張美榮，李學(xué)榮

（1.青島大學(xué)，山東 青島 266034；2.青島大學(xué)附屬醫(yī)院兒科血液病區(qū)，山東 青島 266034）

EB病毒感染異型淋巴細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群的研究

張美榮1，李學(xué)榮2

（1.青島大學(xué)，山東 青島 266034；2.青島大學(xué)附屬醫(yī)院兒科血液病區(qū)，山東 青島 266034）

目的 通過對(duì)EB病毒感染者的外周血白細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量變化進(jìn)行觀察，探討EB病毒感染患者的異型淋巴細(xì)胞的分布及其與T淋巴細(xì)胞亞群變化的關(guān)系。方法 選取2016年1月～2017年1月青島大學(xué)附屬醫(yī)院收治的EB病毒感染陽(yáng)性兒童患者48例，對(duì)其開展外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)，分類計(jì)數(shù)和異型淋巴細(xì)胞觀察。如患者的異型淋巴細(xì)胞增高，則對(duì)其開展T細(xì)胞亞群測(cè)定，并與同時(shí)期在該院進(jìn)行健康體檢者50例的檢查結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果 EB病毒感染者和健康體檢者的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)量，淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞分類，以及異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅱ型為EB病毒感染患者的主要異型淋巴細(xì)胞；EB病毒感染患者的CD3+和CD8+T細(xì)胞數(shù)量高于對(duì)照組，CD4+T細(xì)胞數(shù)量和CD4+/CD8+比值低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 相較正常人群，EB病毒感染者的異型淋巴細(xì)胞出現(xiàn)增高，且免疫功能出現(xiàn)紊亂，外周血異型淋巴細(xì)胞增高同機(jī)體免疫系統(tǒng)反應(yīng)程度存在關(guān)聯(lián)。

人類皰疹病毒4型；淋巴細(xì)胞；T淋巴細(xì)胞亞群

EB病毒（epstein-barr virus,EBv），又稱人類皰疹病毒4型[Human herpesvirus 4（HHV-4）][1]。當(dāng)該類病毒入侵機(jī)體后，可改變機(jī)體內(nèi)外周血淋巴細(xì)胞的形狀以及數(shù)量，當(dāng)人體受到EB病毒感染后，機(jī)體中的外周血中，將會(huì)有異型淋巴細(xì)胞出現(xiàn)，以EB病毒感染導(dǎo)致的傳染性單核細(xì)胞增多癥為典型代表,且患者往往會(huì)出現(xiàn)多種免疫細(xì)胞特別是淋巴細(xì)胞亞群及多種免疫因子水平異常[2-3]。本次研究就選取2015年1月～2016年1月青島大學(xué)附屬醫(yī)院收治的EB病毒感染陽(yáng)性患者48例，通過對(duì)EB病毒感染者的外周血白細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量變化進(jìn)行觀察，探討EB病毒感染患者的異型淋巴細(xì)胞的分布及其與T淋巴細(xì)胞亞群變化的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本次研究選取2016年1月～2017年1月青島大學(xué)附屬醫(yī)院收治的EB病毒感染陽(yáng)性兒童患者48例，其中男28例，女20例，年齡5～13歲，平均（7.3±2.9）歲。取同時(shí)期在本院進(jìn)行健康體檢的體檢者50例作為對(duì)照組，其中男30例，女20例，年齡4～14歲，平均（8.8±3.2）歲。兩組在性別，年齡等臨床資料上比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 研究方法 本次研究所采用的試驗(yàn)試劑和儀器包括血液分析儀（購(gòu)自德國(guó)敦昊生物儀器有限公司，型號(hào)GSD5500，所采用試劑為儀器配套試劑，質(zhì)控物為儀器配套質(zhì)控物）；郝的慕斯染色液（美國(guó)Kword公司）；流式細(xì)胞儀（美國(guó)Best vovos公司生產(chǎn)，型號(hào)GD3，試劑為儀器配套試劑。）首先采集EB病毒感染者以及健康體檢者的靜脈血液3 mL，采用EDTAK2抗凝管進(jìn)行血液收集，當(dāng)收集完成后，將抗凝管進(jìn)行搖晃。采用血液分析儀，對(duì)采集血液中的白細(xì)胞進(jìn)行測(cè)定，與此同時(shí)，開展血液涂片工作，采用郝的慕斯染色液對(duì)涂片進(jìn)行染色后，使用油鏡進(jìn)行分類，每份所觀察的白細(xì)胞數(shù)量為200個(gè)，并將觀察結(jié)果進(jìn)行記錄，根據(jù)《臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)》中的相關(guān)判定原則，對(duì)患者血液中的異型淋巴細(xì)胞的形態(tài)開展分型，如患者的異型淋巴細(xì)胞的形態(tài)為空泡型，或者是漿細(xì)胞型，則為Ⅰ型異型淋巴細(xì)胞；如患者的異型淋巴細(xì)胞的形態(tài)為單核細(xì)胞型，或者為不規(guī)則型，則為Ⅱ型異型淋巴細(xì)胞；如患者的異型淋巴細(xì)胞的形態(tài)為幼稚型，則為Ⅲ型異型淋巴細(xì)胞。同時(shí)對(duì)EB感染患者，以及健康體檢者的血液中的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，以及分類計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行比較，包括淋巴細(xì)胞（L%），中性粒細(xì)胞（N%），單核細(xì)胞（M%），嗜堿性粒細(xì)胞（B%），嗜酸性粒細(xì)胞（E%），以及異型淋巴細(xì)胞（異淋%）。同時(shí)對(duì)EB病毒感染患者和健康體檢者開展外周血T細(xì)胞亞群檢測(cè)，檢測(cè)所應(yīng)用的方法為單克隆抗體免疫熒光標(biāo)記法，首先取EDTA-K2抗凝管中收集的血液，采用流式細(xì)胞儀，對(duì)血液中的CD3+，CD4+，CD8+水平，以及CD4+/CD8+比值進(jìn)行計(jì)算。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用c2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EB病毒感染者異型淋巴分型情況 通過觀察可知，EB病毒感染者異型淋巴分型分布為：Ⅰ型3例（6.25%），Ⅱ型43例（89.58%），Ⅲ型2例（4.17%）。

2.2 EB病毒感染患者同健康體檢者的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)結(jié)果比較 EB病毒感染者和健康體檢者的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)量，淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞分類，以及異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.3 EB病毒感染患者同健康體檢者的T細(xì)胞亞群比較 EB病毒感染患者的CD3+T細(xì)胞數(shù)量高于對(duì)照組，CD4+T細(xì)胞數(shù)量低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3 討論

目前醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為，導(dǎo)致異型淋巴細(xì)胞出現(xiàn)的原因?yàn)?，機(jī)體受到病毒或者是某些病原體的感染，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)的巨噬細(xì)胞系統(tǒng)出現(xiàn)異常，發(fā)生異常增生[4]。當(dāng)機(jī)體受到EB病毒或者是某些病原體侵襲后，機(jī)體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞受體會(huì)與進(jìn)入機(jī)體的病毒或病原體進(jìn)行結(jié)合，在進(jìn)行不斷增值，以及在進(jìn)行復(fù)制的過程中，機(jī)體內(nèi)的T淋巴細(xì)胞會(huì)對(duì)其進(jìn)行識(shí)別，從而使得機(jī)體內(nèi)的抑制性T細(xì)胞的增殖得以激發(fā)，同時(shí)自身也會(huì)產(chǎn)生轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致細(xì)胞毒性效應(yīng)的發(fā)生，由于受到刺激，而出現(xiàn)異常增殖的T細(xì)胞，以及數(shù)量不多的B細(xì)胞，一同在機(jī)體外周血中出現(xiàn)，于是就形成了異型淋巴細(xì)胞[5-6]。 因此很多種類的病毒所導(dǎo)致的感染，都是濕的機(jī)體內(nèi)外周血異型淋巴細(xì)胞的數(shù)量增加，比如EB病毒感染，柯薩奇B組病毒感染，弓形體病，自身免疫性疾病，藥物過敏等。在臨床上，將這種現(xiàn)象也被叫做淋巴細(xì)胞類白血病反應(yīng)[7]。

表1 EB病毒感染患者同健康體檢者的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)結(jié)果比較（x±s）

表2 EB病毒感染患者同健康體檢者的T細(xì)胞亞群比較（x±s）

本次研究結(jié)果顯示，EB病毒感染者和健康體檢者的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)量，淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞分類，以及異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；提示EB病毒可對(duì)機(jī)體淋巴系統(tǒng)造成強(qiáng)烈的刺激。從白細(xì)胞計(jì)數(shù)總數(shù)，已經(jīng)分類計(jì)數(shù)的角度來(lái)進(jìn)行分析可以發(fā)現(xiàn)，EB病毒感染患者的WBC雖仍然處于正常范圍內(nèi)，但仍舊低于健康體檢者；分析其原由，可能與患者的粒細(xì)胞受到EB病毒破壞有關(guān)，這也是導(dǎo)致白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)中，淋巴細(xì)胞比例升高，中性粒細(xì)胞相較健康體檢者更低的原因之一[8]。本次研究結(jié)果顯示，EB病毒感染者異型淋巴分型分布以Ⅱ型為主，EB病毒感染患者的CD3+T細(xì)胞數(shù)量高于對(duì)照組，CD4+T細(xì)胞數(shù)量低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示外周血異型淋巴細(xì)胞增高，同機(jī)體免疫功能反應(yīng)存在一定關(guān)聯(lián)。這也和前人的研究結(jié)果相符[9]。此外，有學(xué)者認(rèn)為，EB病毒感染導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)過度活化產(chǎn)生大量的自身抗體和免疫因子可以導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生和發(fā)展[10]。

綜上所述，相較正常人群，EB病毒感染者的異型淋巴細(xì)胞出現(xiàn)增高，且免疫功能出現(xiàn)紊亂，外周血異型淋巴細(xì)胞增高同機(jī)體免疫系統(tǒng)反應(yīng)程度存在直接關(guān)系。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2017.33.033

李學(xué)榮，E-mail：lxr0060@163.com