映機(jī)體抗病能力的重要指標(biāo)，具有維持血管內(nèi)正常膠體滲透壓和酸堿度、運(yùn)輸多種代謝物、調(diào)節(jié)被運(yùn)輸物質(zhì)的生理作用等多種功能，與機(jī)體免疫功能有密切關(guān)系。孟虹艷等(2008)在基礎(chǔ)日糧中添加1.5%中草藥添加劑，山羊血清中總蛋白和白蛋白顯著高于對(duì)照組。王明海等(2009)在精料中分別添加0.5%、1.0%、1.5%和2.0%中草藥添加劑，湖羊血清總蛋白和白蛋白隨之而上升。劉志英等(2012)和郝智慧等(2012)分別在精料中添加中草藥制劑復(fù)方紫錐菊提取物和強(qiáng)壯散、“促免增重顆粒”，可顯著提高云嶺黑山羊血清中總蛋白和球蛋白含量。江曉麗(2017)在肉羊日糧中添加中草藥渣，血清球蛋白含量提高。本研究試驗(yàn)后不同階段，試驗(yàn)組肉羊血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白含量都高于對(duì)照組，與上述研究結(jié)果一致。表明中草藥添加劑能夠促進(jìn)肉羊血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白生成，增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能，提高抗病力。

免疫球蛋白分為IgG、IgA和IgM 3類，能與機(jī)體內(nèi)抗原特異性結(jié)合，參與體液免疫反應(yīng)，具有抗菌、抗病毒等生物學(xué)功能。其中IgG 在血液中含量最高，是機(jī)體免疫應(yīng)答中最持久、最重要的抗體，在抗感染中發(fā)揮著主力軍作用。王明海等(2009)報(bào)道，隨著飼料中草藥含量的增加，湖羊血液中免疫球蛋白IgA、IgG含量逐漸增加。劉志英等(2012)發(fā)現(xiàn)強(qiáng)壯散和復(fù)方紫錐菊提取物均可提高云嶺黑山羊血清中IgG含量，分別比對(duì)照組提高3.5和1.3倍。汪水平等(2013)在基礎(chǔ)日糧上日喂15 g/頭中藥復(fù)方Ⅰ和復(fù)方Ⅱ，能極顯著提高山羊血清IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體3/4等濃度及IL-2水平[8]。本研究發(fā)現(xiàn)中草藥添加劑對(duì)肉羊血清中IgG和IgA生成具有促進(jìn)作用，與上述報(bào)道基本一致。白細(xì)胞介素1(IL-1)又稱淋巴細(xì)胞激活因子，在炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)中起著傳遞信息，促使細(xì)胞分化、繁殖等多方面的作用。本研究首次測(cè)定了中草藥添加劑對(duì)肉羊血清中IL-1含量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同測(cè)定階段，試驗(yàn)組IL-1含量均高于對(duì)照組，表明中草藥添加劑能夠增強(qiáng)肉羊免疫功能。

4 結(jié)論

在精料中添加1.5%中草藥添加劑，能夠不同程度增加肉羊血液中紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞百分率、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值和血小板計(jì)數(shù)，提高肉羊血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A和白細(xì)胞介素1含量。表明中草藥添加劑能夠提高肉羊免疫功能，增強(qiáng)抗病力。

參考文獻(xiàn):

[1] 劉志英，楊國(guó)榮，王春元，等.不同中草藥復(fù)方制劑對(duì)云嶺黑山羊生產(chǎn)性能及免疫功能的影響[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2012，21(3)：266-274.

[2] 李春燕，湯德元，甘振磊，等.中草藥添加劑對(duì)羊生長(zhǎng)性能、血常規(guī)及其免疫功能影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)(科技版)，2013，7月(上)，115-118.

[3] 江曉麗.日糧中添加中草藥對(duì)肉羊增重的影響[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2017，36(1)122-123.

[4] 孟虹艷，張艷玲，安元，等.中草藥對(duì)林下養(yǎng)殖山羊生產(chǎn)和防病的研究[J].飼料研究，2008(5)：55-58.

[5] 王明海，毛紹斌.中草藥對(duì)湖羊生產(chǎn)性能及血清生化指標(biāo)的影響[J].中國(guó)飼料，2008(7)：24-26.

[6] 郝智慧，王春元，楊國(guó)榮，等.中藥復(fù)方制劑“促免增重顆?！睂?duì)云嶺黑山羊血液生理生化指標(biāo)的影響[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2012，31(3)：54-56.

[7] 王明海，毛紹斌.中草藥飼料添加劑對(duì)湖羊生產(chǎn)性能及免疫的影響[J].金陵科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，25(1)：92-96.

[8] 汪水平，王文娟，左福元，等.中藥復(fù)方對(duì)山羊的影響：Ⅴ.血清代謝產(chǎn)物濃度及免疫和抗氧化功能參數(shù)[J].中國(guó)畜牧雜志，2013，49(1)：44-49.