史向華，王 美，李百?gòu)?qiáng)，薛潤(rùn)苗，柴秋彥，崔吉利，張俊榮

（1.山西省醫(yī)藥與生命科學(xué)研究院，山西太原030006； 2山西中醫(yī)藥大學(xué)，山西晉中030619）

麥參肝安膠囊是苦參、麥芽、茵陳、綠礬、硝石等多味中藥組成的新復(fù)方制劑，由古方硝石散加經(jīng)驗(yàn)方組成，臨床應(yīng)用于急慢性肝炎、濕熱黃疸，有特效。本實(shí)驗(yàn)對(duì)小鼠灌胃給藥，對(duì)麥參肝安膠囊的急性毒性和蓄積性毒性進(jìn)行了研究，以評(píng)價(jià)其安全性，為臨床給藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 KM小鼠，清潔級(jí)，雌雄各半，體質(zhì)量18～21 g，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所繁育場(chǎng)提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字01-3001。動(dòng)物飼養(yǎng)12 h晝夜節(jié)律光照，溫度22℃～26℃，濕度40%～70%。

1.1.2 藥品與試劑 麥參肝安膠囊由中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)藥品儀器檢定所提供（樣品為棕褐色粉末狀物，批號(hào)：990102；置冰箱中備用），0.6 g/粒，臨床用量2～3粒，2次/d，臨床每日最大劑量為60 mg/kg。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 急性毒性實(shí)驗(yàn) 采用標(biāo)準(zhǔn)：參考國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《中藥急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》進(jìn)行。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取小鼠按體重隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半，禁食不禁水過(guò)夜（16 h）后給藥，1次灌胃體積為0.2 mL/10 g，劑量分別為 6.25 g/kg、5.00 g/kg、4.00 g/kg、3.20 g/kg、2.56 g/kg。然后連續(xù)觀察14 d，記錄反應(yīng)情況及死亡率［1-4］。用 DAS 1.0統(tǒng)計(jì)軟件程序中的“Bliss法”計(jì)算LD50及95%可信限。

1.2.2 蓄積性毒性及耐受性實(shí)驗(yàn)［6-9］體重18～21 g小鼠，隨機(jī)分為2組，每組20只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)組用劑量定期遞增染毒法，每天給藥，4 d為1期，每期遞增1次，開(kāi)始給0.1 LD50，以后按等比級(jí)數(shù)1.8倍逐期遞增，按蓄積性指數(shù)K=LD50（n）/LD50計(jì)算蓄積性指數(shù)K值，對(duì)照組灌等體積去離子水。染毒期每隔4 d稱體質(zhì)量1次，記錄每天每組動(dòng)物攝食量，連續(xù)染毒20 d。于第21天對(duì)照組和給藥組都給1次LD50量，觀察1 w，記錄給藥組死亡率及對(duì)照組動(dòng)物死亡及比值，測(cè)定其耐受性［5-8］。

2 結(jié) 果

2.1 急性毒性實(shí)驗(yàn)

小鼠在1次灌胃給予麥參肝安膠囊后約20 min出現(xiàn)活動(dòng)減少、踡伏、豎毛等癥狀，繼而出現(xiàn)跳躍，側(cè)臥、昏睡、呼吸停止而死亡。用藥后40 min出現(xiàn)死亡，多數(shù)動(dòng)物死亡時(shí)間在12 h內(nèi)，24 h后存活動(dòng)物則不再死亡。幸存者3～4 d恢復(fù)正常。

死亡小鼠解剖，除胃腸道有大量殘留藥物及少量氣體外，心臟、肝臟、脾、肺、腎及胃腸等臟器無(wú)明顯肉眼可見(jiàn)的組織學(xué)改變。麥參肝安膠囊急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 麥參肝安膠囊急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2 蓄積性毒性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)20 d時(shí)，麥參肝安膠囊經(jīng)灌胃給藥對(duì)小鼠的總劑量為37.3 g/kg，計(jì)算蓄積性指數(shù)，蓄積性指數(shù)K＞5，按蓄積評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，該藥屬弱蓄積性或無(wú)蓄積性。蓄積性毒性實(shí)驗(yàn)中所用給藥劑量及時(shí)間見(jiàn)表2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 麥參肝安膠囊蓄積性毒性實(shí)驗(yàn)給藥劑量及時(shí)間表

表3 麥參肝安膠囊蓄積性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 耐受性實(shí)驗(yàn)

對(duì)照組死亡率為60%（12/20），用藥組死亡率為0，表明小鼠較長(zhǎng)時(shí)間小劑量口服后，會(huì)產(chǎn)生明顯的耐受性。

3 討論

麥參肝安膠囊中苦參、麥芽、茵陳等具有清熱利濕、利膽退黃、舒肝行氣功效，故臨床上用于治療急慢性肝炎、濕熱黃疸、肝硬化腹水等具有明顯療效［10］。但方中所含綠礬、硝石雖無(wú)毒，卻對(duì)胃腸道有明顯刺激性，可引起嘔吐、腹瀉、腹痛等癥狀。而且，中藥及方劑中的多組分具有配伍協(xié)同作用的特點(diǎn)，其整體藥效常常不是各個(gè)單組分作用的簡(jiǎn)單相加。

急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，麥參肝安膠囊的LD50為4 160.50 mg/kg，相當(dāng)于臨床每日最大劑量的69倍，未發(fā)現(xiàn)明顯毒作用靶器官。蓄積毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，麥參肝安膠囊經(jīng)灌胃給藥對(duì)小鼠的蓄積性指數(shù)K＞5，說(shuō)明麥參肝安膠囊屬弱蓄積性或無(wú)蓄積性，且長(zhǎng)時(shí)間小劑量口服后，會(huì)產(chǎn)生明顯的耐受性。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果為麥參肝安膠囊的臨床應(yīng)用提供了一定的參考價(jià)值。