夏鴻林,胡翔,張前珍

(1.長(zhǎng)江職業(yè)學(xué)院，武漢 430074；2.上海眾勝醫(yī)藥科技有限公司，上海 201203； 3.上海玉安藥業(yè)有限公司，上海 201415)

四磨湯糖漿的制備及含量測(cè)定

夏鴻林1,胡翔2,張前珍3

(1.長(zhǎng)江職業(yè)學(xué)院，武漢 430074；2.上海眾勝醫(yī)藥科技有限公司，上海 201203； 3.上海玉安藥業(yè)有限公司，上海 201415)

本研究的目的是確定四磨湯糖漿的制備工藝和含量測(cè)定方法，所采用的方法是對(duì)四磨湯糖漿的工藝進(jìn)行了優(yōu)選研究。采用高效液相色譜法測(cè)定四磨湯糖漿中柚皮苷的含量。通過(guò)對(duì)加水量進(jìn)行選擇,確定了四磨湯糖漿水提的最佳工藝。柚皮苷的線性范圍為13.5～135.0μg·ml-1(r=0.9997)，樣品平均加樣回收率(n=6)為99.2%，RSD為1.1%。由此可見，四磨湯糖漿工藝穩(wěn)定,質(zhì)量可控。含量測(cè)定方法結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。

四磨湯糖漿;制備工藝；含量測(cè)定；柚皮苷

四磨湯糖漿是在四磨湯口服液基礎(chǔ)上制成的中成藥，具有順氣降逆，消積止痛的功效。四磨湯口服液臨床應(yīng)用廣泛,療效顯著。目前尚無(wú)四磨湯口服液改劑型為糖漿劑的相關(guān)報(bào)道，四磨湯口服液臨床上主要應(yīng)用于嬰幼兒和兒童，而本品的口感經(jīng)臨床實(shí)踐和實(shí)際嘗試，口感較差，臨床應(yīng)用于嬰幼兒和兒童時(shí)容易造成嬰幼兒和兒童的拒絕。而糖漿劑因?yàn)楹橇枯^高，口感較甜，很容易被嬰幼兒和兒童接受，另外，糖漿劑中大量的糖自身就是天然防腐劑，能防止糖漿中藥物的變質(zhì)，比口服液更穩(wěn)定。本研究在保持四磨湯口服液藥味和配比不變的情況下,將四磨湯口服液改劑型為糖漿劑，取得了滿意的效果。

本研究為了控制四磨湯糖漿的質(zhì)量，采用高效液相法測(cè)定了其中柚皮苷的含量。研究表明，所建立的含量測(cè)定方法快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可為四磨湯糖漿的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

一、儀器與試藥

(一)儀器

SARTORIUS AG BP211D電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；Agilent 1100高效液相色譜儀;DAD紫外檢測(cè)器。

(二)試藥

柚皮苷對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110722-201111)；四磨湯糖漿(自制，批號(hào)：20140901,20140902,20140903)；蔗糖(武漢市金德糖酒有限公司)、山梨酸鉀(武漢市金德糖酒有限公司)。

二、方法與結(jié)果

(一)提取工藝研究

以四磨湯口服液的制備工藝為基本工藝路線，對(duì)制備工藝中沒有明確的提取用水量進(jìn)行了研究，確定了一個(gè)較為合理的工藝路線。

1.工藝

按四磨湯口服液的制備工藝制備干浸膏,測(cè)干浸膏中柚皮苷含量。

2.考察的指標(biāo)

以柚皮苷的總含量為考察的指標(biāo)。

3.柚皮苷含量測(cè)定方法

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.1%醋酸(38:62)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為283nm。理論板數(shù)按柚皮苷計(jì)應(yīng)不低于3000。

對(duì)照品溶液的制備:精密稱取柚皮苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含60ug的溶液，即得。

供試品溶液的制備:取本品適量，研細(xì)，稱取約35mg，加甲醇50ml稱定重量，超聲30分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

4.提取時(shí)加水量的考察

從表1中數(shù)據(jù)可知：當(dāng)提取用水量為方案2時(shí)，再增加用水量，柚皮苷的含量不再有顯著的提高，因此我們選擇方案2作為提取時(shí)的加水量。

表1 加水量的考察

(二)四磨湯糖漿生產(chǎn)工藝流程

1.藥材的提取

取處方量的藥材，用蒸餾法提取芳香水600ml，另器保存；藥液濾過(guò)，藥渣加水煎煮二次，第一次八倍水，第二次6倍水，每次0.5小時(shí)，濾過(guò)，合并煎液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10(60～70℃)的清膏，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏12小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味。

2.糖漿的制備

將以上處理后的溶液加入蔗糖與適量的防腐劑，煮沸使溶解，濾過(guò)，與上述芳香水合并，加水至規(guī)定量，混勻，即得。

三、含量測(cè)定

(一)色譜條件

色譜柱：ZORBAX C18柱(安捷倫公司)

流動(dòng)相：甲醇-0.1%醋酸(38:62)

柱溫：20℃

波長(zhǎng)：283nm

流速：1.0ml/min

理論板數(shù)按柚皮苷峰計(jì)算不低于3000，柚皮苷峰與相鄰峰的分離度大于2.0。

(二)溶液制備

1.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取柚皮苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含60ug的溶液，即得。

2.供試品溶液

精密量取本品1ml,置10ml量瓶中，加入80%甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

3.陰性對(duì)照溶液

按供試品樣品的制備方法，取枳殼的樣品，照處方量制備陰性對(duì)照溶液。

(三)空白試驗(yàn)

按上述色譜條件，分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各10 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明：陰性對(duì)照品無(wú)干擾，含量測(cè)定方法可行。HPLC圖譜見圖1。

圖1 四磨湯糖漿的高效液相色譜圖

(四)線性關(guān)系考察

1.線性儲(chǔ)備液的制備

稱取適量柚皮苷對(duì)照品，加甲醇，搖勻，制成每1ml含柚皮苷270.0μg的對(duì)照溶液。

2.線性關(guān)系測(cè)定

分別精密量取線性儲(chǔ)備液0.5ml、1ml、2ml、3ml、5ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。依次進(jìn)樣，記錄色譜峰面積。將峰面積A對(duì)相應(yīng)的濃度C進(jìn)行回歸處理，回歸方程為：A=19.14C-20.69(r=0.9997)，結(jié)果表明：在13.5～135.0μg/ml濃度范圍內(nèi),柚皮苷峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。

(五)精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液(每1ml含柚皮苷54.0μg)重復(fù)測(cè)定6次，結(jié)果峰面積的RSD為0.73%，表明方法的精密度良好。

(六)重復(fù)性試驗(yàn)

按含量測(cè)定方法，取同一批四磨湯糖漿樣品(批號(hào)：20140301)進(jìn)行多次含量測(cè)定，結(jié)果樣品中柚皮苷含量的RSD為0.59%，表明重現(xiàn)性良好。

(七)被測(cè)樣品的穩(wěn)定性試驗(yàn)

按含量測(cè)定方法，取同一批四磨湯糖漿樣品(批號(hào)：20140301)，分別在0,2,4,6,8h依次測(cè)定其中柚皮苷的含量，測(cè)得峰面積的RSD為1.22%。結(jié)果表明四磨湯糖漿的樣品溶液在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

(八)回收率試驗(yàn)

取已測(cè)含量的四磨湯糖漿樣品(批號(hào)：20140301)0.5ml,置于10ml量瓶中，加入精密稱定的柚皮苷對(duì)照品適量,用80%甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò)，取續(xù)濾液，再按上述高效液相色譜法測(cè)定其中的柚皮苷的含量，并計(jì)算其回收率，表2中結(jié)果表明：6份樣品6次測(cè)定平均回收率為99.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%。

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

(九)樣品測(cè)定

取本品3批中試樣品，按上述色譜條件，測(cè)定樣品中柚皮苷的含量，結(jié)果見表3。

表3 樣品含量測(cè)定結(jié)果(n=3)

四、討論

(一)檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

對(duì)柚皮苷對(duì)照品溶液進(jìn)行紫外掃描，顯示在283nm處有最大吸收峰，此結(jié)果與四磨湯口服液國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)WS-10040(ZD-0040)-2002[1]，因此選用283nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，

(二)流動(dòng)相條件篩選

本實(shí)驗(yàn)首先參照四磨湯口服液國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)WS-10040(ZD-0040)-2002[1]的含量測(cè)定方法，流動(dòng)相為甲醇-1%醋酸(38:62),試驗(yàn)結(jié)果顯示圖譜柚皮苷保留時(shí)間的重現(xiàn)性較差,因此改用甲醇-0.1%醋酸(38:62)為流動(dòng)相,解決了這個(gè)問(wèn)題。故選擇甲醇-0.1%醋酸(38:62)為本系統(tǒng)流動(dòng)相。

(三)供試品溶液制備方法的考察

采用三種方法對(duì)供試品溶液的制備方法進(jìn)行了考察。

方法1：參照四磨湯口服液國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[1]的處理方法。

方法2：精密量取本品1ml,置10ml量瓶中，加入80%甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

方法3：精密量取本品1ml,置10ml量瓶中，加入80%甲醇至刻度，超聲處理30分鐘,搖勻,濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

從三種不同方法制備的同一批樣品的結(jié)果表明:雖然三種方法的測(cè)定結(jié)果相差很小,但方法2操作最簡(jiǎn)便,,故選用方法2作為供試品溶液的制備方法。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編(內(nèi)科脾胃分冊(cè))[M].中華人民共和國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局,2002.

[2]韓棉梅,梁嘉愷,陶雙友,等.四磨湯口服液對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙模型大鼠胃殘留、小腸推進(jìn)率及結(jié)腸P物質(zhì)的影響[J].方藥研究，2011，43(12)：114.

[3]鄒元宵,陳子淵,吳秀聰.四磨湯口服液對(duì)胃腸功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，1999，5(9)：36.

[4]趙先平,肖新云,李丹丹,等.四磨湯口服液對(duì)脾虛便秘小鼠療效的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)驗(yàn)研究，2015，31(4)：160.

[5]董志云,白曉峰.四磨湯口服液促進(jìn)腹部手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)的療效觀察[J].中西醫(yī)，2010，16(19)：163.

[6]陳佩文,周桂秀,劉劍英.四磨湯口服液治療老年性便秘療效觀察[J].臨床研究，2008，43(1)：33.

[7]孟繁春.四磨湯口服液聯(lián)合培菲康治療小兒功能性消化不良療效觀察[J].藥物與臨床，2014，12(8)：820.

[8]唐偉,陳再林,文春艷.四磨湯口服液治療新生兒功能性消化不良27例臨床觀察[J].臨床報(bào)道,2010,16(10):33.

[9]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典.一部[S].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社出版,2015.

PreparationandContentDeterminationofSimotangSyrup

Xia Honglin1，Hu Xiang2，Zhang Qianzhen3

(1.ChangjiangPolytechnic,Wuhan430074; 2.ShanghaiZhongshengPharm-techCo.,Ltd,Shanghai201203; 3.ShanghaiYuanPharmaceuticalCompany,Shanghai201415,China)

It is apparent that the objective of study isto establish the preparation technology and the method for content determination of Simotang syrup. The adopted method is tomake an optimized survey of the production process of Simotang syrup. Through adopting a HPLC method for determination of naringin in Simotang syrup, it finds that the quantity of water and optimum process of water extraction was determined. Clearly, The linear ranges of naringin are located in 13.5～135.0μ g·ml-1 (r=0.9997). The average recovery rate is 99.2% (n=6), and RSD is 1.1%. Therefore, it is concluded that the process of the syrup is stable and the quality is controllablefor industrial production. In short, the method for content determination is accurate and reproducible. There is no doubt that the method can effectively be used for quality control of Simotang syrup.

simotang syrup; preparation technology; content determination;naringin

R286

A

1673-3878(2017)05-0079-05

2017-03-20

夏鴻林(1961-)，男，湖北武漢人，長(zhǎng)江職業(yè)學(xué)院高級(jí)講師;主要研究方向:藥物制劑工藝和質(zhì)量控制.