傅 強(qiáng) ，黃穎婕 ，付啟明 ，梁 驥 ，馬 婧 ，馮 雪

（1.湖南化工研究院 國家農(nóng)藥創(chuàng)制工程技術(shù)研究中心，長沙 410014；2.湖南加法檢測有限公司，長沙 410014；3.湖南師范大學(xué)附屬中學(xué)，長沙 410006）

啶酰菌胺（boscalid）是琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHI）類殺菌劑重要品種，主要用于油菜、果樹、蔬菜和谷物防治白粉病、灰霉病及各種腐爛病、褐腐病和根腐病等[1]。目前，啶酰菌胺已在我國番茄、黃瓜、葡萄、草莓、花生、馬鈴薯、蘋果、甜瓜、香蕉和油菜上登記使用，并已制定啶酰菌胺在黃瓜、蘋果、葡萄、草莓、甜瓜中的最大殘留限量[2]。目前已有關(guān)于啶酰菌胺分析方法[3-5]、毒性方面[6-7]的研究，但未見啶酰菌胺在我國使用的膳食攝入風(fēng)險評估。本試驗通過1年6地的田間殘留試驗，研究了噴施方式下啶酰菌胺在馬鈴薯中的最終殘留量，以期推薦啶酰菌胺在馬鈴薯上最大殘留限量值，為其安全使用提供科學(xué)依據(jù)。本研究還根據(jù)啶酰菌胺在馬鈴薯中的最終殘留量進(jìn)行膳食攝入評估，以期為啶酰菌胺在馬鈴薯生產(chǎn)上的科學(xué)、合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

50%啶酰菌胺水分散粒劑，巴斯夫歐洲公司；啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)品（99%）；乙腈、甲醇、甲酸，色譜純；氯化鈉，分析純。

Agilent 1290-6460高效液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀 （LC-MS/MS）、Agilent SB-C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm），美國Agilent公司；AL204型電子天平，瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司；Sartorius BL310型電子天平，德國賽多利斯公司；T25B型高速均質(zhì)機(jī)，德國IKA公司。

1.2 田間試驗設(shè)計

田間試驗依據(jù)《農(nóng)藥殘留試驗準(zhǔn)則》（NY/T 788—2004）[8]和《農(nóng)藥登記殘留田間試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》[9]進(jìn)行。田間試驗在2015年開展，試驗地設(shè)在湖南省平江縣翁江鎮(zhèn)楊潭村花屋組、江蘇省儀征市樸席鎮(zhèn)曹橋村西莊組、山東省濟(jì)南市歷城區(qū)大辛莊村、北京市昌平區(qū)興壽鎮(zhèn)東營村、黑龍江省哈爾濱市南崗區(qū)紅旗鄉(xiāng)、云南省昆明市五華區(qū)沙市街道辦大村。田間試驗方案及田間樣品的采集、制備及貯存參考文獻(xiàn)[10]。啶酰菌胺在最終殘留試驗中有效成分用量分別為450 g/hm2和675 g/hm2，施藥3次和4次，采收間隔期為5,7,10 d。

1.3 殘留檢測分析方法

1.3.1 樣品前處理

稱取馬鈴薯樣品10 g于100 mL離心管中，加入40 mL乙腈，高速均質(zhì)提取1 min，加入5 g氯化鈉，再均質(zhì)提取1 min，在3 800 r/min離心5 min，取上清液，過0.22 μm有機(jī)相濾膜，待LC-MS/MS檢測。

1.3.2 儀器條件

流速：0.4 mL/min；梯度洗脫程序：乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比40∶60）保持2 min，乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比80∶20）保持1.5 min，乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比90∶10）保持1.5 min，隨后，乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比40∶60）保持4 min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：2 μL。

質(zhì)譜條件：多離子反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式掃描，電噴霧正離子源（ESI+）；離子噴霧電壓：3 500 V；霧化氣壓力：103.4 kPa；干燥氣溫度：300℃；干燥氣流速：6 L/min。具體質(zhì)譜檢測參數(shù)見表1。

表1 啶酰菌胺質(zhì)譜檢測參數(shù)

1.3.3 標(biāo)樣溶液的配制

稱取0.025 3 g啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)品，用色譜純乙腈溶解，定容至50 mL，配制成500 mg/L的母液。再用色譜純乙腈稀釋母液，逐級配制0.001,0.002,0.01,0.02,0.1,0.2 mg/L質(zhì)量濃度的系列標(biāo)樣溶液。

1.4 長期膳食攝入風(fēng)險評估方法

依據(jù)國家衛(wèi)生計生委發(fā)布的《中國居民營養(yǎng)與慢性病狀況報告（2015年）》[11]，結(jié)合良好農(nóng)業(yè)規(guī)范條件下啶酰菌胺殘留試驗中值，計算啶酰菌胺的國家估計每日攝入量［NEDI，μg/(kgbw)］，計算公式如下：

式中：STMRi—第i類初級食用農(nóng)產(chǎn)品的規(guī)范試驗殘留中值，mg/kg；Fi—第i類食用農(nóng)產(chǎn)品的消費量，g；bw—人群平均體重，kg。

啶酰菌胺的慢性攝入風(fēng)險（RQc）用國家估計每日攝入量占每日允許攝入量［ADI，μg/(kg bw)］的百分率表示，計算公式如下：

當(dāng)RQc≤100%時，表示慢性風(fēng)險可以接受，RQc越小，風(fēng)險越小；當(dāng)RQc＞100%時，表示有不可接受的慢性風(fēng)險，RQc越大，風(fēng)險越大[12-13]。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

在上述液相色譜條件下對啶酰菌胺系列標(biāo)樣溶液進(jìn)行檢測，并以啶酰菌胺質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得啶酰菌胺線性方程為y＝69 288 x＋92.18，R2為0.999 7。

圖1 啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 添加回收率

將不同質(zhì)量濃度的啶酰菌胺標(biāo)樣溶液分別加入馬鈴薯空白樣品中，進(jìn)行樣品的提取和凈化。當(dāng)添加水平為0.01,0.1,1 mg/kg時，啶酰菌胺的平均回收率在89.0%～97.0%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.9%～7.0%之間（見表2）。啶酰菌胺的最低檢測濃度為0.01 mg/kg，最小檢出量為1.0×10-12g。

2.3 啶酰菌胺最終殘留量

不同采收間隔期，啶酰菌胺在湖南、江蘇、山東、北京、黑龍江、云南馬鈴薯中的最終殘留量結(jié)果見表3。采收間隔期為5d時，啶酰菌胺殘留量在＜0.01～0.212 mg/kg之間；采收間隔期為7 d時，殘留量在＜0.01～0.052 1 mg/kg之間；采收間隔期為10 d時，殘留量在＜0.01～0.085 7 mg/kg之間。

表2 添加回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果(n=5)

表3 啶酰菌胺在馬鈴薯上的規(guī)范殘留試驗結(jié)果

2.4 長期膳食攝入和慢性風(fēng)險評估

啶酰菌胺已在我國馬鈴薯上登記使用，且登記使用的安全間隔期為5 d。目前，我國尚未制定啶酰菌胺在馬鈴薯中的最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)表3中安全間隔期5 d的殘留數(shù)據(jù)，推薦馬鈴薯中啶酰菌胺的最大殘留限量（MRL）為0.5 mg/kg，并對推薦的限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行長期膳食攝入和慢性風(fēng)險評估。

我國制定啶酰菌胺的每日允許攝入量（ADI）為0.04 mg/(kg bw)[2]，我國居民的平均體重為63 kg[11]。薯類取規(guī)范殘留試驗得出的馬鈴薯殘留中值0.01 mg/kg，則NEDI為0.495 μg/(kg bw)；深色蔬菜取番茄中啶酰菌胺MRL值3 mg/kg，NEDI則為0.274 5 mg/(kg bw)；淺色蔬菜取黃瓜中啶酰菌胺MRL值5 mg/kg，NEDI則為0.918 5 mg/(kg bw)；水果取葡萄中啶酰菌胺MRL值5 mg/kg，NEDI則為0.228 5 mg/(kg bw)；植物油取油菜中啶酰菌胺MRL值1 mg/kg，NEDI則為0.032 7 mg/(kg bw)。未在我國登記使用的沒有列入統(tǒng)計。啶酰菌胺在普通人群中的國家估計每日攝入量是1.455 mg/(kg bw)，慢性攝入風(fēng)險在57.7%左右。因此，啶酰菌胺在馬鈴薯中的殘留對一般人群健康的影響是在一個可接受的風(fēng)險水平。

3 結(jié)論

啶酰菌胺國家估計每日攝入量為1.455mg/(kgbw)，而馬鈴薯中國家估計每日攝入量為0.495μg/(kgbw)，幾乎可忽略不計。據(jù)此，按本試驗的施藥劑量、施藥次數(shù)和采收間隔期在馬鈴薯上施用啶酰菌胺，對一般人群的健康不會產(chǎn)生風(fēng)險。

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