王桂榮

（吉林省肝膽病醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130062）

0 引言

人體感染到乙型肝炎病毒后預(yù)后質(zhì)量相對(duì)較差，隨著病情惡化肝臟會(huì)有纖維化現(xiàn)象，引發(fā)肝硬化、肝功能衰竭[1]，而乙型肝炎病毒感染也是誘發(fā)原發(fā)性肝癌的一個(gè)重要因素。干擾素IFN-γ為細(xì)胞因子，自身存在抗病毒、免疫調(diào)節(jié)以及抗細(xì)胞增殖的特性[2]，在各種肝病如肝炎、肝癌、肝硬化的出現(xiàn)和發(fā)展過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用[3]，因此近年來(lái)臨床對(duì)此類肝病患者進(jìn)行血清IFN-γ檢測(cè)以鑒別和了解病情，為深入了解血清γ-干擾素指標(biāo)情況對(duì)于肝炎、肝硬化以及肝癌患者的臨床價(jià)值，對(duì)本院近年來(lái)收治的此類患者和健康人群資料進(jìn)行回顧性分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選本院2016年至2018年收治的肝炎、肝硬化與肝癌患者為分析對(duì)象，在各種疾病患者群體中各抽取30例，另選同期到本院進(jìn)行健康體檢提示無(wú)肝病異常健康人30例為對(duì)照組。肝炎組患者男性24例，女性6例；平均（37.7±11.6）歲；肝硬化組患者男性24例，女性6例；平均（37.3±9.6）歲；肝癌組患者男性24例，女性6例；平均（39.0±11.3）歲；對(duì)照組中男性25例，女性5例；平均（37.7±11.7）歲。各組在性別分布和平均年齡方面差異用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理提示無(wú)意義（P＞0.05）。

1.2 儀器與方法

所有納入對(duì)象在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血，量為3mL，抽取后將其放置于無(wú)抗凝劑的無(wú)菌干燥管當(dāng)中備用，于室溫環(huán)境下放置30min，進(jìn)行離心處理，參數(shù)設(shè)置3000r/min，離心10min，將血清取出并在溫度-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

所用檢測(cè)儀器為人IFN-γ酶聯(lián)免疫試劑盒，產(chǎn)自美國(guó)cusabio生物科技有限公司，儀器產(chǎn)自美國(guó)BioTek公司，型號(hào)為ELX800。

用ELISA方式對(duì)納入對(duì)象的血清IFN-γ濃度進(jìn)行檢測(cè)。用1mL樣本稀釋液溶解標(biāo)準(zhǔn)品，充分混勻，而后可得到標(biāo)準(zhǔn)品原液。進(jìn)行倍比稀釋，可獲得余下6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度[4]。將樣品稀釋液設(shè)為空白。將配置完成所得的8個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品以及樣本都加入到反應(yīng)板孔當(dāng)中，在每個(gè)孔內(nèi)加入100μL，在37℃的環(huán)境下進(jìn)行溫育，時(shí)間為2h。將液體去除，甩干，在每個(gè)孔中加入量為100μL的生物標(biāo)記抗體工作液，在37℃環(huán)境下溫育，時(shí)間為1h[5]。將孔內(nèi)液體去除后甩干，洗板9次，后在每個(gè)孔中加入HRP標(biāo)記親和素工作液，量為100μL，在37℃環(huán)境下溫育，1h后將孔內(nèi)液體去除并甩干，洗板9次后每個(gè)孔加入90μL底物，在37℃環(huán)境下避光顯色[6]，直到肉眼能夠見到標(biāo)準(zhǔn)品出現(xiàn)藍(lán)色梯度后在每個(gè)孔中加入50μL終止液，在反應(yīng)完全終止后的5min內(nèi)用450nm波長(zhǎng)在酶標(biāo)儀上面測(cè)量各個(gè)孔的光密度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)輸入SPSS 20.0軟件，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用t和χ2檢驗(yàn)，計(jì)算所得P＜0.05則數(shù)據(jù)間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)照組正常群體檢測(cè)后提示血清中IFN-γ濃度為（132.4±18.0）pg/mL，肝炎組患者檢測(cè)后提示 血 清 中 IFN-γ 濃 度 為（89.9±12.8）pg/mL，肝硬化組患者檢測(cè)后提示血清中IFN-γ濃度為（70.3±11.3）pg/mL，肝癌組患者檢測(cè)后提示血 清 中 IFN-γ 濃 度 為（62.9±11.4）pg/mL， 兩兩之間IFN-γ指標(biāo)均存在顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

當(dāng)前對(duì)肝癌的發(fā)病機(jī)制還沒有統(tǒng)一認(rèn)識(shí)[7]，但可以肯定的是免疫細(xì)胞功能障礙、細(xì)胞因子失衡是其重要因素[8]，在受到乙肝病毒感染后機(jī)體免疫系統(tǒng)被激活并釋放多種細(xì)胞因子，并最終出現(xiàn)一個(gè)相對(duì)復(fù)雜的免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。在各種乙肝相關(guān)疾病中，IFN-γ始終是重要的細(xì)胞因子，但是該指標(biāo)水平和肝臟疾病之間的聯(lián)系性卻依然沒有明朗[9]。

在肝病患者中，不同疾病類型IFN-γ指標(biāo)的水平分布也并不相同，肝癌患者指標(biāo)相對(duì)最低。可知IFN-γ血清學(xué)指標(biāo)是對(duì)肝病患者診斷的一個(gè)重要參考數(shù)據(jù)。血清IFN-γ在乙型肝炎患者感染病毒初期發(fā)揮作用，在往后病情發(fā)展中，其他細(xì)胞因子會(huì)影響到血清IFN-γ的水平指標(biāo)，這也是不同肝病患者指標(biāo)存在差異的原因[10]。

綜上所述，血清IFN-γ在正常人和肝病患者中存在明顯差異，即使肝病中，不同類型患者的表達(dá)程度也并不相同，可作為對(duì)肝病患者一個(gè)重要診療參考標(biāo)準(zhǔn)。