武振明，史素梅，王凌凌，郭 茜，王帥兵，齊秀恒

肝癌是由肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞或肝細(xì)胞發(fā)生的惡性腫瘤，具有惡性程度高、發(fā)病隱匿、易復(fù)發(fā)、預(yù)后差、易轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，其發(fā)病率高居我國(guó)第3位，病死率占全球肝癌死亡人數(shù)的27%～47%[1-3]。其根治方法是手術(shù)切除，但因?yàn)殚_(kāi)腹手術(shù)造成的創(chuàng)傷大、臥床時(shí)間長(zhǎng)，嚴(yán)重影響術(shù)后康復(fù)進(jìn)程?，F(xiàn)階段不能手術(shù)根除的中晚期肝癌首選方法是經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)。重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液能特異性地抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移及增殖，從而起到抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移及生長(zhǎng)作用，于2006年獲批應(yīng)用于肝癌的治療[4]。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)是一種殺瘤活性高、體外增殖能力強(qiáng)的廣譜抗腫瘤免疫活性細(xì)胞，樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)是抗原遞呈細(xì)胞中功能最強(qiáng)的。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，DC-CIK細(xì)胞免疫法在臨床得到越來(lái)越多的重視，具有提高機(jī)體免疫力的同時(shí)，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高效的殺傷能力，可清除體內(nèi)殘留的微小腫瘤病灶，是治療惡性腫瘤的一種新方法[5]。本研究對(duì)2016年2—9月中國(guó)石油天然氣集團(tuán)公司中心醫(yī)院接受治療的中晚期肝癌105例的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，探討DC-CIK細(xì)胞免疫治療在重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療治療中晚期肝癌的效果。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1臨床資料 本組105例。病例入選標(biāo)準(zhǔn)：①年齡>18歲；②腹部超聲、CT等影像學(xué)支持肝腫塊的存在；③甲胎蛋白(AFP)>400 μg/ml；④行穿刺針吸細(xì)胞學(xué)檢查，明確肝癌的診斷；⑤均為初次接受細(xì)胞免疫、重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療治療；⑥血常規(guī)、腎功能、心電圖均在正常范圍；⑦無(wú)其他惡性腫瘤。按治療方法分為觀察組54例和對(duì)照組51例。兩組性別、年齡、體重指數(shù)、乙型肝炎病史、病程等方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見(jiàn)表1。本研究開(kāi)展前均得到患者的知情同意，并且通過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)。

表1 兩組中晚期肝癌患者臨床資料比較

注：對(duì)照組采用重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用細(xì)胞免疫治療

1.2治療方法

1.2.1對(duì)照組：經(jīng)股動(dòng)脈穿刺插管至肝固有動(dòng)脈及其分支行造影術(shù)，明確肝臟腫瘤的供血?jiǎng)用}位置，先灌注重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液(山東先聲麥得津生物制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：20151217)15 mg，再灌注脫氧核苷酸鈉注射液(北京賽升藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：20151022)0.5 g，注射用羥喜樹(shù)堿[費(fèi)森尤斯卡比(武漢)醫(yī)藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：20151114)]20 mg，再將重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液15 mg、注射用鹽酸吡柔比星(浙江海正藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：20151006)40 mg、碘化油15 ml充分混勻后緩慢注入供血?jiǎng)用}。少數(shù)患者還需加用吸收性明膠海綿栓塞。

1.2.2觀察組：在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上，輔加細(xì)胞免疫治療。取患者外周血100 ml，經(jīng)淋巴分離液梯度離心，取界面層單個(gè)核細(xì)胞，用PBS懸浮細(xì)胞，離心洗滌細(xì)胞3次，用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h。收集非貼壁細(xì)胞(CIK細(xì)胞)置于加含有IFNR的AIMV培養(yǎng)基培養(yǎng)；收集貼壁細(xì)胞(DC細(xì)胞)，置于含有GM-CSF的AIMV培養(yǎng)基培養(yǎng)。觀察2個(gè)培養(yǎng)基每日細(xì)胞生長(zhǎng)情況，期間不定時(shí)補(bǔ)充培養(yǎng)基成分及促熟劑。兩個(gè)培養(yǎng)基共培養(yǎng)2周，后收集DC-CIK細(xì)胞，注入0.9%氯化鈉注射液200 ml中，同時(shí)輔加20%人血白蛋白250 ml靜脈滴注。

1.3觀察指標(biāo)及方法

1.3.1臨床療效判定：治療前與治療半年后患者分別行腹部CT檢查，按照RECIST實(shí)體腫瘤評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[5]，將患者治療效果分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)、疾病惡化(PD)。治療有效緩解率(ORR)=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

1.3.2生活質(zhì)量：根據(jù)KPS評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[6]評(píng)定患者治療前后的生活質(zhì)量。進(jìn)步：治療后較治療前提高15分以上；穩(wěn)定：治療后較治療前提高或降低15分以內(nèi)；惡化：治療后較治療前降低超過(guò)15分。有效率=(進(jìn)步+穩(wěn)定)/總例數(shù)×100%。

1.3.3不良反應(yīng)：感染、消化道反應(yīng)、白細(xì)胞降低、腎功能損害。

2 結(jié)果

2.1兩組患者臨床治療效果比較 觀察組的ORR率為53.70%，對(duì)照組的ORR率為31.37%。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.3409，P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.2兩組患者生活質(zhì)量評(píng)分比較 觀察組生活質(zhì)量評(píng)分改善有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.5019,P<0.01)。見(jiàn)表3。

2.3兩組患者不良反應(yīng)比較 兩組腎功能損害、白細(xì)胞降低、消化道反應(yīng)、感染發(fā)生情況比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表4。兩組不良反應(yīng)均予對(duì)癥治療后明顯緩解。

表2 兩組中晚期肝癌患者治療效果比較

注：對(duì)照組采用重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用細(xì)胞免疫治療;aP<0.05

表3 兩組中晚期肝癌患者生活質(zhì)量評(píng)分改善有效率比較

注：對(duì)照組采用重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用細(xì)胞免疫治療;aP<0.01

表4 兩組中晚期肝癌患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

注：對(duì)照組采用重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用細(xì)胞免疫治療

3 討論

原發(fā)性肝癌是我國(guó)較常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，約76%的原發(fā)性肝癌合并肝硬化，其治愈率低，3年生存率<19%[8-9]。因其發(fā)病隱匿，臨床癥狀不典型，早期診斷較為困難，大多患者就診時(shí)已近中、晚期，喪失了最佳手術(shù)時(shí)機(jī)，生存率顯著下降。目前在無(wú)法手術(shù)完全切除的肝癌治療中，經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)已經(jīng)成為主要治療方法；但術(shù)后腫瘤會(huì)發(fā)生缺氧、缺血，產(chǎn)生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等，促進(jìn)腫瘤血管的再生，最終造成腫瘤再次復(fù)發(fā)，使該療法的療效降低[10-11]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是目前體內(nèi)最強(qiáng)的血管生成因子，其不僅與肝癌供血血管的生成有關(guān)，也是能客觀反映肝癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的重要調(diào)節(jié)因子。有專家學(xué)者發(fā)現(xiàn)[12-13]，重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液是一種新型抗腫瘤血管生成的化療藥物，主要作用于VEGF的受體，直接阻斷VEGF的作用，能夠?qū)ρ苌烧{(diào)節(jié)因子有一定的改變，特異性抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移及增殖，充分調(diào)動(dòng)自身抗血管生成的作用，同時(shí)有效抑制肝腫瘤的再次生長(zhǎng)。其在聯(lián)合經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)治療中晚期肝癌療效已經(jīng)得到了肯定。鐘萍等[14]研究認(rèn)為，該藥聯(lián)合經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)能提高中晚期肝癌的有效率，耐受性較好，毒性更小。因肝癌在啟動(dòng)免疫應(yīng)答及免疫應(yīng)答方面均存在不同程度缺陷，故肝癌屬于一類免疫相關(guān)性的腫瘤。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[15-17]，經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)后肝癌患者抗腫瘤免疫功能會(huì)顯著下降，更易導(dǎo)致腫瘤再次復(fù)發(fā)。

細(xì)胞免疫治療法具有清除其體內(nèi)微小殘留病灶、提高機(jī)體免疫力、延長(zhǎng)生存期、降低腫瘤復(fù)發(fā)率的作用，主要是采集患者的DC-CIK細(xì)胞，將其提取、回輸至患者體內(nèi)，可以有效彌補(bǔ)經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)后的缺陷，已成為了治療中晚期肝癌患者新手段[18-22]。曹亮等[23]研究表明，細(xì)胞免疫治療聯(lián)合經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)有助于提高肝癌患者的生存期。本研究中發(fā)現(xiàn)，觀察組ORR率高于對(duì)照組，印證了細(xì)胞免疫具有對(duì)肝腫瘤更好的殺傷能力，顯著改善生存質(zhì)量，有利于輔助康復(fù)進(jìn)程，且觀察組不良反應(yīng)與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與劉松等[24]研究一致；該研究認(rèn)為細(xì)胞免疫是自體細(xì)胞回輸，不會(huì)額外增加排斥反應(yīng)等并發(fā)癥。本次研究中仍存在不足，如未能對(duì)患者進(jìn)行1、3年生存率的統(tǒng)計(jì)分析，故會(huì)在后續(xù)研究中繼續(xù)與患者保持聯(lián)系，探索兩種治療方法的遠(yuǎn)期生存率。

綜上所述，細(xì)胞免疫治療聯(lián)合重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液肝動(dòng)脈栓塞化療治療中晚期肝癌，可顯著提高疾病緩解率，改善生存質(zhì)量，值得臨床廣泛借鑒使用。但本研究未對(duì)遠(yuǎn)期生存率深入探究，對(duì)此需要進(jìn)一步跟蹤隨訪。

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