徐飛　王俊美　楊共強　宋玉立　趙凱　韓自行　李麗娟　劉露露　李亞紅　張姣姣

摘要

為明確不同殺菌劑防治小麥赤霉病和減少小麥籽粒中DON（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇）毒素積累的效果，于大田人工接菌條件下進(jìn)行了不同殺菌劑對小麥赤霉病的防治試驗，并于收獲期測定了不同藥劑處理的小麥籽粒中DON毒素含量。結(jié)果表明：兩種處理方式下，50%多菌靈WP，30%多·酮SC，25%戊唑醇WP，25%氰烯菌酯SC和70%甲基硫菌靈WP處理中，除先噴藥后接菌條件下25%戊唑醇WP在病粒率和籽粒中DON積累上沒有顯著防治效果，接菌后1 d噴藥條件下50%多菌靈WP、25%戊唑醇WP在病粒率上沒有顯著防治效果；30%多·酮SC在病粒率和籽粒中DON積累上沒有顯著防治效果外，各處理對小麥的病穗率、病情指數(shù)、病粒率和籽粒中DON積累都有顯著的防治效果（P<0.05）。各處理的病穗率防效在42.4%～83.5%，病情指數(shù)防效在44.9%～88.2%，病粒率防效在34.7%～69.4%，籽粒中DON防效在48.0%～86.9%。上述幾種殺菌劑具有明顯的保護(hù)作用，其在先噴藥后接菌條件下的防治效果均明顯優(yōu)于接菌后1 d噴藥的防治效果。兩種處理方式下，30%己唑醇懸浮劑、25%嘧菌酯懸浮劑和12.5%烯唑醇可濕性粉劑處理在病穗率、病情指數(shù)、病粒率和籽粒中DON積累與清水對照處理沒有顯著性差異（P>0.05）。

關(guān)鍵詞

小麥； 赤霉??； 殺菌劑； 防治效果； 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇

中圖分類號：

S 435.121.45

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2017283

Effect of fungicides on Fusarium head blight and deoxynivalenol

content in wheat grain

XU Fei， WANG Junmei， YANG Gongqiang， SONG Yuli， ZHAO Kai，

HAN Zihang， LI Lijuan， LIU Lulu， LI Yahong， ZHANG Jiaojiao

（Institute of Plant Protection， Henan Academy of Agricultural Sciences， Key Laboratory of Integrated Pest

Management on Crops in the Southern Part of North China， Ministry of Agriculture， Zhengzhou 450002， China）

Abstract

The control effect of different fungicides against Fusarium head blight were evaluated by spraying on the surface of plant before or after inoculation with Fusarium graminearum in the field. Deoxynivalenol （DON） concentration in kernel were also determined after the wheat harvest. The results revealed that tebuconzole 25% WP treatment had no significant control effect on disease kernel rate and DON content under the condition of treated before inoculation； tebuconzole 25% WP， carbendazim·triadimefon 30% SC， and carbendazim 50% WP treatment had no significant control effect on disease kernel rate under the condition of treated after inoculation， and there was no significant control effect of carbendazim·triadimefon 30% SC treatment on DON accumulation in grains. Except the abovementioned situation， phenamacril 25% SC， tebuconzole 25% WP， carbendazim·triadimefon 30% SC， carbendazim 50% WP， and thiophanatemethyl 70% WP could significantly reduce the percentage of diseased ear and kernel， disease index and DON content. The control effect was 42.4%-83.5% for diseased ear rate， 44.9%-88.2% for disease index， 34.7%-69.4% for disease kernel rate and 48.0%-86.9% for DON content. The diseased ear rate， disease kernel rate， disease index and DON content of wheat treated by hexaconazole 30% SC， azoxystrobin 25% SC and diniconazole 12.5% WP had no significant difference with those of the control （P>0.05） under both treatment ways.

Key words

wheat； Fusarium head blight； fungicide； control effect； deoxynivalenol

小麥赤霉?。‵usarium head blight）是由禾谷鐮刀菌Fusarium graminearum Schwabe引起的小麥上的重要病害，不僅引起嚴(yán)重的產(chǎn)量損失，而且感病籽粒中產(chǎn)生的毒素危害人類健康，引起牲畜不同程度的中毒反應(yīng)[13]。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）是禾谷鐮刀菌產(chǎn)生的一種主要毒素，我國、北美和歐盟對DON在小麥制品中的殘留均制定了限量標(biāo)準(zhǔn)。我國小麥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，赤霉病粒最大允許含量為4%，食品中DON限量指標(biāo)為1 mg/kg[4]，豬、犢牛和泌乳期動物的配合飼料中DON≤1 mg/kg，牛和家禽配合飼料中DON≤5 mg/kg[5]。美國、歐盟、奧地利和加拿大食品中DON限量指標(biāo)分別為1 mg/kg、0.5 mg/kg、0.5 mg/kg和2 mg/kg[6]。

近年來，小麥赤霉病在華北冬麥區(qū)發(fā)生越來越嚴(yán)重，特別是2012年和2016年在河南省大發(fā)生，造成嚴(yán)重?fù)p失[7]。種植抗病品種是防治小麥赤霉病既經(jīng)濟(jì)又安全的方法，但在目前華北麥區(qū)缺乏小麥赤霉病抗病品種的情況下，使用藥劑防治仍是十分必要的[8]。雖然已有學(xué)者對防治小麥赤霉病的殺菌劑進(jìn)行篩選和效果評價，但是結(jié)合籽粒中DON的積累的防效評價還鮮有報道[913]。

本研究選取市場上常用的幾種殺菌劑，在大田人工接菌條件下評價了其對赤霉病防治效果和減少籽粒中DON毒素積累效果，以期為生產(chǎn)上小麥赤霉病的藥劑防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試小麥品種：‘金地828，親本為‘周麥16/‘百農(nóng)矮抗58，屬半冬性中晚熟品種，高感小麥赤霉病。

供試殺菌劑：50%多菌靈可濕性粉劑（WP），25%戊唑醇可濕性粉劑（WP），25%氰烯菌酯懸浮劑（SC），70%甲基硫菌靈可濕性粉劑（WP），30%己唑醇懸浮劑（SC）， 25%嘧菌酯懸浮劑（SC），12.5%烯唑醇可濕性粉劑（WP）和30%多·酮懸浮劑（SC），共6種單劑和1個復(fù)配劑。其使用劑量為廠家推薦劑量（表1）。

1.2 田間試驗設(shè)計

試驗地點在河南省焦作市溫縣黃莊鎮(zhèn)（經(jīng)度：112.959 4°，緯度：34.980 2°，海拔112.8 m），每個處理3個重復(fù)，每個小區(qū)寬2 m，長6 m，行距20 cm，播種量為150 kg/hm2，按常規(guī)措施進(jìn)行田間管理。

1.3 接種物的培養(yǎng)與田間接種

試驗菌株為5株毒素化學(xué)型均為15ADON的禾谷鐮刀菌，分別為14LY924、14AY12、14YY13、14KF38、14ZK14。將-80℃凍存的禾谷鐮刀菌菌株在新鮮的PDA平板上活化，25℃黑暗條件下培養(yǎng)3 d，打取10塊直徑5 mm的邊緣菌絲塊轉(zhuǎn)接到150 mL的羧甲基纖維素酯液體培養(yǎng)基（CMC）中，置于恒溫?fù)u床上，25℃ 150 r/min 搖培5 d，每個菌株10瓶（150 mL CMC/250 mL三角瓶）。分別將供試菌株的分生孢子懸浮液用雙重紗布過濾，用血球計數(shù)板計數(shù)，記錄各菌株分生孢子濃度并置于-20℃的冰箱保存。使用前將各菌株等孢子量混合，用水調(diào)整分生孢子濃度為5×104個/mL用于田間噴霧接種。于小麥揚花盛期時（Zadoks[14]=69即90%以上揚花）使用手持式電動噴霧器（型號：3WBS16A2，西安樂鑫電子科技有限公司），統(tǒng)一進(jìn)行田間接種，分生孢子懸浮液濃度為5×104個/mL，噴霧量50 mL/m2。接種前先噴水保濕，用水量為375 L/ hm2，接種后連續(xù)5 d每天使用手持式電動噴霧機(jī)噴清水2次進(jìn)行保濕以保證發(fā)病條件，每次用水量為750 L/ hm2。噴藥采用手持式氣壓噴霧器（1.2 L氣壓式噴霧器）均勻噴霧。評價藥劑保護(hù)效果的試驗采用先噴藥而后馬上噴菌；評價藥劑治療效果的試驗采用先噴菌，1 d后噴藥。噴菌和噴藥的時間選擇下午4：00點后，在晴天無風(fēng)條件下噴霧。

1.4 病害調(diào)查和采后分析

接種21 d后調(diào)查病穗率和病級，調(diào)查時使用0.667 m2的樣方框，每個小區(qū)4個重復(fù)，記錄框內(nèi)的病穗數(shù)和病級。病級記載標(biāo)準(zhǔn)為：0級，無發(fā)病小穗；1級，零星小穗發(fā)病，發(fā)病小穗數(shù)占總小穗數(shù)的25.0%以下；2級，發(fā)病小穗占總小穗數(shù)的25.0%～50.0%；3級，發(fā)病小穗占總小穗數(shù)的50.1%～75.0%； 4級，發(fā)病小穗占總小穗數(shù)的75.0%以上。病穗率、病情指數(shù)和防治效果計算方法如下：

病穗率=病穗數(shù)總穗數(shù)×100%；

病情指數(shù)=∑（各病級穗數(shù)×病級數(shù)）總穗數(shù)×4×100；

防治效果=清水對照參數(shù)-藥劑處理參數(shù)清水對照參數(shù)×100%。

參數(shù)=病穗率、病情指數(shù)和DON含量。

小麥成熟后，所有處理的每個小區(qū)取3個樣方（0.667 m2），使用脫粒機(jī)脫粒，脫粒晾干后分別裝在網(wǎng)袋中并稱量；每袋中取兩個500粒麥粒分別記錄其中的病粒數(shù)。將各處理的籽粒樣本用德國萊馳粉碎儀（ZM200， 1.5 mm 不銹鋼環(huán)篩）進(jìn)行粉碎，過20目篩，稱取粉碎后的樣本5 g裝入50 mL離心管放入4℃冰箱中備用。每個樣品粉碎后，嚴(yán)格清理以避免相互污染。

將裝有5 g樣品粉末的50 mL離心管中加入25 mL蒸餾水，用力振蕩3 min，并使用Whatman No.1濾紙過濾，收集濾液，然后稀釋10、100、1 000和10 000倍備用。使用RIDASCREENDON酶聯(lián)免疫法嘔吐毒素定量檢測試劑盒（R5906）檢測樣品中DON毒素，操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度為0、3.7、11.1、33.3、100 μg/L。在酶標(biāo)儀上同時測定標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品450 nm處的吸光度，每個樣品重復(fù)測定3次。當(dāng)濾液中DON毒素濃度過高或者過低而超出檢測范圍時，使用其不同倍數(shù)的稀釋液進(jìn)行測定。使用RBiopharm的應(yīng)用軟件RIDASOFT Win（Z9999）進(jìn)行結(jié)果評估。并按照單次檢測的Logit/log曲線進(jìn)行分析，然后計算3次檢測結(jié)果的平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 先噴藥后接菌條件下供試殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果

田間試驗調(diào)查結(jié)果表明，清水對照的病穗率達(dá)22.4%，病情指數(shù)達(dá)15.58（表2）；先噴藥后接菌條件下，25%氰烯菌酯SC、25%戊唑醇WP、30%多·酮SC、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理在病穗率和病情指數(shù)上都有較好的防治效果，病穗率防效為50.4%～83.5%，病情指數(shù)防效為55.4%～88.2%。其中25%氰烯菌酯SC處理的病穗率和病情指數(shù)防效最高，分別為83.5%和88.2%，病穗率和病情指數(shù)分別為3.7%和1.83（表2）。25%戊唑醇WP、30%多·酮SC、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理的病情指數(shù)分別為4.75、6.78、6.96和5.33，與25%氰烯菌酯SC處理沒有顯著差異（P>0.05）；其中25%戊唑醇WP、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理的病穗率分別為8.7%、9.2%和7.4%，與25%氰烯菌酯SC處理沒有顯著差異（P>0.05）。30%己唑醇SC、25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理的病穗率和病情指數(shù)與清水對照沒有顯著性差異（P>0.05）。其中12.5%烯唑醇WP處理的病穗率和病情指數(shù)防效較低，分別為16.1%和29.1%；30%己唑醇SC和25%嘧菌酯SC沒有防治效果（表2）。

試驗取樣室內(nèi)檢測結(jié)果表明，清水對照的病粒率達(dá)12.20%，籽粒中DON毒素積累達(dá)21.42 mg/kg （表2）。25%氰烯菌酯SC、30%多·酮SC、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理對病粒率和籽粒中DON積累都有較好的防治效果，病粒率防效在55.2%～69.4%，籽粒中DON毒素積累防效在69.8%～77.2%。它們的病粒率之間和籽粒中DON毒素積累水平之間沒有顯著差異，且顯著低于清水對照（P<0.05）。30%己唑醇SC、25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理的病粒率和籽粒中DON毒素積累水平與清水對照處理沒有顯著差異（P>0.05）。其中30%己唑醇SC和12.5%烯唑醇WP處理的病粒率防效較低，分別為13.1%和6.8%；25%嘧菌酯SC沒有防治效果；30%己唑醇SC處理的籽粒中DON毒素防效較低，為7.0%；25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理在籽粒中DON毒素上沒有防治效果（表2）。

各處理測產(chǎn)結(jié)果表明，25%氰烯菌酯SC處理的產(chǎn)量最高，為9 762.90 kg/hm2，與25%戊唑醇WP處理沒有顯著性差異，顯著高于其他藥劑處理（P<0.05）；30%己唑醇SC和25%嘧菌酯SC處理的產(chǎn)量與清水對照處理沒有顯著差異（P>0.05）（表2）。

2.2 先接菌后噴藥條件下供試殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果

先接菌，1 d后噴藥處理，25%氰烯菌酯SC、25%戊唑醇WP、30%多·酮SC、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理在病穗率和病情指數(shù)上都有較好的防治效果，病穗率防效在42.4%～63.4%，病情指數(shù)防效在44.9%～68.7%。其中25%氰烯菌酯SC處理的病穗率和病情指數(shù)防效最高，分別為63.4%和68.7%，病穗率和病情指數(shù)分別為8.2%和4.88（表3）。25%戊唑醇WP和70%甲基硫菌靈WP處理的病穗率分別為11.2%和10.5%，與25%氰烯菌酯SC處理的病穗率沒有顯著差異（P>0.05），顯著低于30%多·酮SC和50%多菌靈WP處理的病穗率（P<0.05）。25%戊唑醇WP、30%多·酮SC和70%甲基硫菌靈WP處理的病情指數(shù)分別為6.94、7.63和6.70，與25%氰烯菌酯SC處理的病穗率沒有顯著差異（P>0.05），顯著低于50%多菌靈WP處理的病穗率（P<0.05）。30%己唑醇SC、25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理的病穗率和病情指數(shù)與清水對照沒有顯著差異（P>0.05）。其中25%嘧菌酯SC處理的病穗率防效較低，為1.3%，而30%己唑醇SC和12.5%烯唑醇WP處理在病穗率上沒有防治效果；30%己唑醇懸浮劑、25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理的病情指數(shù)防效低，分別為5.6%，7.3%和8.4%（表3）。

試驗取樣測定分析結(jié)果表明，25%氰烯菌酯SC、25%戊唑醇WP、30%多·酮SC、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理在病粒率和籽粒中DON積累都有一定的防治效果，病粒率防效在19.1%～62.9%之間，籽粒中DON毒素防效在5.0%～86.9%。25%氰烯菌酯SC和70%甲基硫菌靈WP處理的病粒率為4.53%和6.90%，顯著低于清水對照處理；而25%戊唑醇WP、30%多·酮SC和50%多菌靈WP處理的病粒率與清水對照沒有顯著差異。25%氰烯菌酯SC、25%戊唑醇WP、50%多菌靈WP和70%甲基硫菌靈WP處理籽粒中DON毒素含量分別為2.80、6.83、11.14和4.63 mg/kg，顯著低于清水對照處理（P<0.05）；30%多·酮SC處理的籽粒中DON毒素水平與清水對照處理沒有顯著差異（P>0.05）。30%己唑醇SC、25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理的病粒率和籽粒中DON毒素積累水平與清水對照處理沒有顯著差異（P>0.05）。其中30%己唑醇SC、25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理在病粒率上沒有防治效果；30%己唑醇SC處理的籽粒中DON毒素防效較低，為6.3%，25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP處理在籽粒中DON毒素上沒有防治效果（表3）。

各處理測產(chǎn)結(jié)果表明，25%氰烯菌酯SC處理的產(chǎn)量最高，為9922.80 kg/hm2，與50%多菌靈WP處理沒有顯著性差異，但顯著高于其他藥劑處理（P<0.05）；30%己唑醇SC處理的產(chǎn)量與清水對照處理沒有顯著差異（P>0.05）（表3）。

3 結(jié)論與討論

隨著小麥赤霉病在黃淮麥區(qū)發(fā)生和危害加重，以及DON毒素對食品安全的威脅越來越嚴(yán)重，急需選擇既能控制小麥赤霉病發(fā)生又能控制小麥籽粒中的DON積累的化學(xué)藥劑。本試驗結(jié)果表明，25%氰烯菌酯SC對赤霉病的防效最好，其次為25%戊唑醇WP和70%甲基硫菌靈WP，再次為50%多菌靈WP和30%多·酮SC，而30%己唑醇SC，25%嘧菌酯SC和12.5%烯唑醇WP沒有顯著的防治效果。這個結(jié)果中25%氰烯菌酯SC處理防效顯著高于50%多菌靈WP和30%多·酮SC（P<0.05），與王恒亮等[10]，丁治軍等[11]，江濤等[12]，孫光忠等[13]、刁亞梅等[15]、李恒奎等[16]和陸道訓(xùn)等[17]的報道一致。本結(jié)果中25%戊唑醇WP處理防治效果比50%多菌靈WP處理高，但兩者沒有顯著差異（P>0.05），而孔祥英等[18]和紀(jì)莉景等[19]認(rèn)為25%戊唑醇WP處理的防治效果顯著高于50%多菌靈WP（P<0.05）。此外，范東晟等[20]和 Zhang等[21]報道30%己唑醇SC處理和25%嘧菌酯SC處理有顯著的防治效果，但本結(jié)果中這兩種藥劑都沒有顯著的防治效果。

對于病粒率和籽粒中DON積累，本研究中25%氰烯菌酯SC處理的防治效果在兩種處理方式下均為最高或者接近最高，分別達(dá)62.9%～68.6%和74.7%～86.9%。其次為25%戊唑醇WP、70%甲基硫菌靈WP、50%多菌靈WP和30%多·酮SC，這幾種藥劑，除噴藥后接菌條件下的25%戊唑醇WP在病粒率和籽粒中DON積累上沒有顯著防治效果；接菌后1 d噴藥條件下的50%多菌靈WP和25%戊唑醇WP在病粒率上沒有顯著防治效果；30%多·酮SC處理在病粒率和籽粒中DON積累上沒有顯著防治效果外均能在一定程度上降低小麥籽粒中DON含量，此結(jié)果與Zhang等[21] 報道的25%氰烯菌酯SC處理和25%戊唑醇WP能夠顯著降低籽粒中DON積累的結(jié)果一致；但本研究中50%多菌靈WP在兩種條件下都能顯著地降低籽粒中DON的含量，與Zhang等[21]的結(jié)果不一致；而25%嘧菌酯SC處理后籽粒中DON毒素含量高于清水對照處理的結(jié)果與Zhang等[21]的結(jié)果一致。

試驗結(jié)果還可以看出同一種殺菌劑在先噴藥后接菌和先接菌1 d后噴藥試驗條件下，對赤霉病的防治效果有所不同。25%氰烯菌酯SC在先噴藥后接菌條件下對病穗率和病情指數(shù)的防效分別為83.5%和88.2%，明顯優(yōu)于先接菌后噴藥63.4%和68.5%的防效。25%戊唑醇WP、70%甲基硫菌靈WP、50%多菌靈WP和30%多·酮SC等殺菌劑也有同樣的趨勢。表明在病原菌侵染之前噴藥的保護(hù)作用更能充分發(fā)揮殺菌劑的防治效果。

綜上所述，25%氰烯菌酯SC不僅防治赤霉病效果最好，在病粒率和籽粒中DON毒素含量上控制效果較好，而且增產(chǎn)效果最明顯，是推薦防治小麥赤霉病的首選藥劑。在單一防治小麥赤霉病時可以使用25%氰烯菌酯SC，綜合防治其他葉部病害時，可以考慮使用48%氰烯菌酯·戊唑醇SC[22]。25%戊唑醇WP、70%甲基硫菌靈WP、50%多菌靈WP和30%多·酮SC防治小麥赤霉病效果和增產(chǎn)顯著，且對減低籽粒中的DON毒素含量也有一定的效果，也是用于防治小麥赤霉病的可選藥劑，但在禾谷鐮刀菌產(chǎn)生多菌靈抗性的地區(qū)，宜用25%氰烯菌酯SC和25%戊唑醇WP作為防治小麥赤霉病藥劑。

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（責(zé)任編輯：楊明麗）