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1.廣州一品紅制藥有限公司，廣東 廣州 510760；2.湖北省藥物安全性評(píng)價(jià)中心，湖北 武漢 430000；3.長(zhǎng)沙創(chuàng)新中藥現(xiàn)代化研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410006

血脂泰分散片大鼠急性毒性試驗(yàn)研究

周翠蘭1陳奇有2李繼洪2彭源貴3黃大森1張廣明1*

1.廣州一品紅制藥有限公司，廣東 廣州 510760；2.湖北省藥物安全性評(píng)價(jià)中心，湖北 武漢 430000；3.長(zhǎng)沙創(chuàng)新中藥現(xiàn)代化研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410006

目的考察血脂泰分散片單次經(jīng)口給藥對(duì)大鼠急性毒性作用，初步揭示其可能的毒性作用靶器官，為后續(xù)毒性試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)提供參考信息。方法40只大鼠隨機(jī)分為給藥組和溶媒對(duì)照組，各20只，雌雄各半。采用最大耐受量法，以0.5 %羧甲基纖維素鈉為溶媒，按照5000mg/kg灌胃給藥1次。給藥當(dāng)天連續(xù)觀察6 h，記錄2次，以后每天觀察記錄1次，連續(xù)觀察14d。觀察指標(biāo)包括大鼠體征、體質(zhì)量、食量和飲水量及組織切片。結(jié)果給藥組雄鼠在給藥后1、3、5 d體質(zhì)量明顯低于溶媒對(duì)照組(P<0.05)，給藥后1、3、5、7 d體質(zhì)量增加值明顯低于溶媒對(duì)照組(P<0.05)。給藥組雄鼠和雌鼠給藥后1 d進(jìn)食量明顯低于溶媒對(duì)照組(P<0.05)，其他指標(biāo)給藥組與溶媒對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論大鼠單次經(jīng)口給予血脂泰分散片，最大耐受量大于5000 mg/kg,毒性反應(yīng)表現(xiàn)為抑制體質(zhì)量增加。

血脂泰分散片；大鼠；急性毒性

血脂泰分散片為中藥5類新藥，是從中藥虎杖中提取有效部位，再加以適量的輔料研制而成的分散片，其主要成分為虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素[1,3]。具有祛痰、化瘀、降濁的功效，臨床用于痰瘀互阻型高脂血癥的治療[2-3]。依據(jù)《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[4-7]，在前期藥效學(xué)研究的基礎(chǔ)上，對(duì)血脂泰分散片進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)，觀察動(dòng)物接受過(guò)量供試品所產(chǎn)生的急性中毒反應(yīng)，初步揭示其可能的毒性作用靶器官，為后續(xù)毒性實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)提供參考信息。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 受試藥物 血脂泰分散片 (長(zhǎng)沙創(chuàng)新中藥現(xiàn)代化研究所,規(guī)格：0.2 mg，批號(hào)：081108，含量：虎杖苷74.62 %、白藜蘆醇2.1%、大黃素4.9 %)，密封避光保存。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)Wistar大鼠，雌雄各20只，年齡6～9周，體質(zhì)量♀：122～146 g，♂：138～150 g，動(dòng)物來(lái)源于湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[生產(chǎn)許可證號(hào)：SCSK(鄂)2008-0005，使用許可證號(hào)：SYXK(鄂)2004-0023]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢疫時(shí)間為5d。飼養(yǎng)于屏障環(huán)境動(dòng)物房，光照12 h明、12 h暗交替，室溫20～23 ℃，相對(duì)濕度41%～67 %。光照強(qiáng)度、壓差等環(huán)境條件符合SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境條件。雌雄動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，每籠1只。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物分組 40只大鼠按照相應(yīng)的動(dòng)物分組標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)格(SOP)，隨機(jī)分為2組，即給藥組和溶媒對(duì)照組，每組20只，雌雄各半。

2.2 給藥方法 采用最大耐受量法，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物禁食12h，飲水自由。試驗(yàn)時(shí)，用羧甲基纖維素鈉配制受試藥物濃度為250 mg/mL,按照20 mL/kg灌胃給藥1次。受試藥物密封避光保存臨用前避光配制。

2.3 觀察指標(biāo) 給藥當(dāng)天連續(xù)觀察6h，記錄2次，以后每天觀察記錄1次，連續(xù)觀察14d。觀察指標(biāo)包括毛色、眼睛、呼吸、分泌物、排泄物、自主和中樞神經(jīng)系統(tǒng)行為表現(xiàn)，以及動(dòng)物的死亡數(shù)目和死亡時(shí)間。詳細(xì)記錄每只動(dòng)物出現(xiàn)毒性反應(yīng)的癥狀及開(kāi)始和消失的時(shí)間；記錄給藥前后1、3、5、7和14d動(dòng)物的體質(zhì)量、進(jìn)食量和飲水量。所有動(dòng)物包括死亡或處死的動(dòng)物均進(jìn)行尸檢，記錄病變情況。若有肉眼可見(jiàn)變化時(shí)則進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。

3 結(jié)果

單次進(jìn)口給予血脂泰分散片5000 mg/kg，試驗(yàn)期間無(wú)動(dòng)物死亡；大鼠毛色、眼睛、呼吸、分泌物、自主和中樞神經(jīng)系統(tǒng)行為表現(xiàn)均未見(jiàn)異常，動(dòng)物無(wú)中毒表現(xiàn)。給藥組雄鼠在給藥后1、3和5 d體質(zhì)量明顯低于對(duì)照組，給藥后1、3、5和7 d體質(zhì)量增加值明顯低于對(duì)照組，給藥后7 d和14 d與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05)；給藥組雌鼠體質(zhì)量與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。給藥組雄鼠和雌鼠給藥后1 d進(jìn)食量明顯低于對(duì)照組，3、5、7和14 d與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異；給藥組雄鼠和雌鼠飲水量與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05)。見(jiàn)表2。試驗(yàn)最終處死動(dòng)物肉眼觀察全身組織未見(jiàn)明顯病變。

組別動(dòng)物數(shù)/只性別給藥后不用時(shí)間的體質(zhì)量0d1d3d5d7d14d對(duì)照組10♀實(shí)測(cè)值136±5141±7150±8162±8169±8197±10增加值0±010±620±631±639±667±910♂實(shí)測(cè)值144±4162±5181±6197±6213±7282±8增加值0±018±337±553±669±5138±8給藥組10♀實(shí)測(cè)值131±5136±5152±7161±8170±9204±14增加值0±05±8 21±10 30±11 40±11 73±1610♂實(shí)測(cè)值144±4152±7? 175±5? 190±5?209±7283±8增加值0±0 7±4?? 30±4? 46±3?65±4138±6

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.001。

組別動(dòng)物數(shù)/只性別0d1d3d5d7d14d對(duì)照組10♀攝食量/g/100g141±14177±17148±10130±12112±10100±11飲水量/mL/100g59±933±639±1330±7 26±1224±710♂攝食量/g/100g165±16184±11152±05140±10131±09107±04飲水量/mL/100g51±2032±330±626±520±421±4給藥組10♀攝食量/g/100g149±15108±14?151±10132±05114±06107±07飲水量/mL/100g58±1040±1838±830±423±425±810♂攝食量/g/100g208±140112±12??152±07142±09132±06110±11飲水量/mL/100g52±1731±536±929±719±320±4

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.001。

4 討論

血脂泰分散片為虎杖藥材提取有效部位而制成的分散片，主要成分為芪類及蒽醌類化合物，含虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素[8,11-12]，其主要成分均具有良好的生物活性。有研究顯示[8-9]，虎杖藥材含有多種有效成分，如蒽醌類、黃酮類、芪類、酚類等化合物，具有多種藥理作用，包括抗炎、抗病毒、抗菌、調(diào)血脂、抗血栓、抗氧化、抗腫瘤等 。其廣泛的藥理活性，且資源量大易獲得，極具開(kāi)發(fā)價(jià)值和臨床應(yīng)用前景。通過(guò)開(kāi)展動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)行藥理毒理研究，有利于推動(dòng)產(chǎn)品開(kāi)發(fā)，為臨床研究提供參考依據(jù)。

根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用最大耐受量5000mg/kg大鼠單次灌胃給藥，給藥當(dāng)天連續(xù)觀察6h，以后每天觀察1次，連續(xù)觀察14d。觀察指標(biāo)包括體征、體質(zhì)量、食量和飲水量及組織切片。結(jié)果表明，該藥最大耐受量對(duì)大鼠體質(zhì)量有抑制作用，其他指標(biāo)均未有明顯變化，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未出現(xiàn)死亡，試驗(yàn)最終處死動(dòng)物肉眼觀察全身組織未見(jiàn)明顯病變。血脂泰分散片急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大鼠單次經(jīng)口給予血脂泰分散片，最大耐受量大于5000mg/kg,毒性反應(yīng)表現(xiàn)為抑制體質(zhì)量增加，說(shuō)明該藥臨床使用安全范圍較大，毒副作用較小。

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StudyonAcuteToxicityofXuezhitaiDispersibleTabletsonRats

ZHOU Cuilan1CHEN Qiyou2LI Jihong2PENG Yuangui3HUANG Dasen1ZHANG Guangming1*

1. Guangzhou Yipinhong pharmaceutical Co.,LTD, Guangzhou 510760,China；2. Hubei Province Drug Safety Evaluation Center, Wuhan 430000,China；3.Changsha Institute of Innovation in Traditional Chinese Medicine, Changsha 410006,China

ObjectiveTo investigate the acute toxicity to rats of a oral single-dose of Xuezhitai dispersible tablets, reveal the potential toxicity target organs preliminaryly, and provide references for the dose-design of subsequent toxicity tests and clinical trials.Methods40 rats were randomly divided into the test group and the vehicle control group,20 rats in each group male and female half. Use the maximum tolerance method, the solvent is 0.5 % carboxymethyl cellulose sodium, 5000 mg/kg a time by intragastric administration. Give a continuous observation of 6 h and 2 records on the first day of administration, then observe 1 time daily for 14 days. The indicators include rats' physical characteristics, body weight, food intake and water intake and tissue biopsies.ResultsThe weights of male rats in test group are significantly lower than the control group (P< 0.05) on d1,d3,d5 post-dose. And weight gains are also significantly lower than the control group(P<0.05). Food-intakes are significantly lower than the control group(P<0.05)on the second day of dosing. Other indicators are no significant different(P>0.05).ConclusionThe maximum tolerance is greater than 5000 mg/kg and the toxicity is shown to inhibit weight gain of a oral single-dose of Xuezhitai dispersible tablets.

Xuezhitai Dispersible Tablets; Rat; Acute Toxicity

R258.5

A

1007-8517(2017)19-0024-03

2017-08-16 編輯：鄧佳麗)

廣東省重大科技專項(xiàng)(NO：2012A080204008)；廣州市重大科技專項(xiàng)(NO：201300000044)。

周翠蘭(1978-)，女，漢族，碩士研究生，工程師，研究方向?yàn)樾滤庨_(kāi)發(fā)。E-mail：air1022@126.com

張廣明(1966-)，男，漢族，博士研究生，高級(jí)工程師，研究方向?yàn)樾滤庨_(kāi)發(fā)。E-mail：gmzhang2005@163.com