任振平

（吉林省白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 白城 137000）

0 引言

微核是細(xì)胞染色體畸變?cè)谟薪z分裂間期中的一種表現(xiàn)形式，放射線照射過量微核率會(huì)升高，小劑量輻射對(duì)長(zhǎng)期從事放射性工作人員健康存在一定影響[1]，還可以造成放射工作人員細(xì)胞遺傳方面變化[2]，要加強(qiáng)放射防護(hù)工作[3]，就要對(duì)職業(yè)性放射工作者所受輻射損傷做出客觀評(píng)價(jià)，分析判斷個(gè)人受照劑量。因此檢測(cè)淋巴細(xì)胞微核率成為放射工作者職業(yè)健康檢測(cè)中的重要一項(xiàng)。從2013年起，我院經(jīng)吉林省衛(wèi)生廳審定、批準(zhǔn)，獲得放射工作人員職業(yè)健康檢測(cè)資格[4]，在2017年我們對(duì)382例在崗放射工作者微核率檢測(cè)中，采用吉姆薩染色和瑞氏吉姆薩復(fù)合染色的兩種方法染色，對(duì)兩種染色方法的檢測(cè)結(jié)果比對(duì)分析。

1 對(duì)象與方法

1.1 測(cè)定對(duì)象

吉林省白城市以及周邊地區(qū)放射工作者崗中382人，男322人，女60人。此次檢測(cè)的都是放射診斷人員包括X光室和CT室以及同位素室的放射工作者。由于微核率男女之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[5]，故在此不做分析。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 儀器設(shè)備

恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、低速離心機(jī)、移液器、超凈工作臺(tái)、載玻片。

1.2.2 試劑

（1）RPM1640培養(yǎng)基5mL/瓶

（2）固定液：甲醇（優(yōu)級(jí)純）：冰醋酸（優(yōu)級(jí)純）=3∶1用前新鮮配制

（3）低滲液：0.075MKCL溶液，用前配制（4）吉姆薩染液

（5）瑞氏吉姆薩復(fù)合染液

1.2.3 實(shí)驗(yàn)步驟

（1）無菌采集0.4mL靜脈血。無菌注入5mL 1640培養(yǎng)瓶中混勻放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時(shí)。

（2）開啟培養(yǎng)瓶，用吸管吸棄上清，輕吹混勻，移入10mL離心管中，1500轉(zhuǎn)低速離心10分鐘，吸棄上清，輕吹混勻。

（3）加入2mL0.075MKCL低滲溶液，輕吹混勻，立即加入2mL固定液，輕吹混勻，1500轉(zhuǎn)低速離心10分鐘吸棄上清。

（4）加入3mL固定液，輕吹混勻，1500轉(zhuǎn)離心10分鐘，吸棄上清。

（5）重復(fù)（4）。

（6）剩余固定液，吹散混勻。

（7）滴片：將玻片從冰水中取出，滴片（10cm高度）自發(fā)干燥，每份標(biāo)本至少兩張片。

（8）染色：每份標(biāo)本兩張玻片分別采用吉姆薩染色和瑞氏吉姆薩復(fù)合染色，均染色10分鐘。慢水流沖洗，自然干燥。

（9）閱片：油鏡下，計(jì)數(shù)1000個(gè)完整淋巴細(xì)胞中微核數(shù)。

（10）玻片冷藏處理的效果比熱水處理后的效果好[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

通過對(duì)382例放射工作者淋巴細(xì)胞微核率兩種染色方法檢測(cè)結(jié)果分析，發(fā)現(xiàn)兩種結(jié)果完全相同291人，占76.2%，不同91人，占23.8%。兩種方法微核總數(shù)為218個(gè)，其中吉姆薩染色法微核計(jì)數(shù)107個(gè)，瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法微核數(shù)111，兩種染色法平均109個(gè)，瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法比吉姆薩染色法多3.7%。

2 結(jié)果分析

兩種染色方法存在差異，瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法微核率略高于吉姆薩染色，沒有明顯差異。計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞微核細(xì)胞數(shù)時(shí)，吉姆薩染色法略高于瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法。

3 討論

1）吉姆薩染色和瑞氏吉姆薩復(fù)合染色在淋巴細(xì)胞微核率檢測(cè)上沒有明顯差異。瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法微核率略高于吉姆薩染色，吉姆薩染色法微核細(xì)胞數(shù)卻略高于瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法。說明在檢測(cè)一個(gè)細(xì)胞多個(gè)微核時(shí)，瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法結(jié)果更好些。

2）在閱片時(shí)，兩種染色方法區(qū)別非常明顯。吉姆薩染色側(cè)重細(xì)胞核的著色，而對(duì)胞漿染色較遜色，胞核與胞漿色差小。而瑞氏吉姆薩復(fù)合染色則克服了這一缺點(diǎn)，胞核胞漿染色都良好。胞核與胞漿色差大，胞核紫紅色，胞漿淡藍(lán)色，界線分明，微核清晰易于辨認(rèn)。尤其遇多個(gè)微核時(shí)不易漏檢。

3）綜上所述，在淋巴細(xì)胞微核率檢測(cè)中，瑞氏吉姆薩復(fù)合染色優(yōu)于吉姆薩染色。同樣，瑞氏吉姆薩復(fù)合染色也適用于淋巴細(xì)胞染色體畸變率實(shí)驗(yàn)。選擇合適的染色方法，提高微核的檢出率，降低漏檢率，降低誤檢率，保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，縮短閱片時(shí)間。對(duì)長(zhǎng)期從事職業(yè)放射性工作人員需要加強(qiáng)對(duì)此工種人員認(rèn)知培訓(xùn)[6]，提高防范安全意識(shí)與舉措[7]，因?yàn)殚L(zhǎng)期低劑量電離輻射不但對(duì)放射工作人員的微核率和微核異常有明顯影響[8]，而且還會(huì)對(duì)晶狀體也有影響[9]，加強(qiáng)工作場(chǎng)所X線防護(hù)及個(gè)人健康監(jiān)護(hù)也是今后長(zhǎng)期重要的工作任務(wù)[10]。