李廣科，李 娟，袁 耀，趙亞偉，王 格

(河南省漯河市中心醫(yī)院/漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科 462000)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是臨床較為典型的一種自身免疫介導(dǎo)彌漫性結(jié)締組織疾病[1]，其臨床發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。有研究表明，SLE的臨床特征主要表現(xiàn)為免疫耐受異常、多個(gè)系統(tǒng)器官受累、出現(xiàn)自身抗體[2]。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)，近年來(lái)SLE的病死率已明顯降低，20年的存活率為60%以上，5年的存活率為90%以上[3]，雖然其存活率有所提高，但是與健康人群相比，病死率也高出3倍[4]。有研究證明，SLE患者，外周血CD4+CD25+T細(xì)胞明顯低于健康人。CD4+CD25+T細(xì)胞的數(shù)量和功能異常，與SLE的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。CD4+CD25+T細(xì)胞常表現(xiàn)出自身免疫是否正常，在正常情況下能保持平衡，維持機(jī)體免疫穩(wěn)定，一旦失衡容易引發(fā)自身免疫疾病發(fā)生[5]。大量臨床研究發(fā)現(xiàn)，感染、腎衰竭是導(dǎo)致SLE患者死亡的主要原因。臨床治療SLE主要使用的藥物有免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素，糖皮質(zhì)激素中的潑尼松較為常用。有研究報(bào)道稱，雷公藤多苷治療狼瘡性腎炎的效果顯著，患者的耐受性較好。本研究主要采用雷公藤多苷聯(lián)合潑尼松和單獨(dú)使用潑尼松治療SLE患者，觀察兩組不同用藥方案治療后患者對(duì)CD4+CD25+T細(xì)胞影響及療效，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年12月至2016年10月本院接診的100例SLE患者進(jìn)行研究，入選的患者采用隨機(jī)數(shù)字表法，均分為兩組，觀察組(50例)和對(duì)照組(50例)。對(duì)照組單獨(dú)使用潑尼松進(jìn)行治療，觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上增加使用雷公藤多苷進(jìn)行治療。觀察組男15例，女35例；年齡22～58歲，平均(34.2±6.8)歲；平均病程(5.8±2.5)年。對(duì)照組男18例，女32例；年齡22～63歲，平均(36.4±6.1)歲；平均病程(5.9±2.3)年。本研究取得本院倫理委員的批準(zhǔn)，所有參與研究的患者均簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合臨床SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)；排除標(biāo)準(zhǔn)：患有嚴(yán)重的心、腎、腦血管系統(tǒng)疾病者；處于哺乳期、妊娠期的女性；并發(fā)嚴(yán)重的感染者；不能接受整個(gè)研究用藥療程者；有相關(guān)藥物過(guò)敏史的患者等。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2儀器與試劑 檢測(cè)使用的試劑：藻紅素標(biāo)記鼠抗人CD4(美國(guó)BD公司)；異硫氰酸熒光素標(biāo)記鼠抗人CD25(美國(guó)BD公司)。檢測(cè)使用的儀器：流式細(xì)胞儀來(lái)自Beckman Coulter公司的Epics XL-MCL型流式細(xì)胞分析儀，操作過(guò)程均嚴(yán)格按說(shuō)明書進(jìn)行，根據(jù)WXPO32軟件分析其檢測(cè)的結(jié)果。

1.3方法 對(duì)照組患者給予潑尼松片(浙江仙琚制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H33021207)進(jìn)行治療，潑尼松的初始劑量為0.5 mg/(kg·d)，在連續(xù)服用1個(gè)月后，逐漸減少藥物的用量，并維持在每天10.0 mg。觀察組患者在對(duì)照組的基礎(chǔ)上，增加使用雷公藤多苷片(遠(yuǎn)大醫(yī)藥黃石飛云制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z42021212)，雷公藤多苷每次20.0 mg，每天3次，采用口服。觀察組潑尼松的用法與用量均與對(duì)照組相同。兩組患者的治療時(shí)間均為6個(gè)月，在治療的過(guò)程中，記錄并觀察患者藥物治療后出現(xiàn)的不良反應(yīng)情況。

CD4+CD25+T細(xì)胞檢測(cè)：兩組患者在治療的前后采集5 mL的靜脈血，采用離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，在血標(biāo)本中分別加入20 μL的藻紅素，標(biāo)記鼠抗人CD4，20 μL異硫氰酸熒光素，標(biāo)記鼠抗人CD25，并且設(shè)立同型管用于對(duì)比。將其混合后在陰涼處放置15 min，加入3 mL的紅細(xì)胞裂解液，在37 ℃的溫室放置15 min，離心棄去上清液，并用磷酸鹽緩沖液洗滌3次，記錄所有患者治療前后的CD4+CD25+T細(xì)胞變化。CD4+CD25+T細(xì)胞均按照百分率表示。

1.4觀察指標(biāo) 兩組患者CD4+CD25+T細(xì)胞治療前后的變化情況比較；兩組患者SLE活動(dòng)指數(shù)(SLE-DAI)評(píng)分的變化情況比較；兩組患者的療效比較；兩組患者治療后的不良反應(yīng)比較。

1.5療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 完全緩解：患者臨床癥狀與體征消失；部分緩解：臨床癥狀與體征減輕；無(wú)效：臨床癥狀與體征無(wú)明顯的好轉(zhuǎn)?？傆行?完全緩解率+部分緩解率。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者CD4+CD25+T細(xì)胞治療前后變化情況比較 治療前兩組患者的CD4+CD25+T細(xì)胞水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后兩組患者CD4+CD25+T細(xì)胞水平顯著上升(P<0.05)，并且觀察組患者的CD4+CD25+T細(xì)胞水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者CD4+CD25+T細(xì)胞治療前后變化情況比較

2.2兩組患者SLE-DAI評(píng)分的變化情況比較 兩組患者治療前的SLE-DAI評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組患者的SLE-DAI評(píng)分明顯降低(P<0.05)，并且觀察組患者的SLE-DAI評(píng)分顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者SLE-DAI評(píng)分的變化情況比較分)

2.3兩組患者的療效比較 觀察組患者治療后的總有效率為92%，對(duì)照組患者治療后的總有效率為74%，觀察組的療效明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患者的療效對(duì)比[n(%)]

2.4兩組患者治療后的藥物不良反應(yīng)比較 兩組患者治療后在肝功能異常、惡心嘔吐、肺炎、上呼吸道感染、白細(xì)胞計(jì)數(shù)下降等方面比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組患者治療后女性出現(xiàn)月經(jīng)紊亂9例，對(duì)照組出現(xiàn)2例，觀察組發(fā)生率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.005 1，P<0.05)。見表4。

表4 兩組患者治療后藥物不良反應(yīng)比較[n(%)]

3 討 論

臨床研究發(fā)現(xiàn)，SLE的發(fā)病機(jī)制復(fù)制，是由多種原因所導(dǎo)致[5]，處于活動(dòng)期的SLE患者，其T細(xì)胞數(shù)量、功能都會(huì)下降。研究認(rèn)為，T細(xì)胞和B細(xì)胞異常活化、CD4+輔助T細(xì)胞異常分泌細(xì)胞因子、B細(xì)胞異常活化分化為漿細(xì)胞，是自身抗原失去耐受的主要機(jī)制[6-7]。其中，T細(xì)胞亞群CD4+CD25+T細(xì)胞具有維持自身免疫耐受、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能，CD4+CD25+T細(xì)胞數(shù)量和功能下降，會(huì)容易出現(xiàn)自身免疫性疾病[6]。CD4+CD25+T細(xì)胞具有免疫抑制功能[7]。CD4+CD25+T細(xì)胞以主動(dòng)方式來(lái)維持免疫耐受，SLE的發(fā)展、發(fā)生與其數(shù)量、功能異常密切相關(guān)[8]，CD4+CD25+T細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞功能異常，會(huì)導(dǎo)致自身產(chǎn)生抗體，由此形成的免疫循環(huán)復(fù)合物，也會(huì)在患者的各個(gè)臟器沉積[9]。

雷公藤多苷和其他雷公藤制劑相比，其不良反應(yīng)較少，藥物用量小。它對(duì)體液免疫、細(xì)胞免疫具有抑制作用，具有抑制腎臟系膜細(xì)胞、基質(zhì)增生，抗炎和調(diào)節(jié)免疫的效果[10-11]，臨床常用于SLE治療。研究表明，雷公藤多苷屬于中藥提取物，它是從雷公藤植物的根部提取的總苷[12]，環(huán)氧二萜內(nèi)酯類化合物是其主要的成分。雷公藤多苷能抑制T細(xì)胞的增殖反應(yīng)，其治療SLE的機(jī)制較為復(fù)雜，但都與糖皮質(zhì)激素代謝間接或直接相關(guān)，能增加皮質(zhì)醇分泌，刺激垂體腎上腺軸[13]。有學(xué)者認(rèn)為，治療SLE可采用雷公藤多苷聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，但其對(duì)肝臟造成的損傷不容忽視，且藥物的不良反應(yīng)與用藥劑量呈正比，用藥劑量越大，不良反應(yīng)越大，劑量越小，不良反應(yīng)越小[14-15]。大量的臨床研究證明，雷公藤多苷聯(lián)合糖皮質(zhì)激素治療SLE都具有較好的療效，其起效快、安全性較高，并且不良反應(yīng)發(fā)生率低[16-18]。

本研究結(jié)果表明，所有患者在治療后的CD4+CD25+T細(xì)胞水平均有明顯上升，并且雷公藤多苷聯(lián)合潑尼松治療的患者CD4+CD25+T細(xì)胞水平明顯高于僅采用潑尼松治療的對(duì)照組；所有患者治療后SLE-DAI評(píng)分明顯降低，并且聯(lián)合潑尼松治療的患者SLE-DAI評(píng)分顯著高于單獨(dú)使用潑尼松者；雷公藤多苷聯(lián)合潑尼松治療總有效率為92%，高于單獨(dú)使用潑尼松治療總有效率(74%)；兩組患者治療后都出現(xiàn)有不良反應(yīng)，其中雷公藤多苷聯(lián)合潑尼松治療的女性患者月經(jīng)紊亂的發(fā)生率高于僅采用潑尼松治療的女性患者，說(shuō)明雷公藤多苷對(duì)患者的月經(jīng)周期有一定的影響。以上研究結(jié)果均與以往的報(bào)道相符。

綜上所述，雷公藤多苷聯(lián)合潑尼松治療SLE，能夠提高CD4+CD25+T細(xì)胞水平，可保護(hù)、恢復(fù)SLE造成的器官損傷，治療后出現(xiàn)少數(shù)不良反應(yīng)，并且對(duì)月經(jīng)周期有一定的影響，但均在可控范圍內(nèi)，值得臨床推廣應(yīng)用。

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