袁濤秀，陳 芳

（1.浙江迪安司法鑒定中心，浙江 杭州310000；2.浙江漢博司法鑒定中心，浙江 杭州310000）

親子鑒定中女性Amelogenin性別基因座異常1例

袁濤秀1，陳 芳2

（1.浙江迪安司法鑒定中心，浙江 杭州310000；2.浙江漢博司法鑒定中心，浙江 杭州310000）

法醫(yī)遺傳學；親子鑒定；釉原蛋白質；性反轉

1 案 例

1.1 簡要案情

王某，女，28歲，要求對本人與領養(yǎng)孩子（女孩）之間有無親生血緣關系進行鑒定，身份證顯示王某社會性別為女，女性特征明顯，據王某口述，有短暫月經史，現已停經。根據知情同意原則，采集王某與孩子的血樣進行STR分型檢測。因王某Amelogenin性別基因座檢測結果顯示其生物學性別與社會性別不符，故增加檢測了王某帶毛囊的毛發(fā)及口腔拭子。

1.2 檢驗方法

1.2.1 DNA提取

采用常規(guī)Chelex-100法[1]分別提取王某血樣、帶毛囊的毛發(fā)、口腔拭子及孩子血樣等生物學檢材DNA，采用Golden e ye?DNA身份鑒定系統20A試劑盒［基點認知技術（北京）有限公司］進行19個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座分型，MicroreaderTM29Y Direct ID System（閱微基因技術有限公司）進行29個Y-STR基因座分型，AGCU X19 STR熒光檢測試劑盒（無錫中德美聯生物技術有限公司）進行19個X-STR基因座分型，Y染色體微缺失試劑盒（北京閱微基因技術有限公司）進行SRY基因檢測，擴增體系和擴增程序按相關操作手冊進行。

1.2.2 DNA分型

采用9700型PCR儀（美國AB公司）進行PCR擴增，3100型基因分析儀（美國Thermo Fisher Scientific公司）進行電泳分離，GeneMapper?ID v3.2.1軟件（美國Thermo Fisher Scientific公司）處理電泳數據，實驗過程按照操作手冊進行。

1.3 檢驗結果

1.3.1 STR分型檢測結果

在常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型檢驗中，王某血樣、帶毛囊的毛發(fā)、口腔拭子常染色體STR分型結果一致，且Amelogenin性別基因座分型均為XY，孩子分型正常。

在Y-STR基因座的分型檢測中，王某血樣、帶毛囊的毛發(fā)、口腔拭子等生物學檢材在29個Y-STR基因座均檢測出分型結果，且分型結果一致，Y-STR基因座分型結果詳見表1。在X-STR基因座的分型檢測中，王某血樣、帶毛囊的毛發(fā)、口腔拭子等生物學檢材在每個X-STR位點均檢測出一個等位基因，且分型結果一致，X-STR基因座分型結果詳見表2。

表1 王某血樣、帶毛囊的毛發(fā)、口腔拭子Y-STR檢測結果

表2 王某血樣、帶毛囊的毛發(fā)、口腔拭子X-STR檢測結果

1.3.2 SRY基因檢測結果

對王某進行SRY基因檢測，檢測結果SRY為陽性（圖1）。

圖1 SRY基因檢測結果

2 討 論

X、Y染色體均屬人類的性染色體，X染色體正常男性只有一條，正常女性有兩條；Y染色體為正常男性特有，呈父系單倍型遺傳。本案例，通過對王某血樣、口腔拭子、帶毛囊的毛發(fā)進行分型檢測，結果顯示Amelogenin性別基因座分型為XY，與社會性別矛盾。隨后采用Y-STR試劑盒進行檢測，29個Y-STR基因座均檢測出分型結果，印證了王某有1條Y染色體。采用X-STR試劑盒進行分開檢測，結果顯示王某在每一個X-STR基因座均只有一個等位基因，表明王某只有1條X染色體。最后對王某進行SRY基因檢測，結果為陽性，其中SRY是睪丸決定因子最關鍵的基因。因此，結合以上檢測結果，推測王某可能為46，XY女性性反轉患者。性反轉綜合征為染色體性別和性腺不一致的一類疾病，主要有46，XX男性[2]和46，XY女性兩種類型。文獻[3，4]報道，約有10%～15%的46，XY女性性反轉的發(fā)生與SRY基因的突變有關。

在日常的親子鑒定檢案中，遇到Amelogenin性別基因座檢測結果與社會性別相矛盾[5]時，首先要確保檢材的準確性，可通過重新采樣進行確認，重新采樣時，可采集不同類別的生物學檢材進行驗證。然后加做Y-STR、X-STR及SRY基因座進行檢驗，如果YSTR檢測出擴增產物，X-STR每個基因座均只有一個等位基因，且SRY基因檢測結果為陽性時，可以初步判斷為46，XY女性性反轉，有條件的實驗室可以進一步進行染色體核型分析進行確證?？偠灾?，在親子鑒定過程中，遇到性反轉患者，應建議其去醫(yī)院進行染色體核型分析或SRY基因的常規(guī)診斷，防止性腺進一步惡變。

[1]公安部物證鑒定中心.法庭科學DNA實驗室檢驗規(guī)范：GA/T 383-2014[S].北京：中國標準出版社，2014.

[2]陳芳，章紅星，陳建紅，等.親子鑒定中46，XX男性性反轉1例[J].法醫(yī)學雜志，2015，31（5）：415-416.

[3]蔣三亮，張思仲，楊軍.性反轉綜合征患者的分子病因學研究[J].中華醫(yī)學遺傳學雜志，1993，10（1）：18-20.

[4]周暢，李麓蕓，傅俊江，等.46，XY女性性反轉患者SRY基因的一個新突變類型[J].中華醫(yī)學遺傳學雜志，2003，20（5）：369-372.

[5]黃江平，楊帆，劉亞楠，等.性別鑒定中Amelogenin基因座變異的研究進展[J].法醫(yī)學雜志，2016，32（5）：371-377.

DF795.2

B

10.3969/j.issn.1004-5619.2017.04.033

1004-5619（2017）04-0446-02

2017-06-08）

（本文編輯：張素華）

袁濤秀（1982—），女，主要從事法醫(yī)物證學鑒定；E-mail：yuantx@dazd.cn

陳芳，女，主檢法醫(yī)師，主要從事法醫(yī)物證學鑒定；E-mail：chen-fang@zju.edu.cn