彭繼升，楊晉翔，安 靜，魏 玥，賀梅娟

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，北京 100029； 2.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)

·實(shí)驗(yàn)研究·

化瘀解毒益氣法對(duì)慢性萎縮性胃炎伴異型增生大鼠胃黏膜細(xì)胞PCNA水平和凋亡狀況的干預(yù)研究*

彭繼升1，楊晉翔1，安 靜1，魏 玥1，賀梅娟2

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，北京 100029； 2.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)

目的：觀察以化瘀解毒益氣法為治則的中藥消痞顆粒對(duì)慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis, CAG)伴異型增生大鼠胃黏膜細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法：以MNNG癌誘變劑灌胃為主多因素聯(lián)合建立CAG伴Dys大鼠模型，按體質(zhì)量隨機(jī)分成自然恢復(fù)組、維酶素組與中藥組，分別給予生理鹽水、維酶素懸濁液、消痞顆粒灌胃，并與正常對(duì)照組大鼠對(duì)照。干預(yù)階段持續(xù)12周，觀察各組大鼠胃黏膜病理變化、免疫組化檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)水平、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記測(cè)定[terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL]法檢測(cè)胃黏膜上皮細(xì)胞凋亡狀況。結(jié)果：中藥組治療后與自然恢復(fù)組胃黏膜病理存在顯著差異(P<0.05)，維酶素組與自然恢復(fù)組無(wú)明顯差異(P>0.05)；消痞顆粒組凋亡指數(shù)顯著低于自然恢復(fù)組和維酶素組(P<0.01,P<0.05)。自然恢復(fù)組和維酶素組間無(wú)顯著性差異；消痞顆粒組PCNA表達(dá)的陽(yáng)性比與維酶素組、自然恢復(fù)組間均存在顯著差異(P<0.05,P<0.01)；而維酶素組與自然恢復(fù)組間并無(wú)顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論：消痞顆?？筛纳艭AG伴Dys大鼠胃黏膜的病理變化，降低其凋亡指數(shù)及PCNA表達(dá)。

化瘀解毒益氣法；慢性萎縮性胃炎/藥物作用；細(xì)胞增殖；細(xì)胞凋亡；消痞顆粒/治療應(yīng)用；動(dòng)物模型，大鼠

胃癌是人類最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，一般認(rèn)為胃癌的演變規(guī)律為：正常胃黏膜→淺表性胃炎→萎縮性胃炎→腸上皮化生→異型增生→胃癌(腸型)[1]。異型增生是目前公認(rèn)的胃癌癌前病變，基本認(rèn)為其病變是不可逆的，但阻斷其繼續(xù)向胃癌的發(fā)展，仍是目前防治胃癌的研究關(guān)鍵。胃黏膜細(xì)胞的增殖和凋亡失衡在慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis, CAG)向胃癌發(fā)展過(guò)程中扮演著重要角色。前期研究[2]顯示:中藥消痞顆粒以化瘀解毒益氣法為治則，對(duì)胃癌前病變有著確定的臨床療效，并可有效干預(yù)CAG伴不典型增生大鼠的抑癌基因。本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)免疫組化檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記測(cè)定[terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL]法檢測(cè)胃黏膜上皮細(xì)胞凋亡狀況，觀察消痞顆粒對(duì)異型增生大鼠胃黏膜細(xì)胞增殖和凋亡狀況的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng) 物

無(wú)特定病原體Wistar實(shí)驗(yàn)用雄性大鼠60只，4周齡，體質(zhì)量約100 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物批號(hào)：SCXK(京)2012-0001。清潔級(jí)普通飼料、清潔級(jí)加藥飼料(由普通飼料添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.03%的鹽酸雷尼替丁)均由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供。

1.2 藥品、試劑與儀器

消痞顆粒劑由黨參、炙百合、烏藥、香櫞皮、丹參、三七粉、莪術(shù)、蒲公英、白花蛇舌草組成，由北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院藥劑科制成顆粒沖劑，12 g/袋，每克沖劑含生藥9 g。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要配制成0.6 g/mL(含生藥3 g/mL)的藥液，裝入器皿中，放置在4 ℃冰箱中以備用。維酶素片,河北環(huán)海藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)20090506；N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)，日本東京化成工業(yè)株式會(huì)社產(chǎn)品，編號(hào)M0527；質(zhì)量分?jǐn)?shù)28%氨水，西隴化工有限公司產(chǎn)品，批號(hào)1503232，CAS登陸號(hào)1336-21-1，臨用配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5 g/L的氨水溶液。鹽酸雷尼替丁膠囊，石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，規(guī)格為0.15 g/粒，批號(hào)100902256。戊巴比妥鈉，美國(guó)Sigma 公司產(chǎn)品，CAS登陸號(hào)57-33-0，貨號(hào)P376，根據(jù)取材需要量配置成10 g/L溶液備用。PCNA (PC10) Mouse mAb，Cell Signaling Technology, Inc產(chǎn)品，產(chǎn)品編號(hào)2586s；細(xì)胞凋亡試劑盒(In Situ Cell Apoptosis Detction Kit I,POD)，產(chǎn)品編號(hào)11684817910，羅氏Roche產(chǎn)品。

1.3 動(dòng)物分組、模型的建立與給藥

60只大鼠經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，按體質(zhì)量隨機(jī)分為兩組。正常對(duì)照組10只，以清潔級(jí)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)提供普通飼料喂養(yǎng)，持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束；造模組50只，如下述造模方法和飼養(yǎng)條件進(jìn)行干預(yù)。模型的建立參照相關(guān)文獻(xiàn)[3]及前期實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)[4]，以MNNG癌誘變劑灌胃為主、多因素聯(lián)合建立慢性萎縮性胃炎伴異型增生大鼠模型。動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室屏蔽環(huán)境下分籠飼養(yǎng)，每5只分為1籠，正常光照條件，明暗周期 12/12 h，室溫(25±3)℃，相對(duì)濕度(50±5)%。模型組大鼠自由飲用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5 g/L氨水溶液(每24 h新鮮配制并更換1次)，自由進(jìn)食質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3 g/L鹽酸雷尼替丁清潔級(jí)大鼠飼料，予120 mg/L的MNNG溶液灌胃，每只5μL/(g·d)。于實(shí)驗(yàn)第20，24，26，28，30，32周末分別隨機(jī)抽檢2只動(dòng)物。第32周末造模成功，造模結(jié)束。第33周始將造模組剩余的33只大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分成自然恢復(fù)組、維酶素組和消痞顆粒組3組，每組11只。以清潔級(jí)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)提供普通飼料和水。自然恢復(fù)組予生理鹽水3 μL/(g·d)灌胃；維酶素組予維酶素懸濁液2 μL/(g·d)(即維酶素0.3 g/kg)灌胃；消痞顆粒組予消痞顆粒懸濁液3 μL/(g·d)(含生藥9 g/kg)灌胃。干預(yù)階段持續(xù)12周。所有實(shí)驗(yàn)大鼠于第44周末處死。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1.4.1 取 材

于實(shí)驗(yàn)第44周末取材。取材前各組大鼠禁食不禁水18 h。以質(zhì)量分?jǐn)?shù)10g/L的戊巴比妥鈉按30 μg/g經(jīng)腹腔注射麻醉大鼠；迅速沿大彎側(cè)剪開(kāi)，40 g/L 生理鹽水漂洗內(nèi)容物；再沿小彎側(cè)剪開(kāi)；用濾紙吸干水分；切取病變胃黏膜組織，切取胃竇組織；甲醛固定，石蠟包埋，用于病理切片、免疫組化檢測(cè)及TUNEL檢測(cè)。

1.4.2 胃黏膜組織病理變化

采用常規(guī)HE染色，病理分析標(biāo)準(zhǔn)采用2000年全國(guó)慢性胃炎研討會(huì)共識(shí)意見(jiàn)[5]和2006年全國(guó)慢性胃炎共識(shí)意見(jiàn)中的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，分為正常、輕度、中度、重度4個(gè)等級(jí)。

1.4.3 細(xì)胞凋亡指數(shù)、PCNA蛋白表達(dá)

操作步驟參照張玲霞等[7]的報(bào)道。細(xì)胞核呈棕褐色著染或細(xì)胞漿因核 DNA逸出呈陽(yáng)性著染者, 為凋亡細(xì)胞。每張切片觀察5個(gè)視野, 每個(gè)視野計(jì)數(shù)100 個(gè)細(xì)胞核, 計(jì)數(shù)中凋亡細(xì)胞比率的均數(shù)為凋亡指數(shù)。采用免疫組化法檢測(cè)。具體步驟：①常規(guī)脫蠟和水化。②抗原修復(fù)：0.1 mL/L Triton 浸潤(rùn)15 min(每片100 μL)；0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3；30 mL/L H2O2-CH3OH浸潤(rùn)10 min，0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3；微波抗原修復(fù)10 min，自然冷卻到室溫；0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3；加山羊血清浸潤(rùn)20 min；將山羊血清甩去，滴加Ⅰ抗(稀釋200倍)，放于冰箱中，4 ℃過(guò)夜；從冰箱中將切片去除，在室溫中放置30 min，0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3；滴加Ⅱ抗，在37 ℃的溫度下浸潤(rùn)20 min，0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3。③顯色：滴加SABC，在37 ℃的溫度下浸潤(rùn)20 min，0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3；DAB顯色10 min，鏡下觀察；自來(lái)水沖洗，ddH2O沖洗；蘇木精復(fù)染1 s，0.01 mol/L PBS 浸潤(rùn)3 min×3。④脫水封片。免疫組化結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)：PCNA陽(yáng)性染色為棕褐色顆粒。在高倍鏡(×40)視野隨機(jī)選取5個(gè)視野攝像，使用IPP7.0圖像分析軟件進(jìn)行圖像分析，并計(jì)算總面積內(nèi)的平均光密度值，進(jìn)行半定量分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 大鼠死亡情況

造模階段：造模組大鼠共抽檢12只，死亡5只；正常對(duì)照組大鼠無(wú)死亡。第16周造模組出現(xiàn)1只大鼠死亡，解剖后發(fā)現(xiàn)肺水腫，考慮為灌胃不當(dāng)所致。造模組第24，28周各有1只大鼠分別于右下腋、右后頸項(xiàng)部出現(xiàn)皮下腫物，包膜完整，其中1只大鼠病理檢查示類子宮內(nèi)膜樣組織；第30，32周各有1只大鼠死亡，肺部組織出現(xiàn)輕、中度感染，肺間質(zhì)肺炎。

干預(yù)階段：共43只大鼠進(jìn)入干預(yù)階段，自然恢復(fù)組、消痞顆粒組、維酶素組各11只，正常對(duì)照組10只。消痞顆粒組與正常對(duì)照組均無(wú)大鼠死亡，自然恢復(fù)組死亡3只，維酶素組死亡2只。5只大鼠死亡前體質(zhì)量下降明顯，腹脹明顯，解剖結(jié)果示死亡由全胃腸道脹氣所致，尤其回盲部明顯；3只大鼠可聞及明顯喘鳴音，口鼻處有血性或黏性分泌物，解剖后肺組織病理確診肺部有感染，有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。

2.2 各組大鼠胃黏膜組織病理改變對(duì)比

造模階段模型組：實(shí)驗(yàn)第20周，1只大鼠胃黏膜固有腺體上皮細(xì)胞出現(xiàn)核分裂象，判斷出現(xiàn)異常增生，另一只大鼠未出現(xiàn)異型增生，繼續(xù)實(shí)驗(yàn)的造模部分。實(shí)驗(yàn)第24周，胃竇部黏膜僅出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，有少量以淋巴細(xì)胞為主的慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，余無(wú)明顯異常病變。實(shí)驗(yàn)第26周末，模型組抽檢大鼠胃黏膜除炎性細(xì)胞浸潤(rùn)外出現(xiàn)黏膜變薄，黏膜肌層增厚，固有腺體減少。實(shí)驗(yàn)第28周末，模型組抽檢大鼠除胃黏膜慢性炎癥反應(yīng)、黏膜變薄及腺體減少外，出現(xiàn)腸上皮化生。實(shí)驗(yàn)第30周，1只大鼠病理切片示胃竇部出現(xiàn)異型增生，另1只大鼠胃竇部未出現(xiàn)異常增生。實(shí)驗(yàn)第32周，2只大鼠病理切片示胃竇部均出現(xiàn)異常增生。見(jiàn)圖1。

實(shí)驗(yàn)第44周末，自然恢復(fù)組大鼠胃竇部及胃體底部黏膜上皮萎縮變薄，腺體數(shù)量減少，間質(zhì)內(nèi)有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，偶見(jiàn)單核細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞，可見(jiàn)淋巴濾泡形成和腸上皮化生，以及不同程度的異型增生，表現(xiàn)為細(xì)胞大小、形態(tài)不均一，結(jié)構(gòu)不規(guī)整，核漿比例顯著增大，出現(xiàn)核分裂，個(gè)別腺體呈共壁形象或囊性擴(kuò)張，見(jiàn)圖2。維酶素組大鼠胃竇部及胃體黏膜仍有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，表現(xiàn)為程度不等的慢性淺表性、萎縮性胃炎等改變，較自然恢復(fù)模型組輕，見(jiàn)圖3。消痞顆粒組大鼠胃竇部及體部黏膜上皮排列規(guī)整，腺體大小、形態(tài)較均一，偶有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，見(jiàn)圖4。正常對(duì)照組大鼠胃黏膜層厚度正常，胃黏膜上皮細(xì)胞呈單層柱狀，胞漿透明或呈小空泡狀，與腺管分界清楚，腺管結(jié)構(gòu)排列整齊，大小、形狀均一，見(jiàn)圖5。

胃黏膜中、重度異型增生圖1 實(shí)驗(yàn)第32周大鼠胃黏膜組織病理改變 (HE，×10)

胃竇部重度異型增生，腺體結(jié)構(gòu)異常，腺體排列不整齊，有囊性擴(kuò)張圖2 實(shí)驗(yàn)第44周末自然恢復(fù)組大鼠胃黏膜組織病理改變(HE，×20)

胃黏膜腺體結(jié)構(gòu)異常，腺體排列不整齊，輕度腸上皮化生，中度異型增生圖3 實(shí)驗(yàn)第44周末維酶素組大鼠胃黏膜組織病理改變(HE，×4)

胃黏膜腺體增生不明顯，有輕度炎癥，胃黏膜接近正常圖4 實(shí)驗(yàn)第44周末消痞顆粒組大鼠胃黏膜組織病理改變(HE，×10)

胃黏膜正常圖5 實(shí)驗(yàn)第44周末正常對(duì)照組大鼠胃黏膜組織病理改變(HE，×20)

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：正常對(duì)照組與其余各組病理情況對(duì)比，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。消痞顆粒組與自然恢復(fù)組間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。維酶素組與自然恢復(fù)組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。消痞顆粒組與維酶素組間差別亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組干預(yù)結(jié)束后階段病理變化情況

表1 各組干預(yù)結(jié)束后階段病理變化情況

組 別例數(shù)異型增生輕度中度重度合計(jì)正常對(duì)照組1000010自然恢復(fù)組12238??維酶素組32229??消痞顆粒組722011?#

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，*P<0.05，**P<0.01；與自然恢復(fù)組對(duì)比，#P<0.05

2.3 各組大鼠細(xì)胞凋亡指數(shù)對(duì)比

正常大鼠胃黏膜中，凋亡細(xì)胞主要位于表面上皮內(nèi)，呈簇狀分布或單個(gè)散在分布。自然恢復(fù)組、維酶素組凋亡細(xì)胞的陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)為棕黃色,位于細(xì)胞核內(nèi),濃縮的核質(zhì)緊貼于核膜,或核質(zhì)呈現(xiàn)均勻的染色。其余3組模型大鼠凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增多，高于正常對(duì)照組大鼠，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。消痞顆粒組凋亡指數(shù)也低于自然恢復(fù)組和維酶素組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。自然恢復(fù)組和維酶素組間差別亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠細(xì)胞凋亡指數(shù)對(duì)比

表2 各組大鼠細(xì)胞凋亡指數(shù)對(duì)比

組 別動(dòng)物數(shù)/只凋亡指數(shù)正常對(duì)照組100．065±0．010自然恢復(fù)組80．303±0．016???維酶素組90．288±0．009???##消痞顆粒組110．275±0．014???###△△

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，** *P<0.01；與自然恢復(fù)組對(duì)比，##P<0.05，###P<0.01；與維酶素組對(duì)比，△△P<0.05。

2.4 各組大鼠PCNA蛋白表達(dá)水平對(duì)比

各組大鼠胃黏膜均出現(xiàn)PCNA陽(yáng)性顯色。正常對(duì)照組黏膜陽(yáng)性細(xì)胞較少，主要位于增殖帶，分布規(guī)律，著色弱。模型組陽(yáng)性細(xì)胞增多，全層均有表達(dá)，著色加深，不典型增生部位陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增多。消痞顆粒組陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少。經(jīng)圖像軟件處理，定量分析顯示：與正常對(duì)照組對(duì)比，其余3組大鼠PCNA蛋白表達(dá)增高，差別有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.01)。消痞顆粒組PCNA蛋白表達(dá)水平較維酶素組、自然恢復(fù)組低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。維酶素組與自然恢復(fù)組間PCNA蛋白表達(dá)水平對(duì)比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠PCNA蛋白表達(dá)水平對(duì)比

表3 各組大鼠PCNA蛋白表達(dá)水平對(duì)比

組 別動(dòng)物數(shù)/只PCNA蛋白表達(dá)正常對(duì)照組100．150±0．011自然恢復(fù)組80．337±0．016???維酶素組90．330±0．011???#消痞顆粒組110．314±0．024???###△△

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，***P<0.01；與自然恢復(fù)組對(duì)比，#P>0.05,###P<0.01；與維酶素組對(duì)比，△△P<0.05。

3 討 論

據(jù)調(diào)查，我國(guó)20世紀(jì)90年代胃癌死亡占惡性腫瘤死亡的23.2%，并且在過(guò)去的20年中，呈上升趨勢(shì)[8]，因此，胃癌是目前腫瘤防治的重點(diǎn)。目前一般認(rèn)為，胃癌是由癌前病變逐步發(fā)展形成的[9]，利用各種干預(yù)手段積極治療癌前病變對(duì)防治胃癌的發(fā)生具有重要意義[10]。CAG是胃癌的癌前疾病，胃癌前病變是多因素、多階段綜合作用下，逐步緩慢進(jìn)展的長(zhǎng)期過(guò)程。長(zhǎng)期慢性刺激、反復(fù)損傷導(dǎo)致慢性胃黏膜炎癥反應(yīng)，組織不斷修復(fù)增生是形成胃癌前病變的充要條件。胃黏膜細(xì)胞的增殖和凋亡失衡在CAG向胃癌發(fā)展過(guò)程中扮演著重要角色。

維持胃黏膜的正常結(jié)構(gòu)依賴于胃黏膜細(xì)胞喪失和更新的動(dòng)態(tài)平衡。正常的細(xì)胞凋亡機(jī)制可以清除機(jī)體內(nèi)受損、變異和衰老的細(xì)胞。研究表明,在從正常胃黏膜到萎縮性胃炎過(guò)程中,細(xì)胞凋亡指數(shù)及細(xì)胞增殖指數(shù)均呈遞增趨勢(shì),細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖呈正相關(guān)[11]。TUNEL法是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的常用方法，可對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡最典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)是一種僅在增殖細(xì)胞中合成與表達(dá)的36 kD多肽。已證明PCNA表達(dá)與細(xì)胞增殖周期有關(guān)。G1期PCNA表達(dá)逐漸增加，S期達(dá)到高峰，而G2/M期減少[12]。檢測(cè)PCNA指數(shù)對(duì)了解癌細(xì)胞的增殖狀態(tài)有很高的價(jià)值，PCNA表達(dá)越強(qiáng),細(xì)胞惡化程度越高[13]。

筆者認(rèn)為萎縮性胃炎伴胃黏膜異型增生是毒、瘀、虛共同、長(zhǎng)期積累的結(jié)果，尤其是毒致胃黏膜發(fā)生異型增生，因此，提出毒損胃絡(luò)是胃黏膜異型增生的重要病機(jī)。筆者臨床中應(yīng)用這一理論辨證論治，發(fā)現(xiàn)對(duì)胃黏膜異型增生的逆轉(zhuǎn)有理想的療效[14-16]。消痞顆粒是筆者多年來(lái)研究的化瘀解毒益氣的方劑，由黨參、炙百合、烏藥、香櫞、丹參、三七、莪術(shù)、蒲公英、白花蛇舌草組成，可有效治療萎縮性胃炎伴胃黏膜異型增生，逆轉(zhuǎn)胃癌癌前病變[17]。本實(shí)驗(yàn)中消痞顆粒組大鼠胃黏膜細(xì)胞病理改變較維酶素組、自然恢復(fù)組為輕，圖像分析示消痞顆粒組PCNA表達(dá)及凋亡指數(shù)均低于維酶素組及自然恢復(fù)組，表明消痞顆粒可有效地干預(yù)萎縮性胃炎病變大鼠的胃黏膜細(xì)胞增殖和凋亡狀況。此為消痞顆粒有效阻止萎縮性胃炎向癌變發(fā)生提供了一定理論支持。

[1]Yasui W, Yokozaki H, Fujimoto J, et al.Genetic and epigenetic alterations in multistep carcinogenesis of the stomach[J].J Gastroenterol, 2000,35(S12):111～115.

[2]魏玥, 楊晉翔, 王再見(jiàn), 等.益氣化瘀解毒法對(duì)慢性萎縮性胃炎伴異型增生大鼠p53的影響[J].世界華人消化雜志 2011,19(34): 3494-3497.

[3]Sugimura T, Fujimura S, Baba T.Tumor production in the glandular stomach and alimentary tract of rat by N-methyl-N′-nitro-N-nitrosognanidine [J].Cancer Res,1970,30(2):455-465.

[4]魏玥,楊晉翔,李志剛.N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍胃癌前病變大鼠造模聯(lián)合因素的探討[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志,2011,19(2):111-112.

[5]中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì).全國(guó)慢性胃炎研討會(huì)共識(shí)意見(jiàn)[J].中華消化雜志, 2000,20(3): 51-53.

[6]中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì).中國(guó)慢性胃炎共識(shí)意見(jiàn)[J].胃腸病學(xué), 2006,11(11): 674-684.

[7]張玲霞, 張瀝,徐俊榮，等.萎縮性胃炎胃黏膜組織細(xì)胞增殖與凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華內(nèi)科雜志, 2003,42(2):84-87.

[8]孫秀娣,牧人,周有尚,等.中國(guó)胃癌死亡率20年變化情況分析及其發(fā)展趨勢(shì)預(yù)測(cè)[J].中華腫瘤雜志,2004,26(1): 4-9.

[9]陸再英,鐘南山.內(nèi)科學(xué) [M].7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:397-384.

[10]Shao XH, Yang YP, Dai J, et al.Effects of He-Ne laser irradiation on chronic atrophic gastritis in Rats[J].World J Gastroenterol, 2005, 11(25): 3958-3961.

[11]彭黎明,王曾禮.細(xì)胞凋亡的基礎(chǔ)與臨床[M].1版.北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2000:112-119.

[12]Van Dierendonck JH, Wijsman JH, Keijzer R, et al.Cell-cycle-related staining patterns of anti-proliferating cell nuclear antigen monoclonal anti-bodies.Comparison with BrdUrd labeling and Ki-67 staining [J].Am J Pathol, 1991, 138(5): 1165-1172.

[13]衛(wèi)洪波,韓曉燕,王吉甫.維甲酸對(duì)大腸黏膜細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)的影響[J].中華普通外科雜志, 1999, 14(2): 136-138.

[14]王永炎,杜懷棠,田德祿.董建華醫(yī)學(xué)文集[M].北京:北京科學(xué)技術(shù)出版社,2000:43-45.

[15]張杰,呂明安.淺談慢性CAG的病機(jī)與證治[J].中醫(yī)雜志,2005,46(9):656.

[16]馮軍安,楊晉翔,韓海嘯.中醫(yī)毒邪理論在慢性萎縮性胃炎防治中的應(yīng)用[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)：中醫(yī)臨床版,2008,15(2):33-44.

[17]楊晉翔,魯香鳳,張旭晨.消痞靈沖劑對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性萎縮性胃炎伴不典型增生胃黏膜CEA及rasP21變化的影響[J].中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào), 2003,18(5):282-285.

(編輯 陶 珠)

1001-6910(2015)03-0049-05

R573.3+2

B

10.3969/j.issn.1001-6910.2015.03.26

彭繼升(1980-)，男(漢族)，山東聊城人，北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院脾胃病科副主任醫(yī)師，博士，主要從事消化代謝疾病的中醫(yī)藥防治。

2012年北京中醫(yī)藥大學(xué)青年教師專項(xiàng)計(jì)劃(2012-QNJSZX024)

2014-09-11；

2015-01-05