胡園，李敏，方軍，鄭伊諾，曾國權(quán)，陸榮茂，柯愛英，朱潔

（浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所，浙江省近岸水域生物資源開發(fā)與保護重點實驗室，浙江溫州 325005）

縊蟶(Sinonovacula constricta Lamarck)，俗稱蟶子、青子，隸屬于軟體動物門(Mollusca)，瓣鰓綱(Lamellibranchia)，異齒亞綱(Heterodonta)，簾蛤目(Veneroida)，竹蟶科(Solenidae)、縊蟶屬(Sinonovaculla)，具有適應(yīng)性強、生長快、養(yǎng)殖周期短、產(chǎn)量高、肉質(zhì)鮮美和營養(yǎng)價值高等特點，是我國四大傳統(tǒng)養(yǎng)殖貝類之一。因在采捕后，處于自然環(huán)境下極易腐敗變質(zhì)、口感迅速下降，失去食用價值，從而限制了縊蟶的鮮活銷售。另一方面，隨著人們對貝類食用的安全性和品質(zhì)要求的不斷提高，其新鮮度成為決定其價格的主要因素。新鮮度評價主要有感官評價、物理指標、化學指標和微生物檢測等方面[1,2]。活體保藏和運輸已經(jīng)成為了貝類質(zhì)量和高值化研究的熱點。

國內(nèi)外已報道不同?；詈捅ｕr方式（冰溫保活、低溫保鮮、氣調(diào)保鮮、臭氧殺菌和生物保鮮涂覆劑等）下泥蚶Tegillarcula granosa[3]、文蛤Meretrix meretrix Linnaeus、波紋巴非蛤 Paphia undulata、近江牡蠣Crassostrea rivularis[4]和扇貝Nodipecten subnodosus[5]等貝類的理化指標變化情況。但是，有關(guān)縊蟶的品質(zhì)研究起步較晚，對縊蟶在不同保鮮方式下理化指標的研究也不全面。楊文鴿等[6]研究了縊蟶冰藏期間存活率及其呈味物質(zhì)（糖原、甜菜堿、游離氨基酸和AMP）的變化趨勢。高捷等[7,8]研究比較不同貯藏條件下的縊蟶糖原和乳酸變化。應(yīng)用Illumina Miseq高通量測序技術(shù)研究了縊蟶冰溫保活過程中微生物多樣性變化[9]。因此，通過研究貯藏方式和重要脅迫因素對縊蟶生化代謝規(guī)律的影響，并從機理上闡述其腐敗、變質(zhì)、存活和品質(zhì)下降等原因，以及建立不同指標的相關(guān)性，對進一步優(yōu)化?；畋ｕr技術(shù)有著至關(guān)重要意義。本文研究了不同貯藏溫度（-4±1 ℃、0±1 ℃、5±1 ℃、10±1 ℃、25±1 ℃）下縊蟶存活率、基本營養(yǎng)成分（水分、糖原、粗脂肪、粗蛋白和灰分）、生化特性（TVB-N、pH、肌原纖維蛋白巰基含量及Ca2+-ATPase酶活）和菌落總數(shù)指標的變化規(guī)律，從而建立較為全面的貝類品質(zhì)評價體系（存活率、營養(yǎng)代謝和生化指標等），并在最優(yōu)貯藏溫度條件下延長縊蟶的品質(zhì)和保證食用安全。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

試驗儀器主要有電子天平CPA225D，賽多利斯科學儀器；冷藏冰柜SC-201F，江蘇白雪電器；馬弗爐EL-104，武漢元素科技發(fā)展；臺式PH計、高速離心機5810i，德國 Eppendorf；游標卡尺111N-101GA，廣陸數(shù)字測控股份有限公司；可見分光光度計 722，上海欣茂儀器。

1.2 實驗材料與樣品采集

縊蟶于2016年3月采自浙江省寧?？h長街養(yǎng)殖灘涂，活體帶回實驗室，濕重9.30±1.44 g，殼長62.1±3.4 mm。取大小相近、活力相當?shù)目O蟶，根據(jù)溫度不同分為五組，分別為 25±1 ℃、10±1 ℃、5±1 ℃、0±1 ℃、-4±1 ℃，每組300個縊蟶用塑料框盛裝，每個溫度組3個平行，將浸泡過海水的雙層紗布蓋在縊蟶表面，并隔天噴海水以保持 100%濕度環(huán)境。定期核查記錄不同溫度條件貯藏的實際溫度。定期取樣測定不同溫度條件貯藏縊蟶的微生物和理化指標。

1.3 檢活方法

每天隨機取不同溫度條件貯藏 30只大小相近的縊蟶置于常溫海水靜置1 h后，采用目測法檢活，即刺激貝體或其入水管、出水管，貝殼能自由閉合或水管自由伸縮者為活體，否則為死貝。

成活率=活蟶子個數(shù)/(活蟶子個數(shù)+死蟶子個數(shù))×100%

1.4 基本營養(yǎng)成分測定

隨機取約30個活縊蟶，去殼取肉，用中性濾紙吸干表面水分，用高速組織搗碎機將肉搗碎后，于-20 ℃保存，用于縊蟶營養(yǎng)成分分析。

水分測定采用恒溫常壓干燥法《GB 5009.3-2010食品安全國家標準 食品中水分的測定》；粗蛋白測定采用微量凱氏定氮法（《GB 5009.5-2010食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》）；粗脂肪測定采用索氏抽提法（《GB/T 14772-2008食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》）；灰分測定采用馬弗爐灼燒法《GB 5009.4-2010食品安全國家標準食品中灰分的測定》；糖原測定按照南京建成生物工程研究所糖原測定試劑盒的操作說明測定糖原的含量。

1.5 pH測定

縊蟶去殼取肉，稱取10.0 g，加入100 mL無氨蒸餾水，置于恒溫搖瓶柜中不時搖勻，靜置30 min后低溫離心。取上清液50 mL，按酸度計法操作，用精密pH計測定。

1.6 揮發(fā)性鹽基氮（TVB-N）

揮發(fā)性鹽基氮測定根據(jù)《GB 5009.228-2016食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》方法進行測定。

1.7 菌落總數(shù)

菌落總數(shù)根據(jù)《GB 4789.2-2016食品衛(wèi)生微生物學檢驗菌落總數(shù)》進行測定。取10個縊蟶去殼取肉，稱取5.0 g，用滅菌剪刀剪碎放于50 mL滅菌生理鹽水中，勻質(zhì)，制作成1：10的均勻稀釋液。然后選擇合適的三個稀釋度，每個稀釋度做二個平行樣，用營養(yǎng)瓊脂倒平板的方法來測定菌落總數(shù)。在36±1 ℃培養(yǎng)48 h±2 h，平板計數(shù)以每克樣品的菌落總數(shù)（Log CFU/g）表示。

1.8 肌原纖維蛋白巰基蛋白含量和Ca2+-ATPase酶活力

縊蟶去殼取肉，剪碎后稱取1 g，加入15 mL預冷的0.60 M KCl-磷酸緩沖溶液勻漿，冷凍離心9500 r/min，30 min，取上清液，加入3倍預冷的雙蒸水，搖勻，冷凍離心9500 r/min，30 min，棄上清液，沉淀用預冷的0.60 M KCl-Tris緩沖溶液溶解，用力搖勻，冷凍離心9500 r/min，30 min，取上清液，即為肌原纖維蛋白液[10]。

1.8.1 肌原纖維蛋白巰基蛋白含量

按照南京建成生物工程研究所巰基蛋白含量測定試劑盒的操作說明測定巰基蛋白的含量（μmol/g）。

1.8.2 肌原纖維蛋白Ca2+-ATPase酶活力

按照南京建成生物工程研究所測定 Ca2+-ATPase酶活力試劑盒的操作說明測定 Ca2+-ATPase活力（U/mg）。

1.9 統(tǒng)計分析

每個實驗做3個平行，取其平均值，實驗數(shù)據(jù)以“平均值±標準差(mean±S)”表示，采用Origin 8.0軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同貯藏溫度對縊蟶存活率的影響

不同溫度條件下貯藏縊蟶的存活率見圖 1。結(jié)果表明，貯藏在25±1 ℃（常溫）條件下，縊蟶在第3 d后全部死亡，貯藏在（-4±1）℃條件下，縊蟶在第1 d后存活率急劇下降到50%，說明環(huán)境溫度對離水貝類的存活影響較大，溫度越高，貝體內(nèi)耗能隨著增大，促使代謝消耗，存活率也會降低；而過低的溫度會造成貝體出現(xiàn)微凍結(jié)甚至完全凍結(jié)，加快貝類死亡，都達不到?；畹淖饔谩?/p>

Youko[11]為了延長貝類存活時間，通過將貝類的溫度控制在特定的冰溫帶范圍，使貝類進入休眠狀態(tài)以維持其組織細胞活性。縊蟶的生態(tài)冰溫區(qū)大致為-1.3 ℃至 2.8 ℃[12]，本研究中，貯藏在（0±1）℃、（5±1）℃和（10±1）℃條件下，縊蟶分別在11 d、7 d、5 d存活率達到95%以上，其中，（0±1）℃貯藏的縊蟶處于生態(tài)冰溫帶范圍，具有最高的成活率。

2.2 不同貯藏溫度對縊蟶肌肉基本營養(yǎng)組分含量的影響

不同貯藏溫度下，縊蟶的水分、粗蛋白、粗脂肪、糖原和灰分等基本營養(yǎng)成分含量的變化如圖 2。結(jié)果表明，隨著保活時間的延長，縊蟶水分含量變化不顯著，不同溫度貯藏組的縊蟶水分含量變化相差不大。

圖2 不同溫度條件下貯藏縊蟶基本營養(yǎng)含量的變化Fig.2 The changes of basic nutritional composition of Sinonovacula constricta under different storage temperatures

(-4±1) ℃、(0±1) ℃、(5±1) ℃、(10±1) ℃貯藏 11 d后水分含量下降了約6.02%～8.49%；而(25±1) ℃?；? d后水分含量從 80.08%下降到 76.60%，下降了約4.35%?？O蟶體內(nèi)水分的含量和分布及存在形式對其質(zhì)地、風味和貯藏性能等方面都存在影響?？紤]到縊蟶在完全干露條件下，容易出現(xiàn)體表及外露水管、斧足干燥，本研究采用雙層紗布對縊蟶進行保濕處理，不同溫度條件貯藏縊蟶體內(nèi)水分含量下降趨勢差異較少，故水分蒸發(fā)和流失的現(xiàn)象不嚴重。雙層紗布?；罘坡少e蛤仔的方式能夠保持其濕潤度，延長?；顣r間和提高存活率[13]。海泥裹覆、羧甲基纖維素鈉（CMC）和褐藻酸鈉等方式能使縊蟶表面保持濕度和透氧作用[14]。

貝類保活過程中主要營養(yǎng)成分能否很好地保持是衡量?；钚Ч闹匾笜酥籟15]。不同溫度條件下貯藏縊蟶的粗蛋白含量基本保持穩(wěn)定，粗脂肪、糖原和灰分呈下降趨勢。不同溫度貯藏11 d后糖原下降幅度約為54.86%～69.45%，貯藏溫度越低縊蟶體內(nèi)糖原下降幅度越小。不同溫度貯藏11 d后脂肪下降幅度約為21.69%～28.92%，其中（0±1）℃貯藏條件下的縊蟶脂肪含量下降幅度較其它?；罱M較平緩。但是不同溫度貯藏11 d后蛋白質(zhì)下降幅度較少約為3.00%～6.77%。說明蛋白質(zhì)充當機體的結(jié)構(gòu)和功能性物質(zhì)，不作為能量儲備物質(zhì)。在22 ℃和27 ℃條件下，經(jīng)過15周的饑餓應(yīng)激后蛤蜊Mesodemsma mervenaria蛋白質(zhì)含量減少，而牡蠣Crassostrea virginica蛋白質(zhì)水平?jīng)]有受到影響[16]。綜上所述，不同溫度條件貯藏縊蟶的基本營養(yǎng)成分含量減少量高低依次均為糖原、粗脂肪、粗蛋白，在不能攝食時，不斷消耗能量物質(zhì)以糖原為主粗脂肪為輔。隨著貯藏時間的延長，縊蟶體內(nèi)脂肪的分解代謝加強并且作為加強糖原異生途徑的原料[17]。申淑琦等[18]采用充氧保濕處理4 ℃無水?；钸^程中，海灣扇貝Argopecten irradians消耗能量物質(zhì)的基本營養(yǎng)成分先后順序一致。

（0±1）℃，（5±1）℃和（10±1）℃貯藏11 d 后灰分下降幅度約為 20.53%～24.71%，其中（-4±1）℃貯藏的縊蟶處于微凍環(huán)境下，灰分含量從1.54%下降到1.53%，下降幅度約為0.65%。其中，（-4±1）℃貯藏過程中的縊蟶因低溫造成了貝體微凍而死亡，其體內(nèi)的灰分含量變化不大，而其它不同保活溫度組的縊蟶肌肉灰分含量下降了18.10%～24.70%。這可能是因為縊蟶在?；钸^程中，機體排泄或體液的流失，使機體礦物質(zhì)流失。

隨著不同溫度條件貯藏時間的延長，縊蟶的水分和粗蛋白含量基本保持穩(wěn)定，其機體的能量消耗以糖原為主脂肪為輔，除（-4±1）℃貯藏的縊蟶處于微凍環(huán)境下，灰分下降幅度較小，其它貯藏溫度條件下的縊蟶有一定的礦物質(zhì)流失。

2.3 不同貯藏溫度對縊蟶生理生化指標影響

2.3.1 pH

貝類pH值的變化是受不同代謝產(chǎn)物共同影響的結(jié)果，其值反映貯藏過程中貝類新鮮度的趨勢?；钇坟愵惖膒H一般處于6.3～7.5之間，捕后立即測定pH一般為 7.0～7.3[19]。不同溫度條件下貯藏過程中縊蟶pH值的變化如圖3所示。結(jié)果表明，不同溫度貯藏的縊蟶肌肉pH初始值為7.0，之后逐漸下降，至第3 d為最低，而后又開始上升。最終，（-4±1）℃和（25±1）℃組的縊蟶 pH 值低于 7.0，而無水?；罱M（0±1 ℃、5±1 ℃、10±1 ℃）的縊蟶pH值高于7.0。其中，（0±1）℃、（5±1）℃和（10±1）℃?；畹暮? d，pH值變化相對比較緩慢。

圖3 不同溫度條件下貯藏過程中縊蟶pH的變化Fig.3 The changes of pH value of Sinonovacula constricta under different storage temperatures

2.3.2 揮發(fā)性鹽基氮含量

圖4 不同溫度條件下貯藏縊蟶TVBN的變化Fig.4 The changes of TVB-N value of Sinonovacula constricta under different storage temperatures

揮發(fā)性鹽基氮（Total volatile basic nitrogen，TVB-N）廣泛作為判斷水產(chǎn)品新鮮度，并且針對蛋白含量較高的貝類其靈敏度較高，TVB-N含量越低，產(chǎn)品新鮮度越高[20]。我國對海產(chǎn)貝類的TVB-N含量可接受限為≤15 mg/100 g[21]。不同溫度條件下貯藏縊蟶TVB-N值變化的影響如圖4所示。結(jié)果表明，隨著貯藏時間的延長，不同溫度組的縊蟶TVB-N值均逐漸增大。貯藏溫度越高，縊蟶TVB-N值增加的趨勢越明顯。不同溫度(-4±1 ℃、0±1 ℃、5±1 ℃、10±1 ℃、25±1 ℃)貯藏期間，分別在 11 d、9 d、7 d、5 d 和 2 d縊蟶TVBN值接近海水貝類最大可接受限值。

2.3.3 肌原纖維蛋白巰基含量和 Ca2+-ATPase酶活力

肌原纖維蛋白是肌肉蛋白的主要成分，不僅對蛋白質(zhì)的功能特性起著決定性作用并直接影響其品質(zhì)，并且以肌球蛋白和肌動蛋白為主的肌原纖維蛋白參與生理代謝，同時肌動球蛋白的 ATPase活性變化和肌原纖維蛋白在內(nèi)源或外源性酶的作用下水解[22]等。不同溫度條件下貯藏過程中縊蟶肌原纖維蛋白巰基含量和Ca2+-ATPase活性的變化如圖5和圖6所示。

圖5 不同溫度條件下貯藏縊蟶肌原纖維蛋白巰基含量的變化Fig.5 The changes of SH content of myofibrillar protein of Sinonovacula constricta under different storage temperatures

圖6 不同溫度條件下貯藏縊蟶肌原纖維蛋白Ca2+-ATPase酶活性的變化Fig.6 The changes of Ca2+-ATPase activity of myofibrillar protein of Sinonovacula constricta under different storage temperatures

縊蟶肌原纖維巰基蛋白含量初始值 246.40 μmol/g～308.35 μmol/g，肌原纖維 Ca2+-ATPase 酶活1.141 U/mg～2.111 U/mg。在(-4±1) ℃、(0±1) ℃、(5±1) ℃、(10±1) ℃貯藏組的前5 d縊蟶Ca2+-ATPase酶活出現(xiàn)較大幅度降低，其下降幅度為34.90%～50.00%；而后5 d平緩得下降，其下降幅度為2.30%～35.60%。同樣，不同溫度條件下貯藏縊蟶肌肉的肌原纖維蛋白巰基含量具有相同的趨勢。隨著貯藏時間的延長，不同溫度條件貯藏縊蟶肌肉的肌原纖維蛋白巰基含量和Ca2+-ATPase活性均有下降趨勢，但不同溫度組差異不顯著（p＞0.05）。巰基是魚肉蛋白中最有反應(yīng)活性的功能性基團，肌球蛋白分子中含有活性巰基SH1和SH2與肌球蛋白的Ca2+-ATPase活性密切相關(guān)[10]。Koichi Kuwahara等人研究發(fā)現(xiàn)較低濃度的檸檬酸鈉能抑制鯉魚肌原纖維蛋白變性、抑制肌原纖維蛋白Ca2+-ATPase活性的下降，保護肌動蛋白和肌球蛋白，提高鯉魚的保水性[23]。吳忠等[24]研究表明活品蝦夷扇貝閉殼肌和外套膜肌原纖維蛋白的 ATPase活性（Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase）與肌原纖維蛋白的穩(wěn)定性具有相關(guān)性，在酸性條件下對肌肉蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的破壞更明顯。

2.4 菌落總數(shù)

圖7 不同溫度條件下貯藏縊蟶菌落總數(shù)的變化Fig.7 The changes of total bacterial count of Sinonovacula constricta under different storage temperatures

為獲得鮮活縊蟶的衛(wèi)生狀況和食用安全性，菌落總數(shù)高低不僅能反映新鮮程度，而作為食品被微生物污染程度指標。根據(jù)我國貝類投放市場微生物衛(wèi)生標準的要求，菌落總數(shù)不得高于5×104CFU/g[25]。不同溫度條件貯藏過程中縊蟶菌落總數(shù)變化如圖7所示。

研究表明，在(0±1) ℃、(4±1) ℃、(10±1) ℃、(25±1) ℃溫度條件下，當分別達到7 d、5 d、3 d、2 d時，縊蟶的菌落總數(shù)接近4.7 log(CFU/g)。隨著?；顣r間延長和溫度升高的雙重作用，菌落總數(shù)呈增長趨勢。而(-4±1) ℃貯藏期間，縊蟶菌落總數(shù)始終低于 4.7 log(CFU/g)，其主要原因隨著低溫微凍貯藏過程中大部分細菌很快死亡。本研究發(fā)現(xiàn)(-4±1) ℃和(0±1) ℃組的縊蟶 TVB-N值增加的幅度不大，由于溫度低，微生物的增殖受到一定的抑制，減緩蛋白質(zhì)的分解和氨及胺類堿性含氮物質(zhì)的產(chǎn)生，從而達到減緩縊蟶鮮度下降的趨勢。菲律賓蛤仔 TVB-N的變化與低溫保藏過程中微生物的增長狀況存在一定的相關(guān)性[26]。楊華等[27]研究以殼聚糖作為保鮮劑在冰藏條件下能夠很好地抑制縊蟶機體TVB-N、pH和菌落總數(shù)等生化指標的變化。

3 結(jié)論

在一定濕度的條件下合理降低貯藏溫度能夠延長縊蟶的存活率，(0±1) ℃貯藏的縊蟶具有較高的成活率，在11 d存活率達到95%以上。通過不同貯藏溫度對縊蟶機體基本營養(yǎng)組成含量高低比較，縊蟶能量消耗以糖原為主粗脂肪為輔。并且(0±1) ℃貯藏條件下的縊蟶脂肪含量下降幅度較其它?；罱M較平緩。?；顣r間延長和溫度升高的雙重作用，縊蟶菌落總數(shù)呈增長趨勢，在第7 d接近4.7 log(CFU/g)。而縊蟶肌肉肌原纖維蛋白巰基含量和Ca2+-ATPase活性均有下降趨勢。

[1]Saraa G, Romano C, Widdows J, et al. Effect of salinity and temperature on feeding physiology and scope for growth of an invasive species (Brachidontes pharaonis-Mollusca;Bivalvia) within the Mediterranea sea [J]. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 2008, 363(1/2)：130-136

[2]申淑琦,萬玉美,王小瑞,等.海灣扇貝低溫無水?；钸^程中營養(yǎng)成分和生化特性的變化[J].大連海洋大學學報,2014,29(6)：633-637 SHEN Shu-qi, WAN Yu-mei, WANG Xiao-rui, et al.Changes in nutrient compositions and biochemical characteristics of bay scallop Argopecten irradians during keep-alive under free water at low temperature [J]. Journal of Dalian Ocean University, 2014, 29(6)：633-637

[3]王興強,馬牲,曹梅,等.不同鹽度波動幅度對縊蟶生長和生化組成的影響[J].海洋通報,2010,29(5)：567-571 WANG Xing-qiang, MA Sheng, CAO Mei, et al. Effect of salinity fluctuation on the growth and biochemical composition of Sinvnovacula constricta [J]. Marine Science Bulletin, 2010, 29(5)：567-571

[4]姜志勇.我國東部沿海縊蟶群體的形態(tài)、生長與分子遺傳學比較研究[M].上海：上海海洋大學,2008 JIANG Zhi-yong. Comparative study on morphology, growth and molecular genetics of Sinonovacula constricta populations in the coast of eastern china [M]. Shanghai：Shanghai Ocean University, 2008

[5]牛東紅,劉達博,陳慧,等.縊蟶種群遺傳多樣性的周年變異分析[J].生物技術(shù)通報,2012,1：168-171 NIU Dong-hong, LIU Da-bo, CHEN Hui, et al. Genetic diversity of Sinonovacula constricta populations in one year[J]. Biotechnology Bulletin, 2012, 1：168-171

[6]楊文鴿,徐大倫,孫翠玲,等.縊蟶冰藏?；钇陂g呈味物質(zhì)的變化[J].中國食品學報,2009,9(3)：181-186 YANG Wen-ge, XU Da-lun, SUN Cui-ling, et al. Changes of taste components in Sinonovacula constricta during iced storage-keeping alive [J]. Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2009, 9(3)：181-186

[7]高捷,劉紅英,齊鳳生,等.縊蟶保活過程中乳酸變化的研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學,2011,39(2)：406-407 GAO Jie, LIU Hong-ying, QI Feng-sheng, et al. Research on changes of lactic acid of Sinonovacula constricta during its life-keeping process [J]. Acta Agriculturae Jiangsuensis, 2011,39(2)：406-407

[8]高捷,劉紅英,齊鳳生,等.縊蟶?；钸^程中糖原變化的研究[J].食品工業(yè)科技,2011,32(5)：361-363 GAO Jie, LIU Hong-ying, QI Feng-sheng, et al. Research on changes of glycogen of Sinonovacula constricta during its life-keeping process [J]. Science and Technology of Food Industry, 2011, 32(5)：361-363

[9]傅玉穎,李學鵬,勵建榮,等.泥蚶氣調(diào)保鮮過程中品質(zhì)變化的動力學模型研究[J].中國食品學報,2009,9(2)：47-52 FU Yu-ying, LI Xue-peng, LI Jian-rong, et al. Study on the Kinetic model of quality change in Tegillarcula granosa during MAP storage [J]. Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2009, 9(2)：47-52

[10]楊文鴿.幾種海水養(yǎng)殖魚貝類低溫貯藏生化特性的變化及其鮮度評價[D].青島：中國海洋大學,2007 YANG Wen-ge. Changes of biochemical properties and freshness evaluation in some maricultured fish-shellfishes stored at low temperature [D]. Qingdao：China Ocean University, 2007

[11]Youko S, Kikue K, Akio K. Influence of free sugars by glycolysis on the formation of the characteristic flavor in the brew of cooked clam [J]. Journal of Agriculture Food Chemistry, 1997, 45：2195-2198

[12]李含.縊蟶綜合?；罴夹g(shù)研究[M].福州：福建農(nóng)林大學,2014 LI Han. The research of comprehensive keep-alive technology to Sinonovacula Constricta [M]. Fuzhou：Fujian Agriculture and Forestry University, 2014

[13]王霞.菲律賓蛤仔離水后的存活期及存活期內(nèi)的微生物和理化指標變化[D].湛江：廣東海洋大學,2010 WANG Xia. Survival time and the changing rule of microorganisms and physicochemical indexes Ruditapes Philippinarums during keeping alive period [D]. Zhanjiang：Guangdong Ocean University, 2010

[14]吳云輝,林莉芳,邱澄宇.幾種縊蟶保鮮被覆劑理化性質(zhì)的比較研究[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學刊,2010,10：33-36 WU Yun-hui, LIN Li-fang, QIU Cheng-yu. Comparison on properties of the several kinds of preservation coating on razor clam [J]. Academic Periodical of Farm Products Processing, 2010, 10：33-36

[15]蘇鍵.廣西北部灣主要貝類食用品質(zhì)及其凍藏變化的研究[D].南寧：廣西大學碩士研究生學位論文,2011 SU Jian. Study on the edible quality and changes during frozen storage of the important bivalve mollusks from beibu gulf in Guangxi [D]. Nanning：Guangxi University, 2011

[16]Ivanina A V, Dickinson G Hickinson G H, Matoo O B, et al.Interactive effects of elevated temperature and CO2levels on energy metabolism and biomineralization of marine bivalves Crassostrea virginica and Mercenaria mercenaria [J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A, 2013,166(1)：101-111

[17]陳山喬.基于代謝組學的水產(chǎn)品物流相關(guān)技術(shù)研究[D].上海：上海海洋大學, 2016 CHEN Shan-qiao. Aquatic products preservation and transportation investigation based on metabolomics [D].Shanghai：Shanghai Ocean University, 2016

[18]申淑琦,萬玉美,王小瑞,等.海灣扇貝低溫無水保活過程中營養(yǎng)成分和生化特性的變化[J].大連海洋大學學報,2014,29(6)：633-637 SHEN Shu-qi, WAN Yu-mei, WANG Xiao-rui, et al.Changes in nutrient compositions and biochemical characteristics of bay scallop Argopecten irradians during keep-alive under free water at low temperature [J]. Journal of Dalian Ocean University, 2014, 29(6)：633-637

[19]劉金洋.蝦夷扇貝在活品流通過程中的代謝變化[D].大連：大連海洋大學,2016 LIU Jin-yang. Post-harvest metabolism changes in live scallop Patinopecten yessonensis [D]. Dalian：Dalian Ocean University, 2016

[20]FAN W J, SUN J X, CHEN Y H, et al. Effects of chitosan coating on quality and shelf life of silver carp during frozen storage [J]. Food Chemistry, 2009, 115(1)：66-70

[21]GB 2733-2005,鮮、凍動物性水產(chǎn)品衛(wèi)生標準[S]GB 2733-2005, Hygienic standard for fresh and frozen marine products of animal origin [S]

[22]Hultaman L, Rustad T. Iced storage of Atlantic salmon(Salmo salar)-effects on endogenous enzymes and their impact on muscle proteins and texture [J]. Food Chemistry,2004, 87：31-41

[23]Koichi K, Kunihiko K. Suppression of thermal denaturation of myosin and salt-induced denaturation of actin by sodium citrate in carp (Cyprius carpio)[J]. Food Chemistry, 2010,122(4)：997-1002

[24]吳忠,劉俊榮,田元勇.蝦夷扇貝閉殼肌和外套膜肌原纖維蛋白的特性分析[J].水產(chǎn)學報,2015,39(11)：1640-1649 WU Zhong, LIU Jun-rong, TIAN Yuan-rong. Characteristics of the adductor and mantle myofibrils from Patinopecten yessoensis [J]. Journal of Fisheries of China, 2015, 39(11)：1640-1649

[25]莊榮玉,黃曉春,薛長湖,等.鮮活縊蟶肉質(zhì)細菌菌群組成分析[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2007,33(1):43-44 ZHUANG Rong-yu, HUANG Xiao-chun, XUE Chang-hu, et al. Identification of microflora of live Sinonovacula constricta [J]. Food and Fermentation Industries, 2007, 33(1):43-44

[26]王霞.菲律賓蛤仔離水后的存活期及存活期內(nèi)的微生物和理化指標變化[D].湛江:廣東海洋大學,2010 WANG Xia. Effects of different frozen storage processing methods for Sinonovacula constricta (Lamarck) qualities [D].Zhanjiang: Guangdong Ocean University, 2010

[27]楊華,張慧恩.生物保鮮在不同條件下對縊蟶保鮮效果的影響[J].食品研究與開發(fā),2014,35(21):126-131 YANG Hua, ZHANG Hui-en. Study on the biological preservatives fresh-keeping effect on razor clams under different conditions [J]. Food Research and Development,2014, 35(21): 126-131