黃煌 冼瑩 潘越峻 張扣興

(1.廣州市第八人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣州 510060；2.中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣州 510630)

·論著·

新生隱球菌性腦膜炎患者外周血Th1/Th2及相關(guān)T淋巴細胞水平變化及意義

黃煌1冼瑩2潘越峻1張扣興2

(1.廣州市第八人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣州 510060；2.中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣州 510630)

目的通過檢測新生隱球菌性腦膜炎患者外周血中Th1及Th2 類細胞及NKT細胞、T細胞的分布比例，從患者水平進一步了解機體T輔助淋巴細胞及相關(guān)T淋巴細胞在新生隱球菌感染過程中的作用機制。方法收集新生隱球菌性腦膜炎/腦膜腦炎的16例患者 (HIV檢測陰性)及作為對照組的10例正常健康人外周血標(biāo)本，采用流式細胞技術(shù)檢測標(biāo)本中Th1及Th2類細胞及NKT細胞、γδT細胞的在外周血T淋巴細胞中的分布比例，并采用SPSS 11.0軟件進行統(tǒng)計分析比較。結(jié)果隱腦患者 (接受誘導(dǎo)治療前)Th1細胞在CD4+T淋巴細胞中所占比例為 (13.093±4.618)%，低于正常對照組的比例 (19.582±4.949)%，而Th2細胞所占比例為 (1.769±0.865)%，高于正常對照組的比例 (0.584±0.202)%，差異皆有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.01)；隱腦患者經(jīng)誘導(dǎo)治療好轉(zhuǎn)后Th1細胞在CD4+T淋巴細胞中所占比例為 (16.069±1.516)%，較好轉(zhuǎn)前的比例 (13.589±2.101)%增加，Th2細胞所占比例為 (1.499±0.274)%，較好轉(zhuǎn)前的比例 (1.673±0.290)%下降，但差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)；隱腦患者 (接受誘導(dǎo)治療前)NKT細胞在整體T淋巴細胞中所占比例為 (11.848±2.936)%，低于正常對照組的比例 (17.918±8.088)%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)，而隱腦患者的γδT細胞在整體T淋巴細胞中所占比例為 (9.166±3.989)%，與正常對照組的比例 (9.873±3.509)%對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)；隱腦患者經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后NKT細胞在T淋巴細胞中所占比例為 (14.806±1.513)%，較好轉(zhuǎn)前比例 (11.830±1.350)%增加，γδT細胞所占比例為 (6.984±0.843)%，則較好轉(zhuǎn)前比例 (8.094±2.037)%下降，但差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。結(jié)論新生隱球菌性腦膜炎患者存在Th1細胞減少，Th2細胞增加，及NKT細胞在T淋巴細胞中所占比例下降，其說明新生隱球菌性腦膜炎患者的細胞免疫功能明顯低下；經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后的病例，Th1/Th2失衡狀態(tài)改善，可能提示患者的細胞免疫功能恢復(fù)對疾病預(yù)后起重要作用。

新生隱球菌；感染；Th1/Th2；NKT；γδT

新生隱球菌性腦膜炎 (以下簡稱隱腦)是由新生隱球菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的真菌感染。近年來，由于廣譜抗生素，腎上腺皮質(zhì)激素，腫瘤化療、放療和器官移植后免疫抑制劑的長期廣泛應(yīng)用，以及艾滋病的流行，隱腦的患病率明顯上升。在我國，隱腦大多散發(fā)，主要集中在非艾滋病的其他免疫功能缺陷人群中[1-2]。

國外研究表明T淋巴細胞介導(dǎo)的細胞免疫在抵御新生隱球菌的過程中具有重要的意義，其中，CD4+T細胞在此過程中起著核心作用，Th1及Th2細胞間的平衡狀態(tài)能顯著影響感染的結(jié)局[3-4]。Th1細胞及其分泌細胞因子主要引起細胞免疫，可上調(diào)機體抗新生隱球菌的各種免疫反應(yīng)，而Th2細胞及其分泌細胞因子主要引起體液免疫，可下調(diào)與Th1細胞相關(guān)的各種免疫反應(yīng)，因此，當(dāng)Th1/Th2平衡失調(diào)，Th2細胞增加時，機體抵御新生隱球菌感染能力下降，導(dǎo)致易感性增加及感染后病情進一步發(fā)展。T細胞還存在其他亞群，其中包括自然殺傷T (NKT)細胞和γδT細胞，在各種細胞因子的調(diào)節(jié)下，NKT和γδT細胞能共同調(diào)節(jié)T輔助細胞介導(dǎo)的抗隱球菌免疫反應(yīng)[5]，NKT細胞能調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡向Th1方向傾斜，在新生隱球菌感染中發(fā)揮保護作用，而γδT細胞則可抑制NKT細胞所介導(dǎo)的各種Th1細胞相關(guān)炎癥反應(yīng)，從而下調(diào)了機體抗新生隱球菌感染的能力。目前關(guān)于Th1/Th2平衡、NKT細胞、γδT細胞與新生隱球菌感染間的關(guān)系的研究多只限于動物實驗水平，而對新生隱球菌感染患者組織或血液中NKT細胞、γδT細胞水平變化的研究國內(nèi)外鮮有文獻報道。

本研究通過流式細胞技術(shù)檢測新生隱球菌性腦膜炎患者外周血中Th1及Th2類細胞及NKT細胞、γδT細胞的分布比例，探討是否與正常對照人群存在差異性，其變化是否與病情的轉(zhuǎn)歸呈相關(guān)性，從患者水平進一步了解機體T淋巴細胞免疫在新生隱球菌感染過程中的作用機制。

1 材料與方法

1.1 資料

實驗對象 收集2009年1月～2015年12月在中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院及廣州市第八人民醫(yī)院住院并確診為新生隱球菌性腦膜炎/腦膜腦炎患者的外周血標(biāo)本16例。其中男性11例,女性5例；年齡28～71歲；所有患者入院前均無在外院行抗真菌治療，無接受手術(shù)、化療、放療史，HIV抗體檢測均陰性，無明確接觸史。健康志愿者10例，來源于患者家屬、門診體檢者及工作人員。所有患者及志愿者均知情同意。

診斷 ①有發(fā)熱、頭痛、嘔吐和腦膜刺激征等中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染臨床表現(xiàn)。②腦脊液 (CSF)墨汁染色涂片找到新生隱球菌和 (或)腦脊液新生隱球菌培養(yǎng)陽性?；颊咄瑫r具備以上兩點條件為確診病例。

治療 所有患者治療方案首先聯(lián)合使用兩性霉素B (或兩性霉素B脂質(zhì)體)和氟胞嘧啶進行2周的誘導(dǎo)治療，再使用氟康唑進行8～10周的清除治療，而后可繼續(xù)使用氟康唑進行6～12個月的維持治療。

療效評價 治愈標(biāo)準(zhǔn)為臨床癥狀消失,每周1次連續(xù)3次腦脊液墨汁涂片及培養(yǎng)陰性；好轉(zhuǎn)為臨床癥狀明顯改善，菌體計數(shù)減少，但涂片或培養(yǎng)未轉(zhuǎn)陰；無效為臨床癥狀、體征無明顯改善，菌體無明顯變化或患者死亡。

分組 本研究共入選隱腦患者16例，其中7例經(jīng)抗真菌治療后臨床癥狀明顯改善，腦脊液檢查隱球菌體計數(shù)＜10/mL，腦脊液常規(guī)及生化檢查基本正常，達到病情好轉(zhuǎn)標(biāo)準(zhǔn)。①按抗真菌治療前的隱腦患者與健康志愿者將實驗檢測結(jié)果分為A0組及A1組。②按隱腦患者自身好轉(zhuǎn)前后將檢測結(jié)果分為分為B0組及B1組。

酶抗體及試劑 見表1。

表1 酶抗體及試劑

1.2 實驗步驟

標(biāo)本采集 受試者清晨空腹抽取靜脈血4 mL，各取2 mL注入EDTA抗凝管及肝素鈉抗凝管中，輕輕混勻后靜置。

標(biāo)本處理 Th1及Th2細胞因子 (IFN-γ、IL-4)樣本制備：①從肝素鈉抗凝管中取200 μL血液標(biāo)本于試管中，用RPMI 1640等體積稀釋，加入適量PMA工作液及Ionomycin、Monensin工作液，于培養(yǎng)箱培養(yǎng)4～6 h，加入各20 μL CD3單抗及CD8單抗，室溫避光孵育，分成4管后標(biāo)記，每管加入固定液，孵育后加PBS，離心，棄上清液，加入破膜及溶血液，同時各加入IFN-γ單抗、IL-4單抗及同型對照抗體，再次離心，棄上清液，重懸樣本后予流式細胞儀檢測，每個樣本每次檢測1×104個細胞。②NKT、γδT細胞樣本制備：從EDTA抗凝管中各取100 μL血液樣本加入到不同標(biāo)記的流式管中，取20 μL CD3/16+56抗體及CD3+γδTCR抗體、同型對照試劑分別加入相應(yīng)的流式管內(nèi)，加入溶血素后避光反應(yīng)，再離心及棄上清液后重懸樣本，予流式細胞儀檢測，每個樣本每次檢測1×104個細胞。

流式細胞儀檢測 調(diào)節(jié)儀器補償，采用Cellques軟件獲取分析細胞，以前向角 (FSC)和側(cè)向角 (SSC)散射光散點圖設(shè)門區(qū)分淋巴細胞，以CD3和CD8散點圖設(shè)門區(qū)分Th細胞 (近似等于CD3+CD8-)，以同型對照為陰性群，最終再以IFN-γ、IL-4的散點圖表示Th1細胞和Th2細胞。以CD3散點圖設(shè)門區(qū)分T淋巴細胞，以同型對照為陰性群，再以CD16+CD56、γδTCR散點圖分別表示NKT、γδT細胞。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 流式細胞儀檢測散點圖結(jié)果 (見圖1～10)

2.2 患者、正常對照組結(jié)果分析

隱腦患者組 (治療前)、正常對照組之間Th1/Th2細胞平衡狀態(tài)比較 A0、A1兩組IFN-γ、IL-4單抗陽性細胞各占CD3+CD8-細胞群 (近似等于CD4+T細胞)比例比較。如表2結(jié)果示A0組IFN-γ單抗陽性細胞所占比例較A1組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.01)；A0組IL-4單抗陽性細胞所占比例較A1組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.01)。由以上結(jié)果可知經(jīng)治療前患者組Th1/Th2平衡狀態(tài)失調(diào)Th1細胞在CD4+T淋巴細胞中所占比例減少，Th2細胞所占比例增加 (見表2)。

隱腦患者組好轉(zhuǎn)前后Th1/Th2細胞分布比例比較 B0、B1兩組IFN-γ、IL-4單抗陽性細胞各占CD3+CD8-細胞群比例比較。如表3結(jié)果示經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后隱腦患者IFN-γ單抗陽性細胞所占比例較治療前有所增加，IL-4單抗陽性細胞所占比例較治療前有所下降，但差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。

圖1Th1/Th2 (IFN-γ/IL-4)檢測圖2隱腦患者IFN-γ檢測圖3正常健康人IFN-γ檢測圖4隱腦患者IL-4檢測圖5正常健康人IL-4檢測圖6NKT、γδT細胞檢測圖7隱腦患者NKT細胞檢測圖8正常健康人NKT檢測圖9隱腦患者γδT細胞檢測圖10正常健康人γδT檢測

Fig.1Detection of Th1/Th2 (IFN-γ/IL-4) lymphocytesFig.2IFN-γ of patients with cryptococcal meningitisFig.3IFN-γ of healthy peopleFig.4IL-4 of patients with cryptococcal meningitisFig.5IL-4 of healthy peopleFig.6Detection of NKT,γδT lymphocytesFig.7NKT of patients with cryptococcal meningitisFig.8NKT of healthy peopleFig.9γδT of patients with cryptococcal meningitisFig.10γδT of healthy people

表2A組IFN-γ、IL-4單抗陽性細胞各占CD3+CD8-細胞群比例比較

Tab.2The proportions of Anti-IFN-γ and Anti-IL-4 cells in CD3+CD8-cells of group A

分組抗IFN?γ陽性細胞占CD3+CD8?細胞群比例(%)抗IL?4陽性細胞占CD3+CD8?細胞群比例(%)A013．093±4．6181．769±0．865A119．582±4．9490．584±0．202t?3．3934．229P值0．0020．000

表3B組IFN-γ、IL-4單抗陽性細胞各占CD3+CD8-細胞群比例比較

Tab.3The proportions of Anti-IFN-γ and Anti-IL-4 cells in CD3+CD8-cells of group B

分組抗IFN?γ陽性細胞占CD3+CD8?細胞群比例(%)抗IL?4陽性細胞占CD3+CD8?細胞群比例(%)B013．589±2．1011．673±0．290B116．069±1．5161．499±0．274t?0．9560．440P值0．3580．668

隱腦患者組 (治療前)、正常對照組之間NKT、γδT細胞分布比例比較 A0、A1兩組NKT、γδT細胞各占外周血T淋巴細胞比例比較。如表4結(jié)果示隱腦患者NKT細胞所占比例較正常對照人低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)；而兩組γδT細胞分布比例比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。

隱腦患者組好轉(zhuǎn)前后NKT、γδT細胞分布比例比較 B0、B1兩組NKT、γδT細胞各占外周血T淋巴細胞比例比較。如表5結(jié)果示經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后隱腦患者NKT細胞所占比例較治療前有所增加，γδT細胞所占比例較治療前有所下降，但差異皆無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。

3 討 論

隱腦治療困難，病死率高。在我國目前感染病例報道主要以HIV陰性人群為主，但其中相當(dāng)部分患者發(fā)病前已經(jīng)存在各種基礎(chǔ)疾病，導(dǎo)致機體免疫功能缺陷，T輔助細胞 (CD4+T)、殺傷性T淋巴細胞 (CTL)等重要免疫功能細胞進行性減少。但近年也有研究表明無基礎(chǔ)疾病而新生隱球菌病的發(fā)病人群中可能存在著未察覺的細胞免疫低下情況，如CD4+或CD8+淋巴細胞倒置[6]、淋巴細胞亞型分配不合理等[7]。目前認為T淋巴細胞介導(dǎo)的細胞免疫反應(yīng)在抵御新生隱球菌感染過程中具有重要的意義，其作用機制一般認為與體內(nèi)CD4+T的功能密切相關(guān)，其中Th1/Th2細胞間的平衡狀態(tài)被認為是機體抵御隱球菌感染的核心機制[3-4]。

表4A組NKT、γδT細胞占外周血T淋巴細胞比例比較

Tab.4The proportions of NKT and γδT cells in T lymphocyte of peripheral blood of group A

分組NKT占T淋巴細胞比例(%)γδT占T淋巴細胞比例(%)A011．848±2．9369．166±3．989A117．918±8．0889．873±3．509t?2．677?0．302P值0．0130．768

表5B組NKT、γδT細胞占外周血T淋巴細胞比例比較

Tab.5The proportions of NKT and γδT cells in T lymphocyte of peripheral blood of group B

分組NKT占T淋巴細胞比例(%)γδT占T淋巴細胞比例(%)B011．830±1．3508．094±2．037B114．806±1．5136．984±0．843t?1．4680．504P值0．1680．624

Th1/Th2類細胞因子與新生隱球菌感染的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸都有密切的關(guān)系。在生理條件下，機體Th1/ Th2 細胞的免疫功能處于動態(tài)平衡狀態(tài)，如果該狀態(tài)失衡，Th1類細胞因子減少，Th2類細胞因子占優(yōu)勢，則可導(dǎo)致機體抵御新生隱球菌的免疫功能減弱或者喪失，導(dǎo)致易感性增加[3]。本研究將未經(jīng)抗真菌治療隱腦患者及健康對照人群進行對比，發(fā)現(xiàn)在對CD4+T細胞進行刺激后，患者組IFN-γ表達較健康人低，而IL-4表達水平則較健康人高，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.01)，其結(jié)果表明隱腦患者Th1/Th2平衡狀態(tài)失調(diào)，Th1細胞在CD4+T淋巴細胞中所占比例減少，Th2細胞所占比例增加。而在對經(jīng)治療好轉(zhuǎn)前后的隱腦患者自身進行對比，可發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后好轉(zhuǎn)組Th1細胞所占比例較治療前增加，而Th2細胞所占比例則有所下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)，考慮可能與入選好轉(zhuǎn)組病例數(shù)偏少有關(guān)。

最近發(fā)現(xiàn)T細胞還存在著其他亞群，其中NKT細胞及γδT細胞被認為能共同調(diào)節(jié)T輔助細胞介導(dǎo)的抗新生隱球菌免疫反應(yīng)[5]。在對動物感染模型的實驗中發(fā)現(xiàn)NKT和γδT細胞在新生隱球菌初始感染后可各自通過不同模式迅速在肺組織中聚集，而在使Vα14 NKT細胞合成障礙的基因敲除小鼠中，Th1細胞相關(guān)炎癥反應(yīng)及病原微生物的清除較對照小鼠明顯減弱；在缺乏γδT細胞的小鼠中，機體對新生隱球菌感染的保護性炎癥反應(yīng)反而得到了增強。在對已經(jīng)感染新生隱球菌小鼠注射NKT活化劑α-GalCer進行治療，發(fā)現(xiàn)NKT細胞水平明顯上調(diào)的同時，機體對組織中感染病原體的清除能力也同時得到了增強。

在上述的研究中，NKT、γδT細胞都被認為在機體抵抗新生隱球菌感染進程中起著重要的作用，但其結(jié)論都基于各種動物實驗結(jié)果，目前國內(nèi)外尚無隱球菌感染患者組織或血液中NKT、γδT細胞水平變化研究的報道。本研究將未經(jīng)抗真菌治療隱腦患者及健康對照人群進行對比，發(fā)現(xiàn)在未經(jīng)治療的患者組NKT在T淋巴細胞中的比例較健康人明顯為低，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)，而γδT所占比例則與健康人無明顯差別，經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后患者組NKT比例則較治療前有所增加，γδT比例則有所下降，但其差異性皆無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。

通過本研究結(jié)果可知，新生隱球菌性腦膜炎/腦膜腦炎患者的Th1/Th2平衡狀態(tài)失調(diào)，Th1細胞及其分泌細胞因子減少，Th2細胞及其分泌細胞因子增加，這不僅使機體對新生隱球菌易感性增加，并弱化了之后免疫系統(tǒng)針對隱球菌感染后的各項細胞免疫反應(yīng)，導(dǎo)致病情進一步發(fā)展。而在經(jīng)過抗真菌治療，病情好轉(zhuǎn)，Th1/Th2失衡狀態(tài)同時亦有所改善，Th1細胞較治療前回升，而Th2細胞水平則較前下降，平衡向Th1方向傾斜，這可能提示患者的細胞免疫功能恢復(fù)對疾病預(yù)后起重要作用。從實驗結(jié)果同時可知，患者組的NKT細胞較正常人明顯為低，因此無法產(chǎn)生足夠的IFN-γ及IL-12作用于Th0細胞，使其向Th1方向分化，NKT細胞的減少亦無法激活正常數(shù)量的NK細胞，最終導(dǎo)致機體抗隱球菌感染的能力低下。由于固有免疫T細胞間可能存在著一種相互制約的關(guān)系使Th1及Th2類因子處于一種適當(dāng)?shù)钠胶鉅顟B(tài)，而本實驗結(jié)果提示患者組的γδT細胞與正常人并無明顯差異，導(dǎo)致平衡向Th2方向傾斜，從而下調(diào)了機體抵御新生隱球菌感染能力。

雖然在動物實驗中證實Th1類細胞因子減少可導(dǎo)致其對新生隱球菌易感，但由于無法預(yù)先檢測隱腦患者患病前Th1及Th2類細胞因子及NKT、γδT細胞的分布比例，因此無法確定患病后其比例失調(diào)與患者本身存在免疫功能缺陷有關(guān)，還是由于隱球菌感染自身也可導(dǎo)致。目前也尚無分析感染前后Th1/Th2平衡狀態(tài)變化的文獻報道，因此，關(guān)于Th1/Th2平衡狀態(tài)及NKT、γδT細胞如何影響新生隱球菌感染進程的相關(guān)研究仍有待進一步深入。

而如何人為介入，并安全有效地在Th1/Th2平衡失調(diào)的患者身上重新建立起有效的抵御隱球菌的保護屏障，或通過改變NKT細胞、γδT細胞的活化水平來增強隱球菌感染機體的免疫細胞 (如NK細胞、巨噬細胞等)對隱球菌的殺傷仍有待進一步實驗的明確。目前關(guān)于通過改變Th1/Th2狀態(tài)輔助治療新生隱球菌感染的報道十分稀少，國外研究[8-10]通過增強嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷 (SCID)小鼠Th1類細胞的活性可增強抗真菌藥物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌病的治療作用。部分臨床醫(yī)師認為在隱球菌病抗真菌治療中使用免疫活性肽 (如胸腺肽，可促使Th1類細胞因子分泌增加，Th2類因子分泌減少)作為輔助治療可取得更好的療效，但目前尚無大樣本的臨床報道。而對感染小鼠注射NKT細胞活化劑α-Galcer，發(fā)現(xiàn)能增加Th1細胞及NK細胞所產(chǎn)生的IFN-γ，使Th1/Th2平衡向Th1方向傾斜，增強其免疫系統(tǒng)抵抗新生隱球菌感染的能力，顯著減少感染組織中隱球菌的存活數(shù)[11]。以上研究皆提示在免疫缺陷患者感染性疾病 (包括新生隱球菌性腦膜炎)中，通過改變Th1/Th2平衡狀態(tài)，適當(dāng)引發(fā)Th1型炎癥反應(yīng)將是一種可能有效的治療方法。

通過進一步加深對T輔助細胞及相關(guān)T淋巴細胞與新生隱球菌感染作用機制的了解，可為進一步弄清隱球菌病的發(fā)病機制及臨床探討預(yù)防和治療隱球菌病途徑，開發(fā)新的治療方法或治療藥物提供理論依據(jù)，從而提高新生隱球菌病的防治水平。

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TheproportionsofTh1/Th2andRelevantTlymphocytesinpatientswithcryptococcalmeningitisanditsclinicalsignificance

HUANG Huang1，XIAN Ying2，PAN Yue-jun1，ZHANG Kou-xing2

(1.GuangzhouEighthPeople'sHospital,Guangzhou510060,China;2.TheThirdAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity,Guangzhou510630,China)

ObjectiveThis study is to further understanding the mechanism of T helper cells in course ofC.neofermansinfection from patient's level through measuring the proportions of Th1 /Th2 cell factors and NKT cells,γδT cells in peripheral blood between normal adult and patients.Analyze whether the change presents relevance with the disease prognosis.MethodThe peripheral blood samples were collected from 16 patients with cryptococcal meningitis,and 10 healthy people.The proportions of Th1/Th2 cell factors and NKT cells,γδ T cells were analyzed by flow cytometry (FCM).Results1.The proportion of Th1 cells in CD4 +T lymphocyte of patients with cryptococcal meningitis before treatment was (13.093±4.618)%,less than that of healthy people (19.582±4.949)%,P＜0.01.And the proportion of Th2 cells was (1.769±0.865)%,higher than that of healthy people (0.584±0.202)%,P＜0.01.2.Patients who

treatment showed the increased levels of Th1 cells in CD4 +T lymphocyte (16.069±1.516)% which was higher than those in patients before treatment (13.589±2.101)%,P>0.05.The proportion of Th2 cells in the patients had received treatment was (1.499±0.274)%,less than those of patients before treatment (1.673±0.290)%,P>0.05.3.The proportion of NKT cells in T lymphocyte of patients with cryptococcal meningitis before treatment was (11.848±2.936)%,less than those of healthy people (17.918±8.088)%,P＜0.05.No significant differences of proportions of γδT in T lymphocyte among patients before treatment and healthy people[(9.166±3.989)% vs (9.873±3.509)%],P>0.05.4.Patients who received treatment showed the increased levels of NKT cells in T lymphocyte (14.806±1.513)% which was higher than those in patients before treatment (11.830±1.350)%,P>0.05.The proportion of γδT cells in the patients who had received treatment was (6.984±0.843)%,less than those of patients before treatment (8.094±2.037)%,P>0.05.Conclutions1.The balance of Th1/Th2 falls towards Th2 and the decrease of the proportion of NKT cells among T lymphocytes in patients with cryptococcal meningitis.It suggests that the cell-mediated immunity of patients with cryptococcal meningitis is weakened.2.Once the patients get better after treatment,Th1/Th2 imbalance would be corrected in that the balance turned to Th1 direction.It suggests that the recovery of cell-mediated immunity may improve the prognosis of these disease.

Cryptococusneofermans;infections;Th1/Th2;NKT;γδT

[Chin J Mycol，2017，12(5):268-273]

R 519.4

A

1673-3827(2017)12-0268-06

黃煌，男 (漢族)，碩士，主治醫(yī)師.E-mail:gz8hhh@126.com

張扣興,E-mail:kxz6210@tom.com

2016-09-09

[本文編輯] 衛(wèi)鳳蓮