陸學(xué)云

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40%葉菌唑·戊唑醇水乳劑的高效液相色譜分析方法研究

陸學(xué)云

(江蘇糧滿倉農(nóng)化有限公司，江蘇揚州 225247)

采用高效液相色譜法測定40%葉菌唑·戊唑醇水乳劑，使用C18色譜柱，以V(甲醇)︰V(水)=65︰35為流動相，在柱溫25 ℃、波長222 nm、流量1.0 mL/min的色譜條件下進行分析。葉菌唑和戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.086和0.062，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.56%和0.25%，線性相關(guān)系數(shù)分別為0.999 9和0.999 8，平均回收率分別為99.6%和99.2%，方法達到了分析的要求。

葉菌唑；戊唑醇；高效液相色譜；分析

葉菌唑(metconazole)化學(xué)名稱為：5-(4-氯苯基)-2,2-二甲基-1-(1-1,2,4-三唑-1-基甲基)環(huán)戊醇，是麥角甾醇生物合成中C-14脫甲基化酶抑制劑。葉菌唑是一種廣譜內(nèi)吸性殺菌劑，主要用于防治小麥殼針孢、穗鐮刀菌、葉銹病、黃銹病、白粉病、穎枯??；大麥矮形銹病、白粉病、喙孢屬；黑麥的喙孢屬、葉銹?。谎帑湽阡P??；小黑麥(小麥與黑麥雜交)葉銹病、殼針孢。該劑對殼針孢屬和銹病活性優(yōu)異，兼具優(yōu)良的保護及治療作用，既可莖葉處理又可作種子處理[1]。戊唑醇(tebuconazole)化學(xué)名稱為：()-1-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-3-(1-1,2,4三唑-1-基甲基)戊-3-醇，屬于三唑類殺菌劑，為麥角甾醇生物合成抑制劑。該劑可用于禾谷類作物防治白粉病菌、柄銹菌屬、喙孢屬、核腔菌屬和殼針孢屬菌引起的病害[2]。

葉菌唑與戊唑醇復(fù)配對小麥條銹病、赤霉病有很好的防治效果。目前關(guān)于葉菌唑[3]和戊唑醇[4]原藥及單劑的氣相和液相色譜分析已見報道，而二者復(fù)配產(chǎn)品的分析方法尚未見公開報道。本文建立了在同一色譜條件下同柱分離定量測定葉菌唑與戊唑醇的方法。該方法操作簡單、快速、準(zhǔn)確，可為企業(yè)生產(chǎn)過程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機構(gòu)質(zhì)量檢測提供參考。

1 試驗部分

1.1 試劑和溶液

甲醇：色譜純；水：二次蒸餾水；葉菌唑標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%；戊唑醇標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：島津LC-20AT，具可變波長紫外檢測器；色譜工作站；色譜柱：150 mm×3.9 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Inertsil ODS-3、5 μm填充物；微量進樣器：50 μL；過濾器：濾膜孔徑約0.45m；超聲波清洗器。

1.3 液相色譜操作條件

流動相：甲醇︰水= 65︰35 (體積比)；流量：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測波長：222 nm；進樣體積：25 μL；保留時間：葉菌唑約11 min；戊唑醇約8.8 min。

上述色譜操作條件系典型操作參數(shù)。實際操作時，可根據(jù)不同儀器的特點，對給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的高效液相色譜圖見圖1。

圖1 葉菌唑·戊唑醇標(biāo)樣(左圖)和試樣(右圖)高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標(biāo)樣溶液的配制

分別稱取葉菌唑標(biāo)樣0.03 g和戊唑醇標(biāo)樣0.05 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入約30 mL甲醇，在超聲波水浴中振蕩5 min，取出后降溫至室溫。用甲醇定容，用移液管準(zhǔn)確移取5 mL該溶液于50 mL容量瓶中，用甲醇稀釋并定容，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取葉菌唑·戊唑醇試樣0.2 g (準(zhǔn)確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入約30 mL甲醇，在超聲波水浴中振蕩5 min，取出后降溫至室溫。用甲醇定容，用移液管準(zhǔn)確移取5 mL該溶液于50 mL容量瓶中，用甲醇定容，過濾后備用。

1.4.3 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液峰面積相對變化小于1.0%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進行測定。

1.4.4 計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中葉菌唑(戊唑醇)的峰面積分別進行平均。試樣中葉菌唑(戊唑醇)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)1(%)按式(1)計算。

式中：1為試樣葉菌唑(戊唑醇)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，數(shù)值以%表示；2為試樣溶液中，葉菌唑(戊唑醇)峰面積的平均值；1為葉菌唑(戊唑醇)標(biāo)樣的質(zhì)量，單位為克，g；為標(biāo)樣中的葉菌唑(戊唑醇)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，數(shù)值以%表示；1為標(biāo)樣溶液中，葉菌唑(戊唑醇)峰面積的平均值；2為試樣的質(zhì)量，單位為克，g。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 流動相的選擇

通過對不同流動相的試驗結(jié)果比較得出采用甲醇+水為流動相(65+35)，流量為1.0 mL/min的條件下，有效成分與雜質(zhì)能獲得較好的分離，峰形對稱，保留時間適當(dāng)。

2.1.2 波長的選擇

在222 nm波長條件下，葉菌唑·戊唑醇有效成分有較好的吸收，而且試樣雜質(zhì)及試劑幾乎沒有響應(yīng)，因此選擇222 nm為檢測波長。

2.1.3 色譜柱的選擇

通過試驗比較，選用色譜柱：150 mm×3.9 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Inertsil ODS-3、5 μm填充物。使用該柱子檢測，峰形對稱，出峰時間適中，可以滿足快速分析的需要。

2.2 分析方法的線性相關(guān)性測定

分別稱取葉菌唑標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g和戊唑醇標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g (精確至0.000 2 g)置于25 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分搖勻。用移液管取1.0 mL上述溶液，置于另一個10 mL容量瓶中，用甲醇定容。再用移液管準(zhǔn)確移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL，于5個10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，充分搖勻。分別根據(jù)1.2液相色譜條件進行測定。以葉菌唑(戊唑醇)質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，測試方法的線性相關(guān)性，求得葉菌唑的線性方程式為=43 282+294.1，相關(guān)系數(shù)為0.999 9。求得戊唑醇的線性方程式為=38 884+53.4，相關(guān)系數(shù)為0.999 8。

2.3 分析方法的精密度測定

稱取葉菌唑·戊唑醇40%水乳劑樣品，進行5次平行測定。其結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計分析，該分析方法測定葉菌唑的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.086，變異系數(shù)為0.56%，戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.062，變異系數(shù)為0.25%(表1)。

表1 精密度試驗測定數(shù)據(jù)

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度測定

采用標(biāo)樣添加法，在已知含量的試樣中分別添加一定量的標(biāo)樣，在上述色譜條件下進行測定，測得葉菌唑的平均回收率為99.6%，戊唑醇的平均回收率為99.2%(表2)。

表2 樣品回收率測定數(shù)據(jù)

圖2 葉菌唑線性關(guān)系曲線圖

圖3 戊唑醇線性關(guān)系曲線圖

3 結(jié) 論

綜合上述測定結(jié)果可知，用本方法同時測定40%葉菌唑·戊唑醇水乳劑中葉菌唑、戊唑醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)，其精密度和準(zhǔn)確度較高，線性關(guān)系良好，具有簡便、快速、準(zhǔn)確及分離效果好，是一種可行的分析方法，可滿足產(chǎn)品檢驗的要求。

[1] 劉長令. 國外農(nóng)藥品種手冊(增補本)[M]. 沈陽: 全國農(nóng)藥工業(yè)信息站, 2000: 164－165.

[2] 朱良天. 精細化工產(chǎn)品手冊(農(nóng)藥)[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2004: 280－281.

[3] 陳根良, 夏俊, 劉春杰, 等. 葉菌唑原藥高效液相色譜分析方法研究[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2014, 35(9): 43－45.

[4] 薛維家, 戴永軍, 孔斌. 戊唑醇的液相色譜分析方法[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2000(4): 11－11.

Analytical Method of Metconazole·Tebuconazole 40% EW by HPLC

LU Xueyun

(Jiangsu Liangmancang Agrochemical Co., Ltd., Yangzhou 225247, Jiangsu, China)

An analysis method of metconazol·tebuconazole 40% EW was developed by HPLC with C18column at 25 ℃ and UV detector at 222 nm. The mobile phase was methanol+water (volume ratio of 65︰35), and the flow rate was 1.0 mL/min.The results showed that the standard deviations of metconazole and tebuconazole were 0.086 and 0.062, the relative standard deviations were 0.56% and 0.25%, the linear correlation coefficients were 0.999 9 and 0.999 8, the average recoveries were 99.6% and 99.2%, respectively. The method met the requirements of analysis.

metconazole; tebuconazole; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2018.02.12

TQ450.7

A

1009-6485(2018)02-0054-03

陸學(xué)云，男，江蘇人，工程師。Tel: 0514-86645309，E-mail：xueyun1596@163.com。

2017-12-02。