曲　薇， 伍　淼， 王旭東， 張淑梅， 陳秀玲， 王傲雪，2

(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150030； 2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150030)

哈茨木霉(Trichodermaharzianum)屬半知菌亞門絲孢綱叢梗孢目科木霉屬，廣泛分布在自然界中，適應(yīng)性好，防病機(jī)制多樣，對多種病原真菌和細(xì)菌有拮抗作用[1]，對許多植物病害防治效果顯著[2-3]。李敏等研究發(fā)現(xiàn)，多菌靈藥劑和哈茨木霉菌株T-s1對水稻苗期立枯病的防效分別達(dá) 74.84%、64.83%[4]。目前，針對番茄病害的生物防治有較多報道[5-10]。姚彬等探究哈茨木霉菌菌絲、孢子懸浮液、代謝液等對病原菌的抑菌效果時發(fā)現(xiàn)，哈茨木霉對番茄葉霉及灰霉的病原菌均有一定的抑制作用[8]；段麗峰等研究發(fā)現(xiàn)，哈茨木霉用量達(dá)6億～18億孢子/m2(制劑用量2～6 g/m2)時對大田番茄猝倒病和立枯病的防效分別達(dá)75%～85%、75%～86%，且顯著高于化學(xué)藥劑[9]；陳文瑞等用麥麩混合砂子培養(yǎng)哈茨木霉來防治番茄猝倒病，其防治效果優(yōu)于敵克松，與五氯硝基苯效果相當(dāng)[10]。此外，許多學(xué)者在研究木霉時發(fā)現(xiàn)，木霉可以明顯地促進(jìn)植物的生長，對辣椒、豇豆、芹菜、黃瓜、白菜、豌豆、花生、菊花、小麥等多種作物有促生作用[11-13]。焦琮等曾報道康氏木霉不但能有效防治菜豆炭疽病、棉花苗期立枯病，還有促進(jìn)棉花、菜豆生長發(fā)育的作用[14]；王慧中等將哈茨木霉添加到有機(jī)肥中制成生物菌肥，并施用到馬鈴薯、白菜上發(fā)現(xiàn)，與常規(guī)施肥相比，添加哈茨木霉的有機(jī)菌肥增產(chǎn)效果明顯[15]。

本試驗以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院實驗室分離到的哈茨木霉菌株WY-1為研究對象，測定其不同濃度及施用方式對番茄幼苗的促生及常見病害的防控作用，以期為哈茨木霉菌株WY-1的應(yīng)用提供理論指導(dǎo)與技術(shù)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1　試驗材料

哈茨木霉菌菌株WY-1，由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院實驗室提供；東農(nóng)713番茄種子，由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)番茄研究所提供。

1.2　哈茨木霉菌株的發(fā)酵培養(yǎng)

將保存的哈茨木霉菌株活化，PD搖瓶3 d；按7%接種量轉(zhuǎn)接到固體發(fā)酵培養(yǎng)物中，混勻，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)10 d；取出發(fā)酵物，烘箱中40 ℃烘12 h；粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，即得到原菌粉；4 ℃保存。

1.3　哈茨木霉的促生效果

1.3.1浸種將番茄種子置于55 ℃溫水中浸泡30 min；分別置于由哈茨木霉原菌粉稀釋制成的孢子濃度為107、106、105CFU/mL 的溶液中浸泡7 h，以清水(CK)為對照；挑選飽滿一致的種子，播于含滅菌營養(yǎng)土的苗缽中，每缽5～8粒種子，每處理5缽，置于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝試驗站番茄大棚內(nèi)培養(yǎng)2個月，正常田間管理；取苗，測量其株高、根長、莖粗、鮮質(zhì)量，重復(fù)3次。

1.3.2灌根將番茄種子置于55 ℃溫水中浸泡30 min；挑選飽滿一致的種子，播于盛有滅菌營養(yǎng)土的育苗托盤中；待苗長出2張真葉，將苗移至21 cm×21 cm的苗缽內(nèi)，每缽5株苗；培養(yǎng)7 d后，分別采用孢子濃度為107、106、105CFU/mL的哈茨木霉溶液開始灌根，以清水(CK)為對照；每隔10 d灌根1次，連灌3次，每處理5缽；2個月后取苗，測量其株高、根長、莖粗、鮮質(zhì)量，重復(fù)3次。

1.4　哈茨木霉對番茄常見病害的防控效果

1.4.1白粉病以大棚內(nèi)結(jié)果期的番茄植株為試驗對象，分別噴施哈茨木霉孢子濃度為106、105CFU/mL的溶液，以噴施多菌靈可濕性粉劑0.8 mg/mL、美國拜沃生產(chǎn)的木霉可濕性粉劑3.75×105CFU/mL、清水為對照；隨機(jī)選取150 cm×150 cm 的小塊區(qū)域為1個小組，參照劉鳴韜等的分級標(biāo)準(zhǔn)[16]，噴藥前及噴藥后15 d逐天觀察調(diào)查番茄白粉病的發(fā)生情況，計算病情指數(shù)和防治效果。

1.4.2灰霉病、葉霉病以4張真葉期盆栽番茄植株為試驗對象，以噴施哈茨木霉孢子濃度為106、105CFU/mL的溶液為試驗處理，以噴施多菌靈可濕性粉劑0.8 mg/mL、美國拜沃生產(chǎn)的木霉可濕性粉劑3.75×105CFU/mL、清水為試驗對照。試驗設(shè)3個方案：(1)先噴施藥劑，1 d后再接種病原菌；(2)先接種病原菌，1 d后再噴施藥劑；(3)僅接種病原菌噴清水作為對照。將處理好的番茄植株置于20 ℃條件下保濕培養(yǎng)，參照徐升運(yùn)等的分級標(biāo)準(zhǔn)[17]，15 d內(nèi)逐天觀察并記錄番茄灰霉病、葉霉病的發(fā)病情況，計算病情指數(shù)和防治效果。

2　結(jié)果與分析

2.1　哈茨木霉的促生效果

2.1.1浸種的促生效果由圖1、表1可見，與清水處理(對照)相比，哈茨木霉菌劑浸種各處理的番茄株高、根長、莖粗、植株鮮質(zhì)量都有不同程度的增加；哈茨木霉孢子濃度 107CFU/mL 溶液浸種的番茄株高、根長增加幅度相對最大，分別比對照增加10.68%、27.00%，哈茨木霉孢子濃度 106CFU/mL 溶液浸種的番茄莖粗、植株鮮質(zhì)量增幅相對最大，分別比對照增加10.31%、34.26%。

表1　哈茨木霉菌劑不同濃度浸種對番茄植株生長的影響

2.1.2灌根的促生效果由圖2、表2可見，與清水處理(對照)相比，經(jīng)過哈茨木霉菌劑灌根處理的番茄植株，其株高、根長、莖粗、鮮質(zhì)量等均有明顯增加，菌劑灌根對番茄植株有明顯的促生作用；使用哈茨木霉孢子濃度107、106CFU/mL處理對番茄株高、根長、莖粗、鮮質(zhì)量的增加效果相對較好。綜合成本和使用效果，選擇哈茨木霉孢子濃度106CFU/mL為番茄合適的灌根濃度。

2.2　哈茨木霉對番茄常見病害的防控效果

2.2.1番茄白粉病由表3可見，噴藥后15 d，哈茨木霉菌劑對白粉病的防治效果較為明顯，噴施孢子濃度106、105CFU/mL 對白粉病的防治效果分別為82.15%、70.41%，分別是多菌靈可濕性粉劑0.8 mg/mL相對防效的1.33、1.14 倍，分別是拜沃木霉3.75×105CFU/mL相對防效的1.39、1.19倍。

2.2.2番茄灰霉病、葉霉病由表4可見，噴施多菌靈的番茄灰霉病、葉霉病的病情指數(shù)均明顯低于只接種病原菌(對照)的病情指數(shù)；噴施哈茨木霉孢子濃度106CFU/mL對番茄灰霉病、葉霉病的防治效果相對最好， 噴藥后接種、接種后噴藥的相對防效分別為77.98%、56.82%和82.66%、72.37%，分別是拜沃木霉3.75×105CFU/mL相對防效的1.45、1.35倍和1.20、1.30倍，分別是多菌靈可濕性粉劑 0.8 mg/mL相對防效的1.73、13.3倍和1.63、1.66倍；噴藥后接種的相對防效明顯好于接種后噴藥的防治效果，故田間管理時應(yīng)加強(qiáng)對番茄灰霉病、葉霉病的預(yù)防。

表2　哈茨木霉菌劑不同濃度灌根對番茄植株生長的影響

表3　哈茨木霉菌劑對溫室地栽番茄白粉病的防控效果

表4　哈茨木霉菌劑對室內(nèi)盆栽番茄灰霉病、葉霉病的防治效果

3　結(jié)論與討論

哈茨木霉對番茄植株的生長具有良好的促進(jìn)作用，灌根對番茄植株的促生效果明顯優(yōu)于浸種，這可能是由于哈茨木霉灌根可直接作用于幼苗根系而促使根系發(fā)達(dá)，吸收水肥的能力增強(qiáng)，進(jìn)而促進(jìn)幼苗生長，而浸種是通過提高番茄種子發(fā)芽活力來影響幼苗的生長，作用效果相對較弱。另外，木霉在土壤中可降解土壤中的有機(jī)物、溶解可利用礦質(zhì)元素，增加了植物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，而浸種相對于灌根，帶入土壤的木霉菌量少，幫助降解吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力相對較弱，因此促生效果也相對較弱。

哈茨木霉菌株WY-1具有生長速度快、適應(yīng)能力強(qiáng)、防病機(jī)制多等特點(diǎn)，利用哈茨木霉對番茄病害進(jìn)行防治可避免化學(xué)防治對環(huán)境造成的污染[18]。試驗結(jié)果表明，哈茨木霉菌劑對番茄白粉病、灰霉病及葉霉病均有良好的防治效果；先噴施哈茨木霉后接種病原菌比先接種病原菌后噴施哈茨木霉對番茄灰霉病、葉霉病的防控效果相對更好，這可能是因為哈茨木霉生長速度快，先噴施哈茨木霉可以使其迅速占位并大量繁殖，當(dāng)病原菌入侵時可抑制病原菌的生長，具有更加明顯的競爭優(yōu)勢，起到更好的防治效果，而如果先接種病原菌，則會使病原菌大量繁殖，哈茨木霉抵御病原菌的效果會有所減弱。

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