邵穎，陳安徽，陳尚龍，巫永華，趙文靜，賀程，黃勃，夏振榮，王西樸

（1.徐州工程學(xué)院食品（生物）工程學(xué)院，江蘇徐州 221111）（2.江蘇省食品資源開(kāi)發(fā)與質(zhì)量安全重點(diǎn)建設(shè)實(shí)驗(yàn)室，徐州工程學(xué)院，江蘇徐州 221111）（3.江蘇康能生物工程股份有限公司，江蘇儀征 221100）（4.江蘇君樂(lè)寶乳業(yè)有限公司，江蘇徐州 221700）

植物酵素又稱酶、植物發(fā)酵液，是新鮮蔬菜、水果、食用菌和藥食同源植物等原料在益生菌的作用下發(fā)酵產(chǎn)生的一類天然的具有營(yíng)養(yǎng)保健功效的發(fā)酵制品[1,2]。作為生物體產(chǎn)生的具有催化作用的生物大分子，酵素參與人體各種代謝過(guò)程[3,4]。研究表明，酵素中含有豐富的維生素、氨基酸、酚類、黃酮、礦物質(zhì)、功能性低聚糖和功效酶等多種功能成分[5～7]，部分研究報(bào)道也提示了酵素在消炎、抗衰、抑菌、優(yōu)化體內(nèi)環(huán)境、抗癌、提高機(jī)體免疫、修復(fù)機(jī)體損傷等方面的生物活性[8～12]。

酵素及酵素食品長(zhǎng)期以來(lái)風(fēng)靡于日韓、臺(tái)灣及歐美發(fā)達(dá)國(guó)家，我國(guó)的酵素及其制品的生產(chǎn)尚處于初期發(fā)展階段，存在著產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等制約其規(guī)?；l(fā)展的問(wèn)題[13,14]。目前，針對(duì)酵素的研究亦引起了較為普遍的關(guān)注，在酵素的發(fā)酵生產(chǎn)、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)及酵素和酵素制品的營(yíng)養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域的研究均有相關(guān)報(bào)道。酵素發(fā)酵原料在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)發(fā)生特定的生物化學(xué)反應(yīng)，使酵素不同發(fā)酵階段的理化指標(biāo)發(fā)生變化。為了全面探討酵素的發(fā)酵過(guò)程，本實(shí)驗(yàn)研究了酵素發(fā)酵過(guò)程中pH值、還原糖、總多酚、總酸及體外抗氧化活性的動(dòng)態(tài)變化，并且為了驗(yàn)證酵素的抗氧化活性及抗衰延壽功能，實(shí)驗(yàn)還以黑腹果蠅為實(shí)驗(yàn)對(duì)象按照不同劑量將植物酵素添加到果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以僅以基礎(chǔ)培養(yǎng)基飼喂的果蠅為對(duì)照，通過(guò)測(cè)定果蠅壽命及其體內(nèi) SOD酶活力和MDA含量評(píng)價(jià)植物酵素的延壽抗衰效果。研究的進(jìn)行可以為植物酵素人工發(fā)酵工藝的優(yōu)化及酵素在抗氧化、延壽方面保健功效的確定提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)，同時(shí)為酵素在保健品、保健食品和化妝品等領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料與試劑

植物酵素：由徐州工程學(xué)院發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)室自行發(fā)酵。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：果蠅(Drosophila melanogaster)，野生型，由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院提供。

化學(xué)試劑：95%乙醇，宜興市第二化學(xué)試劑廠；考馬斯亮藍(lán)、冰乙酸，天津市福晨化學(xué)試劑廠；苯甲酸，天津市基準(zhǔn)化學(xué)試劑廠；SOD試劑盒、MDA試劑盒，南京建成生物工程公司。

果蠅基礎(chǔ)飼料：玉米粉10%，紅糖5%，酵母粉2%，瓊脂1.5%，苯甲酸0.15～0.4%。

1.1.2 儀器與設(shè)備

真空冷凍干燥機(jī) LGJ-10，上海比朗儀器有限公司；手提式壓力蒸汽滅菌器YXQ.SG4.280，上海華線醫(yī)用核子儀器有限公司；電熱鼓風(fēng)干燥箱DHG-9053A，上海益恒實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；恒溫水浴鍋，國(guó)華電器有限公司；梅特勒電子天平AE200型，上海分析儀器廠；KQ3200E超聲波清洗器，昆山超聲儀器有限公司；TGL-16G臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；UV2802PC紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)，上海精密儀器儀表有限公司。

1.2 方法

1.2.1 植物酵素的發(fā)酵

將48種新鮮蔬菜、水果、菇類等洗凈切碎后榨汁，去除濾渣后按照與濾液質(zhì)量比 1：1的比例加入白砂糖，向?yàn)V汁中按照5%的比例接入酵母菌并于25 ℃條件下靜置發(fā)酵5 d，然后接入10%醋酸菌于28 ℃條件下發(fā)酵7 d，最后接入5%乳酸菌于37 ℃條件下發(fā)酵5 d，之后轉(zhuǎn)入25 ℃條件后熟存放至第70 d后常溫保存。發(fā)酵液經(jīng)膜過(guò)濾、脫醇及巴氏殺菌處理后即得植物酵素。另外，自果蔬發(fā)酵之日開(kāi)始每7 d測(cè)定一次發(fā)酵液的pH值、還原糖、總酚、黃酮、總酸的含量及DPPH自由基清除活性和還原力。

1.2.2 pH測(cè)定

使用pH計(jì)直接測(cè)定。

1.2.3 植物酵素理化指標(biāo)的測(cè)定

1.2.3.1 還原糖含量的測(cè)定

采用3,5-二硝基水楊酸法[15]。

1.2.3.2 總酸含量測(cè)定

采用酸堿滴定法測(cè)定[16]。

1.2.3.3 總酚含量測(cè)定

采用Folin-Ciocalteu比色法(FC法)，以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定總酚含量[17]。實(shí)驗(yàn)中繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=14.654x+0.0254，R2=0.9953，線性關(guān)系良好。樣品中總酚含量以毫升樣品的沒(méi)食子酸當(dāng)量(mg)表示。

1.2.4 植物酵素體外抗氧化活性測(cè)定

1.2.4.1 DPPH自由基清除能力

參照邵穎等[18]的方法進(jìn)行。

1.2.4.2 還原力的測(cè)定

參照邵穎等[19]的方法進(jìn)行。

1.2.5 植物酵素對(duì)果蠅壽命的影響[20]

將植物酵素分別按照 0.5%、1%、2%（V/V）的比例添加到果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并將在此種培養(yǎng)基中飼喂的果蠅設(shè)置為實(shí)驗(yàn)組，以基礎(chǔ)培養(yǎng)基飼喂的果蠅為對(duì)照組（CK）。選取8 h內(nèi)孵化的果蠅，乙醚麻醉并鑒定性別后選取大小均一的個(gè)體于斜面試管中進(jìn)行飼喂，每只試管放10只果蠅，每個(gè)樣品雌、雄果蠅各設(shè)置3個(gè)重復(fù)。將各組果蠅置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日觀察并記錄果蠅的存活情況，統(tǒng)計(jì)果蠅半數(shù)死亡時(shí)間、最高壽命和平均壽命。

1.2.6 植物酵素對(duì)果蠅體內(nèi)SOD活性和MDA含量的影響

1.2.6.1 果蠅組織勻漿的制備

將植物酵素分別按照 0.5%、1%、2%（V/V）的比例添加到果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，將在此培養(yǎng)基中飼喂的果蠅設(shè)置為實(shí)驗(yàn)組，以不添加酵素僅以基礎(chǔ)培養(yǎng)基飼喂的果蠅為對(duì)照組（CK）。選取8 h內(nèi)孵化的果蠅，乙醚麻醉并鑒定性別后選取大小均一的個(gè)體于斜面試管中飼喂，每只試管放10只果蠅，每個(gè)樣品雌、雄果蠅各設(shè)置3個(gè)重復(fù)。將各組果蠅置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 20 d后準(zhǔn)確稱量每只試管中果蠅的重量，用0.15 mol/L的生理鹽水充分研磨后配制成1%（m/V）的組織勻漿并于6000 r/min離心10 min取上清液備用。

1.2.6.2 果蠅組織中可溶性蛋白含量的測(cè)定

采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。取 1%果蠅組織勻漿液經(jīng)適當(dāng)稀釋后于595 nm測(cè)定吸光值，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)蛋白回歸方程計(jì)算蛋白質(zhì)含量。

標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.0005x+0.0252，R2=0.9907。

1.2.6.3 果蠅體內(nèi)SOD活力的測(cè)定

按照試劑盒使用說(shuō)明操作。取50 μL果蠅組織勻漿測(cè)定SOD活力，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。按照下列公式（1）計(jì)算SOD活力。

1.2.6.4 果蠅體內(nèi)MDA含量的測(cè)定

按照試劑盒使用說(shuō)明操作。取100 μL果蠅組織勻漿測(cè)定MDA含量，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。按照下列公式（2）計(jì)算MDA含量。

1.2.7 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS7.05處理軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)每組平行3次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中pH的變化

圖1 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中pH值的變化Fig.1 Changes in pH value during fermentation of plant ferment

酵素發(fā)酵過(guò)程中pH值的動(dòng)態(tài)變化如圖1所示。由圖1可知，復(fù)合果蔬在發(fā)酵第7 d時(shí)發(fā)酵液的pH值為4.12，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，pH值呈下降趨勢(shì)，在發(fā)酵至14 d時(shí)降低到3.78，在第49 d時(shí)降低到3.53，隨后雖有小幅度的增加，但始終保持在3.56左右，最后在第70 d時(shí)降低到3.50。發(fā)酵過(guò)程中pH值能在較短時(shí)間內(nèi)降低到4以下，可以控制大多數(shù)有害微生物特別是霉菌的生長(zhǎng)，保障了發(fā)酵過(guò)程的產(chǎn)品安全。

2.2 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中理化指標(biāo)的變化

2.2.1 酵素發(fā)酵過(guò)程中還原糖含量的變化

還原糖含量在酵素發(fā)酵過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化如圖 2所示。酵素的生產(chǎn)原料是富含果糖的水果和蔬菜，所以在發(fā)酵初期因?yàn)樯a(chǎn)原料中果糖的存在使得還原糖的含量較高，但隨著發(fā)酵的進(jìn)行，接入的酵母菌首先利用單糖使得還原糖含量逐漸降低。但在發(fā)酵的第14～21 d又出現(xiàn)了還原糖含量激增的現(xiàn)象，考慮可能是在酵素生產(chǎn)中白砂糖按照與果蔬同等的比例添加，同時(shí)果蔬中的可溶性纖維被微生物生長(zhǎng)代謝過(guò)程中分泌的一些胞外酶水解而轉(zhuǎn)化為葡萄糖、果糖等還原糖。

隨后在第21 d之后還原糖被微生物吸收利用，含量呈現(xiàn)連續(xù)的下降趨勢(shì)，在發(fā)酵終點(diǎn)降低到78.78±3.24 mg/mL。

圖2 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中還原糖含量的變化Fig.2 Changes of the reducing sugar content during fermentation of plant ferment

2.2.2 酵素發(fā)酵過(guò)程中總酸含量的變化

圖3 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中總酸含量的變化Fig.3 Changes of total acid content during fermentation of plant ferment

酵素發(fā)酵原料水果及蔬菜自身含有大量的有機(jī)酸，發(fā)酵過(guò)程中酵母菌、乳酸菌等的代謝又會(huì)產(chǎn)生有機(jī)酸類的代謝產(chǎn)物，所以在酵素中含有種類多樣、含量豐富的有機(jī)酸。實(shí)驗(yàn)中測(cè)定了發(fā)酵液中總酸含量在發(fā)酵過(guò)程的變化。結(jié)果如圖3所示。

由圖3可知，發(fā)酵液中總酸含量在發(fā)酵過(guò)程中逐漸增加，在發(fā)酵的第7至第14 d的時(shí)間內(nèi)總酸含量增加幅度較后期大，總酸含量的增加會(huì)使發(fā)酵液的 pH值降低，所以發(fā)酵過(guò)程中pH值不斷下降，與pH值在發(fā)酵過(guò)程中的變化相對(duì)應(yīng)。

2.2.3 酵素發(fā)酵過(guò)程中總多酚含量的變化

多酚類化合物因?yàn)榇嬖谟谥参锝M織中，且具有抗菌、消炎和抗氧化等生理功能，所以在以植物為原料的酵素的發(fā)酵過(guò)程中測(cè)定了發(fā)酵液中多酚的動(dòng)態(tài)變化。由圖4可知，多酚的含量隨著發(fā)酵的進(jìn)行而增加，在發(fā)酵終點(diǎn)達(dá)到55.04±1.36 μg/mL。酵素發(fā)酵過(guò)程中總多酚含量增加應(yīng)該是微生物代謝作用于植物細(xì)胞，細(xì)胞破壁后胞內(nèi)多酚釋放入發(fā)酵液所致。

圖4 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中總多酚含量的變化Fig.4 Changes of the total polyphenol content during fermentation of plant ferment

2.3 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中體外抗氧化能力的變化

2.3.1 酵素發(fā)酵過(guò)程中DPPH自由基清除能力的變化

圖5 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中DPPH自由基清除能力的變化Fig.5 Changes of DPPH free radicals scavenging ability of plant fermentduring fermentation

酵素發(fā)酵過(guò)程中測(cè)定了酵素的DPPH自由基清除能力，實(shí)驗(yàn)中酵素原液被稀釋20倍后測(cè)定了酵素稀釋液的自由基清除能力，具體的DPPH自由基清除能力的動(dòng)態(tài)變化結(jié)果如圖5所示。

由圖5可知，酵素的DPPH自由基清除能力隨著發(fā)酵的進(jìn)行而不斷增加，在發(fā)酵至第21 d時(shí)清除率已超過(guò)90%，在第42 d時(shí)達(dá)到96.5±0.58%，隨后緩慢增長(zhǎng)至發(fā)酵終點(diǎn)的 97.71±1.44%，比發(fā)酵初期的77.64±0.66%高出 25.85%，說(shuō)明微生物的發(fā)酵作用可提高果蔬汁的DPPH自由基清除能力，酵素具有一定的抗氧化功效。

2.3.2 酵素發(fā)酵過(guò)程中還原力的變化

還原力是檢測(cè)物質(zhì)體外抗氧化活性的一個(gè)重要指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中同樣將酵素原液稀釋20倍，通過(guò)測(cè)定酵素稀釋液的還原能力反映酵素的抗氧化活性。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖6所示。

圖6 植物酵素發(fā)酵過(guò)程中還原力的變化Fig.6 Changes of reducing power during fermentation of plant ferment

由圖6可以看出，隨著發(fā)酵的進(jìn)行酵素的還原能力亦不斷增加，在發(fā)酵至第35 d時(shí)酵素20倍稀釋液的吸光值即達(dá)到了1.13，隨后基本趨于平穩(wěn)。酵素發(fā)酵過(guò)程中還原力的變化趨勢(shì)與其DPPH自由基清除能力的變化趨勢(shì)相似。說(shuō)明發(fā)酵過(guò)程同樣有效提高了酵素的還原能力。

2.4 植物酵素對(duì)果蠅壽命的影響

以在果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基中按照0.5%、1%和2%的比例添加植物酵素飼喂的果蠅作為實(shí)驗(yàn)組，以基礎(chǔ)培養(yǎng)基飼喂的果蠅為對(duì)照組，按照1.2.2的方法評(píng)價(jià)了植物酵素對(duì)果蠅壽命的影響。具體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。由表1的結(jié)果可知，與對(duì)照組比較，在果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加 2%劑量的植物酵素可以顯著提高雄果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命和最高平均壽命（p＜0.05），分別比對(duì)照組提高了22.06%、15.44%和14.99%；

對(duì)于雌性果蠅而言，基礎(chǔ)飼料中添加 2%的酵素同樣顯著提高了半數(shù)死亡時(shí)間和平均最高壽命（p＜0.05），分別比對(duì)照組提高了16.84%和21.19%，2%劑量酵素的添加雖然也提高了雌果蠅的平均壽命，但并未達(dá)到顯著水平。另外，1%劑量組雌果蠅的平均最高壽命也顯著高于對(duì)照組和0.5%劑量組。說(shuō)明在果蠅培養(yǎng)基中添加 2%劑量的植物酵素對(duì)于延長(zhǎng)果蠅壽命具有顯著效果。

表1 植物酵素對(duì)果蠅壽命的影響Table 1 Effects of plant ferment on the lifespan of Drosophila Melanogaster

表2 植物酵素對(duì)果蠅SOD活力和MDA含量的影響Table 2 Effects of plant ferment on SOD activity and MDA content of Drosophila Melanogaster

2.5 植物酵素對(duì)果蠅體內(nèi) SOD活力和 MDA含量的影響

以果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基飼喂的果蠅為對(duì)照，將在分別添加了0.5%、1%和2%植物酵素的培養(yǎng)基中飼喂20 d的果蠅制成1%組織勻漿液，按照1.2.3.3的方法測(cè)定SOD活力，按照1.2.3.4的方法測(cè)定MDA含量。測(cè)定結(jié)果如表2所示。由表2可知，植物酵素在果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的添加均提高了雌、雄果蠅的 SOD活力，與對(duì)照組相比，2%添加劑量的提高效果達(dá)到顯著水平（p＜0.05），分別提高了5.98%和7.50%；植物酵素在果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的添加同樣降低了果蠅體內(nèi) MDA的含量，對(duì)于雌果蠅來(lái)說(shuō)，1%和2%劑量組分別比對(duì)照組顯著降低了23.13%和32.09%（p＜0.05），而各劑量組雄果蠅體內(nèi) MDA的含量均顯著低于對(duì)照組（p＜0.05）。說(shuō)明植物酵素具有顯著的體內(nèi)抗氧化活性，抗衰效果明顯。

3 結(jié)論與討論

3.1 植物酵素作為一種功能性微生物發(fā)酵制品因其顯著的功效多年來(lái)盛行于歐美、東南亞、日本以及臺(tái)灣地區(qū)，酵素的安全性及保健功能使其具有廣闊的應(yīng)用價(jià)值，且其在運(yùn)動(dòng)食品、保健食品和化妝品等領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)也越來(lái)越得到廣泛的重視[21]。酵素的發(fā)酵過(guò)程是一個(gè)復(fù)雜的混菌發(fā)酵過(guò)程，微生物特別是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌通過(guò)自身的代謝使發(fā)酵原料發(fā)生復(fù)雜的生化反應(yīng)，在進(jìn)行發(fā)酵原料中糖、脂、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化的同時(shí)還可以為新型生理物質(zhì)甚至功能性成分提供前體物質(zhì)，不僅如此發(fā)酵過(guò)程還可以有效改善原料中的不良風(fēng)味。因此，植物酵素是具有多種營(yíng)養(yǎng)成分和特定保健功能的發(fā)酵制品[22]。傳統(tǒng)的酵素生產(chǎn)是自然發(fā)酵，但周期長(zhǎng)且易受發(fā)酵環(huán)境的影響從而難以保障產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。本研究采用人工發(fā)酵方式生產(chǎn)果蔬酵素，并系統(tǒng)探討了果蔬酵素發(fā)酵過(guò)程中理化指標(biāo)及體外抗氧化活性的動(dòng)態(tài)變化；果蠅是被用來(lái)研究動(dòng)物抗衰老活性及機(jī)理的常用動(dòng)物模型[23]，為進(jìn)一步證明酵素的抗氧化功能，本研究又以果蠅為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，研究了植物酵素對(duì)果蠅壽命的影響，并以抗氧化酶活性(SOD)和丙二醛(MDA)含量為指標(biāo)評(píng)價(jià)了酵素的體內(nèi)抗氧化活性。

3.2 在本實(shí)驗(yàn)條件下，酵素發(fā)酵過(guò)程中pH值不斷下降最終降低到3.50，還原糖含量則呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢(shì)，最終降低到78.78±3.24 mg/mL，總酸和總多酚的含量總體保持上升趨勢(shì)，在發(fā)酵終點(diǎn)分別達(dá)到9.80±1.06 mg/mL和55.04±1.36 μg/mL。韋仕靜[14]等測(cè)定了西蘭花酵素發(fā)酵過(guò)程中總酚的動(dòng)態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)其含量呈現(xiàn)先上升后降低的趨勢(shì)，且最終達(dá)到66.31±0.64 μg/mL，含量變化與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果有差異，考慮是否是果蔬中原有多酚含量差異的影響。酵素的DPPH自由基清除能力和還原力均隨發(fā)酵的進(jìn)行而增強(qiáng)，與韋仕靜、管章瑞等的研究結(jié)果相似[13,14]，說(shuō)明植物酵素具有體外抗氧化活性。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，酵素在后熟階段總酸、總多酚含量仍在持續(xù)增加而體外抗氧化活性也在不斷升高，所以筆者認(rèn)為后熟過(guò)程對(duì)酵素中化學(xué)成分的累積具有重要作用。在果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基中按照 2%比例添加植物酵素飼喂果蠅會(huì)顯著提高雄性果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命、最高平均壽命及雌性果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間和最高平均壽命（p＜0.05）。根據(jù)《中國(guó)保健食品的進(jìn)展》中延緩衰老功能的檢測(cè)方法的規(guī)定，如果任一劑量組(或二組、三組)的任一性別(或兩性)的最高壽命和(或)平均壽命顯著長(zhǎng)于對(duì)照組，即可判定試驗(yàn)樣品對(duì)果蠅有延緩衰老的功能[24]。因此，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷植物酵素對(duì)果蠅具有顯著的延長(zhǎng)壽命、延緩衰老的作用。本實(shí)驗(yàn)的體內(nèi)抗氧化活性顯示，2%添加劑量組雌、雄果蠅體內(nèi)的SOD活力均顯著高于對(duì)照組（p＜0.05），分別比對(duì)照組提高了5.98%和 7.50%；飼喂植物酵素同樣降低了果蠅體內(nèi)MDA的含量，培養(yǎng)基中添加1%和2%的酵素可顯著降低雌果蠅體內(nèi)的MDA含量，而在雄性果蠅培養(yǎng)基中僅添加0.5%的酵素也可顯著降低其體內(nèi)MDA含量（p＜0.05），說(shuō)明酵素具有較好的機(jī)體抗氧化活性。許多研究提示了抗衰老與抗氧化間的直接關(guān)系，而酵素的延壽抗衰功效應(yīng)該是以其中的抗氧化活性成分為物質(zhì)基礎(chǔ)。

3.3 本研究通過(guò)植物酵素發(fā)酵過(guò)程中理化指標(biāo)、體外抗氧化活性動(dòng)態(tài)變化的監(jiān)測(cè)可以有效指導(dǎo)植物酵素的人工發(fā)酵過(guò)程并穩(wěn)定產(chǎn)品質(zhì)量；以果蠅為模型的酵素延壽抗衰活性方面的功效驗(yàn)證又為植物酵素以及以植物酵素為原料的保健品、保健食品、功能食品和化妝品等的開(kāi)發(fā)提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù)。作為開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景甚為廣闊的食品及食品原料，酵素的延壽抗衰機(jī)理值得進(jìn)行深入研究。

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