楊 洋，季昌華，楊京彥，王海濤，于 潔，潘成然，周成軍

邁新·技術交流

連續(xù)超長切片在胃腸活檢病理標本制片中的應用

楊 洋，季昌華，楊京彥，王海濤，于 潔，潘成然，周成軍

病理技術；連續(xù)超長切片；小標本制片

胃腸鏡檢查是目前發(fā)現(xiàn)胃腸道腫瘤及癌前病變最簡便、最安全、最有效的方法，胃腸活檢病理是診斷該類疾病的金標準。工作中，活體胃腸活檢標本較小，在石蠟包埋中，一般采用6～8張切面鋪片僅有限覆蓋病變，造成小標本診斷信息丟失，影響診斷醫(yī)師準確而全面的病理診斷；為呈現(xiàn)最大限度覆蓋病變，避免造成小標本表淺病變診斷信息丟失。胃腸活檢病理采用三段連續(xù)超長切片，行全切片鋪片，最大限度覆蓋病變，避免造成小標本診斷信息丟失。現(xiàn)將具體方法總結如下。

1 材料與方法

1.1標本外檢胃、腸鏡下活檢病理標本(總體積大小0.4 cm×0.3 cm×0.3 cm)。

1.2方法(1)修刮蠟塊：將包埋好的蠟塊脫水盒邊緣多于蠟邊修掉；利用美工刀沿組織周圍2 mm外石蠟四面邊緣90°垂直修邊，蠟塊待切面呈矩形(各個邊長不小于3 mm)，修邊深度超過組織厚度即可。(2)第1次修片切片(圖1)：緩緩修切蠟塊，去除表面多余石蠟暴露組織即停，取下蠟塊放入冰水中水化5 min后，連續(xù)切片7～9片(根據(jù)組織大小為一排數(shù)量)，40 ℃溫水漂片，待組織展平后，左手持載玻片磨砂面，磨砂邊略高于載玻片底端，略豎直放入溫水中待撈片位置即可(不可全部浸入水中)，撈片從磨砂面向載玻片底端撈取組織并依次緩緩上提離開溫水，將組織撈入載玻片上側(cè)緣處。(3)第2次修片切片：將組織大部分修出，同“第1次修片切片”步驟，切第2排組織撈入載玻片長軸中間位置(圖2)。(4)第3次修片切片：此時應將所有組織最大面修出，同“第1次修片切片”步驟，即最大面切一排，撈入載玻片長軸下側(cè)緣。(5)晾凈拷片染色：待載玻片水分晾干后移至拷片儀，65 ℃烤15 min后待組織和載玻片充分黏牢后行常規(guī)HE染色。

①②圖1 第1次修片后切片 圖2 第2次修片后撈片

2 結果

規(guī)范化取材、脫水、浸蠟、包埋、制片后，活體胃腸鏡夾取下的標本較小，一般采用6～8張切面鋪片僅有限覆蓋病變；應用連續(xù)超長切片，行全切片鋪片(圖3、4)，最大限度覆蓋病變，避免造成小標本診斷信息丟失。同時，有的部位會夾取多塊組織，每個蠟塊放≤4塊組織，包埋后的組織利于在同一平面上，便于連續(xù)長切片、行全切片鋪片。

③④圖3 三段連續(xù)超長切片法所制切片 圖4 三段連續(xù)超長切片法數(shù)字切片

3 討論

胃腸鏡檢查的診斷依賴于病理診斷。胃腸鏡活檢取材組織較小，用擦鏡紙包裹組織放入脫水盒內(nèi)，在側(cè)壁標注放入的塊數(shù)，防止標本丟失遺落；同一標本若夾取多塊組織，每個脫水盒放≤4塊組織，包埋時所有組織包于同一平面便于制出3段連續(xù)超長切片。

取材時使用裁剪合適的擦鏡紙包裹待檢組織，防止組織遺失。單獨脫水機處理程序時，可在第1缸95%乙醇中加入1/100體積的1%醇溶性伊紅溶液，以使組織著色便于識別組織利于后續(xù)包埋、切片；若為各種組織混合脫水時在取材時用1%水溶性伊紅將組織染色[1]。

胃腸鏡活檢若夾取到黏膜肌層，夾取下的組織因黏膜肌經(jīng)固定液收縮呈“馬蹄形”或“U形”，該類標本包埋面應按“馬蹄形”或“U形”立埋；若為菲薄組織應按薄面立埋[2]。以便呈現(xiàn)組織全層結構，利于診斷醫(yī)師做出準確全面的病理診斷。

蠟塊修邊時，應把脫水盒邊緣石蠟用美工刀掛掉。組織四周2 mm外的石蠟用美工刀沿表面垂直按壓，修出“矩形”，深度為組織厚度即可，太深時易造成組織太“凸”、與脫水盒粘連牢實度不足，過淺會造成切片逐步增大，增加制片難度?！熬匦巍北阌谶B續(xù)切片，在漂片時連續(xù)成排便于3次切片即可完成該法制片，制片效率高。

載玻片進水過深，造成帶水過多，導致組織移位，增加后續(xù)撈片難度。撈片完畢后，放于漂片儀前端豎直瀝干載玻片與組織間多于水分，已減少因拷片時水的張力導致組織位移變形，組織形態(tài)結構發(fā)生變化，影響組織正確診斷。

運用連續(xù)超長切片，行全切片鋪片，在胃腸等活檢病理中最大限度覆蓋病變，避免造成小標本表淺診斷信息丟失。

[1] 王德田, 董建強. 實用現(xiàn)代病理學技術[M]. 北京: 中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社, 2012:244-245.

[2] 丁 偉, 王德田. 簡明病理學技術[M]. 杭州: 浙江科學技術出版社, 2014:16-18.

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時間：2017-10-23 13:30 網(wǎng)絡出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20171023.1330.026.html

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接受日期：2017-04-16

山東大學第二醫(yī)院病理科，濟南 250033

楊 洋，男，技士。E-mail: sddxdeyyblkyy@163.com

周成軍，男，副主任醫(yī)師，通訊作者。Tel: (0531)85875340，E-mail: chengjunzhou@126.com