陳玲玲，仲蘇林，吳建蘭，胥亞云，曹新梅，高梟穎

（聯(lián)合國南通農(nóng)藥劑型開發(fā)中心，江蘇南通 226006）

阿維菌素（abamectin）由日本北里大學和美國Merck公司首先開發(fā)，是廣泛使用的一類具有殺菌、殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物[1]。噻唑磷（fosthiazate）為有機磷類殺蟲、殺線蟲劑，由日本石原產(chǎn)業(yè)研制。其主要通過抑制害蟲乙酰膽堿酯酶的合成而起效，可用于防治各類根結(jié)線蟲、蚜蟲等[2]。聯(lián)合國南通農(nóng)藥劑型開發(fā)中心將2種殺蟲劑進行復配，擴大了兩者殺蟲譜，使得2種藥劑相互補充，藥效明顯，且延緩了抗藥性的產(chǎn)生[3]。目前阿維菌素、噻唑磷單劑及其與其它藥劑復配制劑的檢測方法已有報道[2,4]，而利用高效液相色譜同柱測定兩者復配微囊懸浮劑的分析方法未見報道。本文采用反相高效液相色譜法，同時分離測定阿維菌素和噻唑磷。該方法操作簡便、快捷，準確度和精密度良好，適用于農(nóng)藥制劑分析。

1 實驗部分

1.1 儀器

安捷倫高效液相色譜儀（1200），帶二極管陣列檢測器（DAD）、在線脫氣機、自動進樣器、四元梯度泵及安捷倫化學工作站。

1.2 試劑

水，新蒸2次蒸餾水；甲醇、乙腈（色譜純）；阿維菌素標樣（98.9%）、噻唑磷標樣（98.6%），上海市農(nóng)藥研究所；6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑（1%阿維菌素＋5%噻唑磷），聯(lián)合國南通農(nóng)藥劑型開發(fā)中心制。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse XDB C18不銹鋼柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈＋甲醇＋水。梯度洗脫：0～5 min，乙腈、甲醇、水三者體積比35∶25∶40；6～20 min，乙腈、甲醇、水三者體積比60∶25∶15；21～24 min，乙腈、甲醇、水三者體積比35∶25∶40。柱溫：室溫；檢測波長：245 nm；流速：1.0 mL/min；進樣量：5 μL。在上述操作條件下，噻唑磷保留時間約為3.7 min，阿維菌素B1b保留時間約為13.5 min，B1a約為15.5 min。標樣以及試樣典型高效液相色譜圖如圖1、圖2。

圖1 噻唑磷和阿維菌素標樣色譜圖

圖2 6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑色譜圖

1.4 操作步驟

1.4.1 溶液配制

分別稱取噻唑磷標樣0.3 g、阿維菌素標樣0.06 g（均精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，用甲醇超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇定容至刻度，即制得標樣混合溶液。

稱取試樣約1.2 g（精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，用甲醇超聲溶解15 min，冷卻至室溫后用甲醇定容至刻度，搖勻，過濾，即得到試樣溶液。

1.4.2 測定

在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入3針試樣溶液。將測得的3針試樣溶液峰面積平均值分別代入噻唑磷和阿維菌素線性回歸方程，分別計算樣品中噻唑磷和阿維菌素（B1a＋B1b）有效成分的質(zhì)量分數(shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

對噻唑磷和阿維菌素標樣溶液分別進行紫外掃描，得到兩者紫外吸收光譜圖（圖3、圖4）。從圖中可以看出，噻唑磷在225 nm有較好吸收，阿維菌素在245 nm有較好吸收。因樣品中阿維菌素含量較低，考慮使兩者有效成分峰面積接近，故而選擇245 nm作為檢測波長。

圖3 噻唑磷光譜圖

圖4 阿維菌素光譜圖

2.2 流動相的選擇

阿維菌素的液相分析中，流動相需用到乙腈[4]，在Agilent Eclipse XDB C18色譜柱上采用乙腈-甲醇-水體系作流動相。以阿維菌素的流動相進行研究，存在溶劑峰干擾樣品峰的問題，因此采用梯度洗脫（0～5 min，乙腈、甲醇、水體積比35∶25∶40；6～20 min，乙腈、甲醇、水體積比60∶25∶15；21～24 min，初始流動相）。在此梯度條件下，色譜峰保留時間合適，有效成分完全分離，峰形對稱。

2.3 方法的線性相關性測定

用移液管分別移取1.4.1中標樣溶液1.0,2.0,5.0,8.0,10.0 mL于5個25 mL容量瓶中，配制一系列噻唑磷和阿維菌素不同質(zhì)量濃度的混合標樣溶液。在上述色譜條件下，測其相應的峰面積值。以噻唑磷、阿維菌素的質(zhì)量濃度為橫坐標，其峰面積為縱坐標，分別繪制線性關系曲線，見圖5、圖6。線性回歸方程分別為y噻唑磷=921.17 x-13.224，y阿維菌素=8 283 x-7.442 2，相關系數(shù)分別為R2噻唑磷=0.999 5，R2阿維菌素=0.999 6。

圖5 噻唑磷線性關系圖

圖6 阿維菌素線性關系圖

2.4 方法精密度實驗

對同一6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑樣品平行測定5次，測得噻唑磷和阿維菌素的平均質(zhì)量分數(shù)分別為5.02%和1.00%，標準偏差分別為0.027和0.009，變異系數(shù)分別為0.54%和0.89%（表1）。從測定結(jié)果可以看出該方法具有較好的精密度。

表1 方法的精密度實驗

2.5 方法準確度實驗

稱取5個已知噻唑磷質(zhì)量分數(shù)5.02%，阿維菌素質(zhì)量分數(shù)1.00%的試樣，分別用移液管準確加入1.4.1中的混合標樣溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，進行添加回收率測定。測得噻唑磷的回收率為98.93%～100.61%，平均回收率為99.67%；阿維菌素的回收率為97.98%～100.41%，平均回收率為99.32%（表2）。

表2 方法準確度實驗結(jié)果

3 結(jié)論

實驗結(jié)果表明，該方法操作簡便，能夠同時測定6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑中2種有效成分的質(zhì)量分數(shù)，擁有較好的精密度和較高的準確度，可用于該復配制劑的質(zhì)量檢測。

[1]張敏恒.新型高效廣譜殺蟲殺螨劑阿維菌素[J].農(nóng)藥,1998,37(3)：36-37.

[2]潘靜,徐妍,馬超,等.12%噻蟲嗪·噻唑磷顆粒劑的高效液相色譜分析[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2017,16(1)：38-40.

[3]王戰(zhàn)清,謝瑞英,趙彥超,等.阿維菌素·噻唑磷殺蟲劑組合物：ZL,201110127559.7[P].2011-12-07.

[4]梅寶貴,李秀杰.阿維菌素的液相色譜分析[J].化工標準、計量、質(zhì)量,2002(4)：35-36.