陳元生，陳勝魁，于海萍，羅致迪，劉興平

(1.江西環(huán)境工程職業(yè)學(xué)院，江西贛州341000;2.贛州市林業(yè)科學(xué)研究所，江西贛州341000;3.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)，江西 南昌 330045)

花絨寄甲 ［Dastarcushelophoroides(Fairmaire)］，又名花絨堅甲、花絨穴甲，屬鞘翅目寄甲科(Bothrideridae)［1］?；ńq寄甲在我國分布于北緯 22°26'～ 42°32'較為廣大的范圍內(nèi)［2］，其寄主主要是天牛類昆蟲。寄生松褐天牛的生物型為花斑花絨寄甲［3］，其以幼蟲寄生于松褐天牛的老齡幼蟲和蛹上，是對松褐天牛有效的重要寄生性天敵，對控制松褐天牛及松材線蟲病的發(fā)生與危害有較大的作用［1，4-5］。

自然界中，花斑花絨寄甲種群數(shù)量較小，其成蟲的分布格局多表現(xiàn)為聚集分布中的核心分布型，分布不均勻，擴(kuò)散能力弱，較難有效控制松褐天牛［6-7］。所以只有通過人為釋放大量花絨寄甲、人為擴(kuò)散花絨寄甲的分布來補(bǔ)充林間天敵的種群數(shù)量，才能達(dá)到良好的控制效果。應(yīng)用花斑花絨寄甲防治松褐天牛，在野外主要是通過懸掛花絨寄甲卵卡或者釋放成蟲來實(shí)現(xiàn)。釋放花絨寄甲卵卡與釋放成蟲相比，不需用活體寄主將其飼養(yǎng)至成蟲，減少了花絨寄甲幼蟲繁育及蛹和成蟲繁育保存過程，即能夠顯著降低繁殖和利用成本［8］。但另一個問題是，采用釋放卵的方式防治天牛時需要積累一定數(shù)量的花絨寄甲卵，即這些卵需要低溫貯藏一定時間，然而在積累和貯藏時，這些卵的孵化力可能會發(fā)生變化。明確花絨寄甲卵孵化率，可為野外試驗(yàn)中確定卵卡釋放量、釋放時間，乃至進(jìn)一步評價該天敵昆蟲提供依據(jù)［9］。因此，要利用花絨寄甲卵必須研究卵的貯藏技術(shù)，了解低溫處理對花絨寄甲卵孵化率的影響，明確卵卡釋放量、釋放時間，以提高花絨寄甲卵卡的釋放效果及其控制效果。

1 材料和方法

1.1 供試材料

供試?yán)ハx為松褐天牛生物型花絨寄甲即花斑花絨寄甲，采自江西省贛州市峰山國家森林公園，試驗(yàn)用蟲為室內(nèi)人工繁育的第1代。

花絨寄甲成蟲及卵的養(yǎng)蟲盒為18 cm×11.5 cm×7.5 cm的塑料盒。

試驗(yàn)培養(yǎng)箱為智能型光照培養(yǎng)箱GXZ－250A(寧波江南儀器廠)，光照強(qiáng)度為500～700 lx，箱內(nèi)的溫度變化為±0.5℃。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 低溫處理對花絨寄甲卵活力的影響試驗(yàn)卵卡制作參照張翌楠［3］的方法，將剛產(chǎn)下的卵粒制作成卵卡，每個卵卡上卵粒數(shù)為100粒左右，然后把卵卡分別置于上述養(yǎng)蟲盒內(nèi)(盒內(nèi)放置保濕棉球，以防卵失水而死)，標(biāo)注日期，置于 5、7.5、10、12.5、15℃培養(yǎng)箱(濕度55%、無光照)儲藏，每處理45個卵卡，儲藏5 d后開始每隔5 d檢查卵的存活情況，方法是:從每個低溫處理中隨機(jī)選取3個卵卡，分別放入20、26、32℃培養(yǎng)箱內(nèi)誘導(dǎo)孵化，每天觀察、記錄其孵化情況，統(tǒng)計孵化率，以確定最佳儲藏溫度和時間。對照(CK)設(shè)置為不經(jīng)低溫處理的卵，直接放入培養(yǎng)箱內(nèi)孵化。

1.2.2 花絨寄甲卵卡釋放時間及孵化節(jié)律測定將剛產(chǎn)下的卵粒制成卵卡，記錄卵卡制作時間，然后把卵卡存放在10℃、濕度55%的環(huán)境下儲藏，儲藏5 d后開始每隔5 d檢查卵的存活及孵化率、孵化時間，方法是:每隔5 d從10℃低溫中隨機(jī)選取1個卵卡，放入室外(5—7月)，讓其自然孵化，每天早上(8:10)、中午(12:00)、傍晚(17:30)觀察、記錄其孵化情況，統(tǒng)計孵化率，以確定其孵化節(jié)律及最佳野外釋放時間。

1.3 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析(oneway ANOVA)、t檢驗(yàn)和線性回歸分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 低溫處理對花絨寄甲卵活力的影響

花絨寄甲卵分別經(jīng)低溫5、7.5、10、12.5、15 ℃儲藏5～70 d后置于20℃下誘導(dǎo)孵化，結(jié)果見表1。采用方差分析及線性相關(guān)分析顯示，20℃下花絨寄甲卵的孵化率與儲藏時間的相關(guān)系數(shù)r=－0.206，F(xiàn)=0.394，P=0.967＞0.05，表明兩者間不存在顯著相關(guān)性。26、32℃下誘導(dǎo)的孵化率結(jié)果與此類似。說明70 d內(nèi)儲藏時間對卵的孵化率、卵活力沒有顯著影響。

而儲藏溫度及誘導(dǎo)孵化溫度均對花絨寄甲卵活力存在顯著影響。由表2可見，在相同誘導(dǎo)孵化溫度下，5℃低溫儲藏的卵平均孵化率最低，與其他儲藏溫度的差異達(dá)顯著水平，其次是7.5℃儲藏的平均孵化率，在20℃下與其他儲藏溫度的差異也達(dá)顯著水平，在26、32℃下雖較其他儲藏溫度的孵化率略低，但差異不顯著，低溫 10、12.5、15 ℃儲藏的卵平均孵化率與未經(jīng)低溫處理的對照差異不顯著(12.5℃儲藏的卵在32℃下孵化除外)，這表明，低溫7.5～15℃條件下均可儲藏花斑花絨寄甲卵，對其卵活力影響不大。由表2還可知，誘導(dǎo)孵化的溫度對花絨寄甲卵的孵化率也存在顯著影響，在同一儲藏溫度下，20℃條件下的孵化率最高，與26、32℃下的差異達(dá)顯著水平，而后兩者的差異不顯著。綜合以上結(jié)果說明，最有利于花絨寄甲卵儲藏及孵化的條件是，在10℃低溫下儲藏，然后置于20℃條件下孵化。

表1 經(jīng)低溫儲藏一定時間后置于20℃下花絨寄甲卵的孵化率 %

表2 低溫儲藏后不同孵化溫度下花絨寄甲卵的孵化率 %

2.2 經(jīng)低溫處理后花絨寄甲卵的孵化時間

將儲藏在7.5、10、12.5、15 ℃的花絨寄甲卵每隔5 d取出一部分分別放入20、26、32℃培養(yǎng)箱內(nèi)，記錄其每天孵化率，獲得平均孵化率與孵化時間(即從低溫取出至開始孵化的時間)的關(guān)系。由圖1可知，誘導(dǎo)孵化的溫度越高、儲藏溫度越高，花絨寄甲卵的孵化時間越早，如儲藏在15℃的卵放入32℃培養(yǎng)箱后2 d即可孵化而且孵化率較高，達(dá)16.58%。另外，誘導(dǎo)溫度不同，其孵化高峰期不同，溫度越低，高峰期越晚，除低溫15℃下儲藏的卵外，7.5、10、12.5 ℃下儲藏的花絨寄甲卵的孵化高峰存在相似的規(guī)律:20℃條件下孵化高峰期為8～12 d，26℃高峰期為 7～11 d，32℃高峰期為5～8 d。

圖1 經(jīng)低溫處理后花絨寄甲卵的平均孵化率與孵化時間的關(guān)系

2.3 花絨寄甲卵卡孵化節(jié)律

由圖2可知，一天內(nèi)花絨寄甲卵的孵化率與孵化時間存在極顯著相關(guān)性(F=12.394，df=2，36，P=0.000 08＜0.01)，早上(8:10)的孵化率極顯著高于中午(12:00)和傍晚(17:30)，雖然中午的孵化率也高于傍晚，但兩者的差異不顯著。

圖2 經(jīng)低溫處理后花絨寄甲卵的孵化節(jié)律

3 結(jié)論與討論

利用花絨寄甲成蟲防治松褐天牛具有良好的控制效果，防效可達(dá)66%以上［10-12］。但是多年來有效利用這一天敵的限制因素是人工批量繁殖成蟲的成本較高［8］。而釋放花絨寄甲卵則不需用活體寄主將其飼養(yǎng)至成蟲，可以大大降低成本、縮短繁育周期［13］。楊遠(yuǎn)亮等［10］調(diào)查結(jié)果表明，釋放花絨寄甲卵與釋放花絨寄甲成蟲對松褐天牛具有同等防效，兩者差異不顯著，而且釋放卵卡具有更高的寄生率，控制效果也相對更穩(wěn)定。卵卡的貯藏和釋放技術(shù)、釋放量、釋放時間等是保證其防控效果的關(guān)鍵，值得深入研究。

關(guān)于花絨寄甲卵的儲藏溫度問題，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，儲藏在5℃低溫的卵孵化率顯著低于對照(未低溫處理)和其他低溫，其平均孵化率分別為20℃條件下18.14%，26 ℃條件下 12.11%，32 ℃條件下12.64%，說明5℃低溫影響了卵活力，不適于儲藏花絨寄甲卵，而7.5～15℃低溫均可儲藏花絨寄甲卵，對其卵活力影響不大，多數(shù)情況下孵化率與對照的差異不顯著，以10℃儲藏最好。這一結(jié)果與李孟樓等［8］研究的花絨寄甲卵在5℃的低溫條件下保存49 d不影響其正常孵化的結(jié)果不一致，造成這一差異的可能原因之一是所采用的花絨寄甲寄主生物型不同，本試驗(yàn)所采用的是寄生松褐天牛的花斑花絨寄甲，而李孟樓等［8］的試驗(yàn)對象是寄生光肩星天牛的花絨寄甲，前者卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度(16.34 ℃)比后者的高［14］，兩者的卵對低溫的耐受能力是否不同，還有待進(jìn)一步研究。

關(guān)于花絨寄甲卵的儲藏時間問題，李孟樓等［8］曾報道，花絨寄甲卵在5℃低溫條件下保存49 d后不影響其孵化;李曉娟等［9］報道，花絨寄甲卵在8℃低溫條件下保存60 d，平均校正孵化率為36.93%，保存90 d，孵化率為0。這些與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在低于花斑花絨寄甲卵發(fā)育起點(diǎn)溫度的7.5～15℃下儲藏 70 d，儲藏時間對其卵的孵化率沒有顯著影響。據(jù)此建議在花斑花絨寄甲卵的應(yīng)用過程中，儲藏時間控制在70 d內(nèi)為宜，以確保孵化率和防治效果。

關(guān)于不同孵化溫度下花絨寄甲卵的孵化率問題，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，誘導(dǎo)孵化的溫度對花絨寄甲卵的孵化率存在顯著影響，在同一儲藏溫度下，20℃條件下的孵化率最高，與26、32℃下的差異達(dá)顯著水平，而后兩者的差異不顯著。這一結(jié)果與李孟樓等［8］的報道基本一致，其發(fā)現(xiàn)在16～25℃內(nèi)，19℃條件下的孵化率最高。這也與本試驗(yàn)所在地江西贛南的實(shí)際情況相符，該地花絨寄甲卵卡最佳釋放時間是4月份，而4月的平均氣溫一般也在20℃左右，所以此時釋放卵卡，卵孵化率最高。

關(guān)于卵卡經(jīng)低溫儲藏后的釋放時間問題，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，卵從低溫取出置20℃條件下5 d左右開始孵化，但孵化高峰期為8～12 d，所以卵卡從低溫取出后，應(yīng)在第5天左右釋放，最遲也須在第8天掛于林間目標(biāo)樹木上。如果氣溫高于20℃，那么釋放時間則需提前1～2 d。

關(guān)于花絨寄甲卵卡釋放量問題，首先要考慮的是卵的孵化率。本試驗(yàn)結(jié)果表明，花絨寄甲卵無論低溫處理與否，其孵化率一般在45%～70%，野外的孵化率可能會稍低。其次，要考慮的是花絨寄甲幼蟲爬行能力、搜尋能力和寄生能力以及木段上天牛幼蟲數(shù)量?；ńq寄甲卵卡釋放量多少合適，目前沒有一致的結(jié)論。張彥龍等［11］認(rèn)為，在伐倒死樹上釋放卵時，釋放花絨寄甲卵的數(shù)量與天牛幼蟲侵入孔數(shù)量比例應(yīng)為16∶1，其對松褐天牛的控制效果可達(dá)91.48%。而吳東生等［15］認(rèn)為，釋放花絨寄甲卵防治松褐天牛最佳益害比例應(yīng)為8∶1，此時對松褐天牛寄生率達(dá)62.77%。李孟樓等［8］則認(rèn)為，只要條件適宜，每頭天牛幼蟲只需有15～25粒的花絨寄甲卵即可保證其被寄生。

關(guān)于經(jīng)低溫處理后花絨寄甲卵的孵化節(jié)律問題，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，花斑花絨寄甲的卵主要在早上孵化，早上(8:10)的孵化率極顯著高于中午(12:00)和傍晚(17:30)，這說明，花絨寄甲卵在8:10—17:30均可孵化，至于其夜間是否孵化及白天每小時的孵化情況，有待進(jìn)一步深入研究。

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