牛緒東，張春瑋，任 禾，馮學(xué)俊，馬洪超，張?jiān)?，馬衛(wèi)明，劉建柱

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271018；2.中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京 100125）

1 發(fā)病情況

2017年8月山東省菏澤市某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的3批種鵝相繼發(fā)病死亡。這3批種鵝因在發(fā)病前2個(gè)月開始強(qiáng)制換羽，被限食13 d（只喝水不喂食）。恢復(fù)采食量后，由于沒(méi)有產(chǎn)蛋，該養(yǎng)殖戶對(duì)其飼喂了育成期飼料（飼料質(zhì)量較差）。飼喂1個(gè)半月后，3 000只18月齡灰鵝和700只8月齡白鵝開始發(fā)病死亡。相隔10 d左右，3 000只4月齡白鵝開始發(fā)病死亡。截至9月8日，18月齡灰鵝死亡96只，8月齡白鵝死亡32只，4月齡白鵝死亡24只。該養(yǎng)殖戶曾飼喂青霉素、阿莫西林和黃芪多糖等藥物，全群注射頭孢噻呋鈉。雖暫時(shí)有一定療效，但不久又出現(xiàn)發(fā)病死亡。

2 臨床癥狀

病鵝精神沉郁或嗜睡、羽毛松亂、翅膀下垂、食欲減退或廢絕、離群獨(dú)立、腿無(wú)力且行動(dòng)緩慢。眼及鼻孔處有漿液性和黏液性分泌物，氣喘，甩頭頻繁。病鵝嚴(yán)重下痢，排出腥臭的黃綠色或黃白色稀便，體溫多在42～43 ℃。急性病例多于3 d內(nèi)死亡，有的病鵝無(wú)前驅(qū)癥狀，突然于夜間死亡。個(gè)別病程較長(zhǎng)的鵝可見跗關(guān)節(jié)腫大，并出現(xiàn)跛行、下痢、貧血、消瘦和癱瘓癥狀，肢爪干癟無(wú)光澤（圖1）。

圖1 急性病例爪鮮亮，慢性病例爪干癟

3 剖檢變化

腹腔內(nèi)臟漿膜、心包膜、腹膜、腸系膜及其周圍脂肪可見明顯的出血片和出血點(diǎn)（圖2、圖3、圖4）；喉頭及氣管黏膜潮紅、出血（圖5）；肺臟充血、出血，甚至水腫（圖6）；肝臟腫大、變性，質(zhì)脆且微黃，并出現(xiàn)多量針頭大小的灰黃色或黃白色壞死點(diǎn)（圖7）；心包內(nèi)積有淡黃色液體（圖8），心外膜及心耳出血（圖9），心內(nèi)膜不同程度出血（圖10）；脾臟腫大、質(zhì)脆、出血，且有壞死灶（圖11）；腎臟輕度腫大、出血；胰腺潮紅，可見出血點(diǎn)及白色壞死點(diǎn)（圖12）；胃腸黏膜出血，特別是十二指腸黏膜更明顯；卵泡出血、變性（圖13）。

圖2 腹腔內(nèi)臟漿膜嚴(yán)重出血

圖3 心包膜及腹膜可見明顯的出血片和出血點(diǎn)

圖4 腸系膜及周圍脂肪出血

圖5 喉頭及氣管黏膜潮紅、出血

圖6 肺臟充血、出血、水腫

圖7 肝臟腫大并布滿灰黃色的壞死點(diǎn)

圖8 心包積液，心外膜及心冠脂肪出血

圖9 心外膜及心耳出血

圖10 心內(nèi)膜出血

圖11 脾臟腫大、出血、壞死

圖12 胰腺潮紅，可見出血點(diǎn)及白色壞死點(diǎn)

圖13 卵泡出血、變性

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 病料鏡檢

無(wú)菌切取肝臟，進(jìn)行直接觸片、自然干燥和瑞氏染色，可看到兩極濃染的小桿菌；用革蘭氏染色可見紅色小桿菌。

4.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)及生化試驗(yàn)

無(wú)菌采取肝臟病料，將其涂布于普通瓊脂平板、麥康凱平板和鮮血平板上，置于37 ℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)1 d后觀察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)普通瓊脂平板和麥康凱平板上無(wú)菌生長(zhǎng)，而在鮮血平板上可看到光滑、透明的露珠樣小菌落。隨后將分離菌接種于血清肉湯培養(yǎng)基中純培養(yǎng)1 d，最終取0.2 mL此培養(yǎng)液接種于微量生化反應(yīng)管2 d后觀察結(jié)果，可見觸酶、氧化酶反應(yīng)陽(yáng)性，吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性，脲酶試驗(yàn)陰性，說(shuō)明該菌分解了葡萄糖、蔗糖、果糖和甘露醇，不分解乳糖、麥芽糖和山梨醇。將純培養(yǎng)物進(jìn)行直接涂片、自然干燥和瑞氏染色、鏡檢可見大量?jī)蓸O濃染的小桿菌（圖14）；隨后用革蘭氏染色，可見大量紅色小桿菌（圖15）。

圖14 瑞氏染色鏡檢結(jié)果

圖15 革蘭氏染色鏡檢結(jié)果

4.3 PCR檢測(cè)

取肝臟和脾臟進(jìn)行研磨，離心后取上清液進(jìn)行PCR基因擴(kuò)增，使用流感病毒的通用引物進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果為陰性。取純培養(yǎng)物，對(duì)分離菌進(jìn)行16S rRNA序列分析，最終確定為禽多殺性巴氏桿菌。

4.4 藥敏試驗(yàn)

極敏藥物有鹽酸環(huán)丙沙星（21 mm）、鹽酸沙拉沙星（20 mm）和鹽酸多西環(huán)素（28 mm）；高敏藥物有煙酸諾氟沙星（16 mm）和恩諾沙星（19 mm）；低敏藥物有磺胺氯吡嗪鈉（9 mm）和鹽酸林可霉素（8 mm）；不敏感藥物包括鹽酸左氧氟沙星、硫酸黏菌素、硫酸慶大霉素、磺胺甲氧嘧啶鈉、氟苯尼考、鹽酸頭孢噻呋、替米考星、硫酸新霉素、磺胺間甲氧嘧啶鈉和阿莫西林。

5 治療措施及效果

用三氯異氰尿酸鈉（濃度為1∶800），對(duì)種鵝舍及其周圍環(huán)境進(jìn)行消毒。首先，每天1次，連續(xù)3 d；然后，每3 d 1次，連續(xù)3次；最后，進(jìn)行常規(guī)消毒。對(duì)全場(chǎng)鵝群拌料喂服10%多西環(huán)素可溶性粉，每100 kg飼料加入本品400 g，連喂6 d；發(fā)現(xiàn)病鵝后及時(shí)隔離治療，對(duì)病鵝肌肉注射5%恩諾沙星注射液，每次0.1 mL/kg，每天2次，連續(xù)使用 3～5 d。

采取上述措施2 d后見效，4 d后基本恢復(fù)正常，繼續(xù)用藥2 d后痊愈，沒(méi)有出現(xiàn)新病例，取得了滿意療效。

6 討論與結(jié)論

通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀檢查和病理剖檢，進(jìn)行了初步診斷。例如：強(qiáng)制換羽后成年鵝開始零星發(fā)病，多于夜間突然死亡；剖檢可見內(nèi)臟漿膜嚴(yán)重出血，肝臟腫大并出現(xiàn)大量灰黃色或灰白色壞死灶等。通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最終判定引起該場(chǎng)三批種鵝陸續(xù)發(fā)病死亡的病原為禽多殺性巴氏桿菌，確診為禽霍亂。

該場(chǎng)三批種鵝相繼發(fā)生禽霍亂的主要原因是：首先，對(duì)正處于強(qiáng)制換羽恢復(fù)期的18月齡灰鵝飼喂了質(zhì)量較差的育成料，再加上當(dāng)時(shí)天氣悶熱、潮濕，使其在短期內(nèi)受到了多重應(yīng)激，導(dǎo)致鵝群機(jī)體免疫力下降，從而誘發(fā)了條件性致病菌——多殺性巴氏桿菌感染[3]；其次，灰鵝發(fā)病后，該養(yǎng)殖戶沒(méi)有及時(shí)給后兩批白鵝進(jìn)行預(yù)防性投藥，造成該病蔓延。

根據(jù)藥敏試驗(yàn)，及時(shí)采用極敏藥物鹽酸多西環(huán)素對(duì)全場(chǎng)鵝群進(jìn)行治療和預(yù)防，并選用高敏藥物恩諾沙星注射液對(duì)病鵝個(gè)體進(jìn)行肌肉注射，很快控制了病情，取得了較好療效。選擇多西環(huán)素和恩諾沙星對(duì)產(chǎn)蛋種鵝群進(jìn)行藥物治療，未見有影響種鵝生產(chǎn)性能現(xiàn)象。

鵝禽霍亂可使用禽巴氏桿菌疫苗進(jìn)行預(yù)防。禽霍亂弱毒疫苗可用于成年鵝的緊急免疫或常規(guī)免疫，肌肉注射1 mL/羽（大約含10億活菌）；禽霍亂氫氧化鋁甲醛疫苗可用于2月齡以上鵝群的常規(guī)免疫，肌肉注射2 mL/羽，每年至少免疫2次[4]；本病高發(fā)區(qū)最好采用標(biāo)準(zhǔn)疫苗和本地疫苗株制成的滅活苗聯(lián)合免疫[5]。但需注意，目前禽霍亂商品化疫苗只對(duì)同型毒株有效，況且巴氏桿菌的抗原結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，疫苗免疫效果并不理想[6]。因此，鵝禽霍亂的預(yù)防主要是加強(qiáng)鵝群的飼養(yǎng)管理，做好衛(wèi)生消毒，提高機(jī)體免疫力，喂給優(yōu)質(zhì)的全價(jià)飼料，時(shí)刻注意天氣變化，盡量減少應(yīng)激，定期或針對(duì)性地使用有效預(yù)防藥物。

[1] 程龍飛，許利娜，林建生，等. 福建及鄰近省份禽源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定[J]. 中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)，2014，22（4）：40-44.

[2] 刁有祥. 鴨鵝病防治及安全用藥[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2016：100-106.

[3] 許英民. 中西醫(yī)結(jié)合治療種鵝慢性巴氏桿菌病[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2015（3）：63-65.

[4] 陳金英. 鵝霍亂病的防治措施[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2016，32（3）：217.

[5] 王 偉. 一例鵝巴氏桿菌病的診治[J]. 上海畜牧獸醫(yī)通訊，2012（5）：90-91.

[6] 秦緒偉，刁有祥. 鵝巴氏桿菌病的診斷與治療[J]. 家禽科學(xué)，2017（3）：37-39.